우리나라에서 미승인 품목인 유전자변형 감자 EH92-527-1를 검출하기 위한 duplex PCR 검사법이 개발되었다. 감자의 내재유전자로 UDP-glucose pyrophosphorylase (UGP)가 선별되었고, 14개 다른 작물을 이용하여 특이성이 확인되었다. 유전자변형 감자에 삽입된 T-DNA 영역과 감자 게놈 사이의 연결 부위를 증폭하도록 프라이머 EH92-F/R 쌍이 제작되었고, 몇 개의 다른 유전자 변형 작물을 이용하여 특이성이 확인되었다. 서론에서 언급한 바와 같이 BASF사에서 각 개발된 유전자변형 감자 EH92-527-1과 BPS-A1020-5가 GBSS 유전자를 동일하게 포함하고 있으나 본 연구에서 개발한 검사법은 event-specific primers를 이용하였기 때문에 유전자변형 감자 EH92-527-1에만 특이성을 나타낸다. 이와 같이 개발된 duplex PCR 검사법의 검정한계치는 약 0.05%이다. 이러한 duplex PCR 검사법이 우리나라에 미승인 유전자변형 감자의 모니터링에 유용하게 사용될 것으로 판단한다.
현재 유전자 변형 작물의 검정에는 CaMV 35S프로모터 혹은 NOS 터미네이터 등과 같이 형질전환에 널리 이용하는 유전인자를 검출하기 위한 PCR 기술이 널리 이용되고 있다. 본 연구에서는 유전자변형 감자를 검정하기 위한 새로운 기술로서 감자특이 internal control과 CaMV 35S 프로모터 혹은 NOS 터미네이터에 특이적인 프라이머를 이용한 경쟁적 이중PCR 방법을 개발하였다. 감자 유전자의 RAPD 결과 이용한 모든 품종에서 약 530 bp인 homozygous DNA 밴드를 증폭하는 특이 primer (rAGU4A)를 찾아 감자특이 internal control 증폭용으로 이용하였다. 이 프라이머에 의해 증폭되는 DNA는 TC 염기의 반복 빈도가 높은 repetitive 혹은 microsatellite DNA (AF541972)로 판단되었다. 이와 같은 단일 프라이머 internal control 증폭용으로 이용한 경쟁적 이중 PCR은 비특이적 PCR 산물을 줄일 수 있고, 기존 방법들에 비해 경제적이다. 현재 상품화되어 있는 유전자 변형 감자품종인 'New Leaf'의 경우도 형질전환에 이용한 유전인자로 CaMV 35S 프로모터와 NOS 터미네이터가 모두 이용되었으므로 이 기술을 이용할 경우 현재까지 상품화된 유전자 변형감자들의 효율적인 검정 기술로 이용될 수 있을 것으로 기대된다.
New breeding method by genetic engineering is expected as a key technology to solve food shortage due to the growing world population in the year 2000s. Many genetically modified organisms (GMOs) were already developed and the commercial cultivation had started. The first GMO, Flavr Savr tomato, which rotted at a much slower pace than ordinary ones, was developed in US in 1994. Since then, over than 70 different agricultural products including corn, cotton, soybean, papaya, potato, and squash made with genetically modified plants are reportedly on sale worldwide. Supporters favor the GMOs because they have greater yields, longer shelf lives and stronger resistance to disease and insects. On the other hand, opponents say that the supporters ignore a potential danger that they may damage the environment as well as human beings. To assure the safe development and use of GMOs as food and other biotech products, the possible risks on biological environment and human health should be throughly examined and regulated by developer and government. Because the biosafety problem is a global, environmental, and trade issue, a new international treaty is under development. The Cartagena Protocol on Biosafety was adopted at the 1 st Extraordinary Conference of Parties of the Convention on Biological Diversity which was held at Mont-real, Canada, Jan. 29th, 2000. The adoption of the Protocol is seen as a breakthrough in that it is based on the" Precautionary Principle" despite scientific uncertainties surrounding potential risks that GMOs may inflict on human health and the environment and that it has laid the ground for introduction of specific steps to handle international trading of GMOs. In this paper, the authors would like to introduce the current status and perspective of environmental and human risk assessment of GMOs.t of GMOs.
A method was developed using enhanced liquid chromatography coupled with electrospray ionization mass spectrometry for the analysis and quantitation of 2 main potato glycoalkaloids, $\alpha$-chaconine, and $\alpha$-solanine, without any pre-concentration or derivatisation steps. Calibration curves generated by this technique exhibited a linear dynamic range from 0.025 to $50{\mu}g/mL$ and from 0.05 to $50{\mu}g/mL$ for $\alpha$-chaconine and $\alpha$-solanine, respectively. Matrix effects were evaluated by comparing calibration curves measured in matrix-matched and solvent-based systems. Ion suppression due to matrix effects was weak and extraction recoveries of 88 to 114% were obtained in different sample matrices spiked with analyte concentrations ranging from 15 to $35{\mu}g/mL$. Potatoes that had been genetically modified to tolerate glufosinate contained the same glycoalkaloid levels as their non-transgenic counterpart. We suggest complementing compositional comparison assessment strategy by validating quantitative analytical methods for the toxic glycoalkaloids in potato plants.
GM 및 non-GM 감자의 인체 위해성 여부를 판단하기 위하여 마우스 비장세포에서 인터루킨과 housekeeping gene의 발현을 RT-PCR로 비교 분석하였다. 유전자변형 감자의 잎과 이를 섭취한 마우스의 비장세포에서 발현되는 housekeeping gene의 발현을 수행한 결과, APRT, $\beta$-tubulin, Actin, Hsp 20.2, Cyclophilin, 18S RNA and Efla, and Tbp, GAPDH, $\beta$-actin, Tuba2, Hprt, Cyclophlin A, Tfrc, and RPL13A의 발현에는 유전자 변형 감자와 그렇지 않은 감자와의 차이를 발견할 수 없었다. GM작물의 안전성에 대한 연구는 많은 표본을 가지고, 보다 장기적인 관점에서 다양한 모니터링 시스템을 도입이 필요하다고 판단되며 이의 향후 연구에 많은 관심이 필요하다.
식약처는 유전자변형식품의 사전 안전관리를 위하여 "식품위생법"에 따라 안전성 심사를 거쳐 안전성이 입증된 식품만 수입 유통되도록 의무화하고 있으며, 승인받지 않은 품목은 수입통관단계에서 검사를 실시하여 국내에 유입되지 않도록 관리하고 있다. "유전자변형식품등의 안전성 심사 등에 관한 규정"에 따라 제출된 안전성 자료에 대해 '유전자변형 식품등 안전성 심사위원회'에서 심사하고, 국민 의견을 수렴하여 승인 여부를 결정한다. 또한 안전성 승인이 되었더라도 10년이 경과된 유전자변형식품은 다시 안전성 심사를 하여 안전성을 재확인하고 있다. 우리나라에서는 1999년 안전성심사를 시작하여 2000년에 최초로 유전자변형 콩을 승인하였으며, '19년 4월 현재 안전성 심사를 통해 승인된 유전자변형식품은 총 199건이다(농산물 169건, 미생물 6건, 식품첨가물 24건). 앞으로도 식약처에서는 최초 안전성 심사 뿐 아니라, 승인 후 10년이 경과되는 유전자변형식품 품목에 대한 안전성 재심사를 통해 안전성을 재확인할 계획이며, 기존에 개발된 제초제내성, 해충저항성 유전자변형식품 외에 새로운 특성을 부여한 유전자변형식품의 개발 증가에 따라 이들 품목의 안전성 심사를 위하여 CODEX, OECD 등 국제적인 규제 조화를 바탕으로 심사항목 정비 등 사전안전관리를 강화할 계획이다.
From the soils of soybean fields in Cotton Branch Station (CBS) and Pine Tree Station (PTS), Arkansas, USA, various single spore isloates of sudden death syndrome (SDS) pathogen were obtained on modified Nash & Snyder's medium (MNSM) with dilution plating technique and transferred to potato dextrose agar (PDA) medium to identify the cultural colony shape. The colony shapes of these isolates resembled F. solani isolate 171 which was white and chalky shaped on MNSM and most of them had unique form of morphology which produced white margin and blue center colony on PDA. Although, some of these isolates had more dark blue or showed slightly different color, all isolates that were selected randomly for green-house inoculation assay produced typical foliar symptoms on leaves of soybean, Hartz 6686. To determine the genetic differences among the isolates, mitochondrial DNA restriction fragment length polymorphism (RFLP) was conducted with fourty isolates from both fields, using mtDNA probes, 2U18 and 4U40, derived from Colletotrichum orbiculare. We obtained distinctive RFLPs in each treatment of restriction enzyme, EcoRI and HaeⅢ. Isolates, 11-2-5 and 14-3-1-1, from CBS and isolates, 104-3-1-2 and 701-1-5-1, from PTS showed different band patterns from 171 in both or in either treatment of restriction enzymes. Even if some of these isolates showed heterogeneous, they were more closer to 171 than PN603. And, also, rest of the thirty-six isolates had exactly same polymorphisms as 171 in each treatment of restriction enzyme. Although, some of the isolates showed the different morphological shape on PDA and slightly different band patterns on RFLPs, all of the isolates selected on MNSM due to their distinctive colony shape from other fungi produced the typical foliar symptoms on soybean leaves in greenhouse inoculation assay. It might be suggested that these isolates were not genetically different from check isolate 171 and they were unique strain of F. solani.
This study was analyzed to provide fundamental data of food safety education way on the recognition, knowledge and purchase attitude of GMO foods. Data was collected from 270 University students in the Gyeong-gi region through a self-administered questionnaire. According to the results of the reliability and factor analysis, the knowledge and purchase attitude of GMO foods showed 0.742 and 0.832 in Cronbach alpha coefficient, 0.791 and 0.831 in KMO. There were significant differences in the recognition and intake possibility and purchase will, safety and absorption to a GMO foods between the specialty person and non-specialist (p<0.05). By the kind of GMO foods it appeared highly by the order corn (70.0%), tomato (67.5%), beans (63.3%) and potato (51.3%). There were significant differences in the general knowledge of GMO foods (p<0.05), whereas no significant differences in question 'There were no genes in ordinary beans' by a presence of a specialty (p>0.05). After the purchase attitude difference to the GMO foods was analyzed by a presence of a specialty, I appeared most highly in the question to which I say 'I think a GMO foods is ethical.' by a negative question and 'I think a GMO foods is mass-produced, and it's possible to make a food problem decrease.' by an affirmative question. Therefore, the purchase attitude of GMO foods showed a significant differences of University students according to their major (p<0.05). Based on this study, it is considered that provision of detailed and continuous education must be accomplished by raising the recognition of GMO foods and its acceptance level, allowing a proper understanding of GMO foods to be conveyed and assisting subjects from receiving the information they desire effectively by various education mediums.
Pseudomonas tolaasii에 의해 발생하는 세균갈색무늬병은 버섯재배에서 문제가 되는 대표적인 병해이다. 본 연구에서는 세균갈색무늬병의 생물학적 방제법에 이용할 수 있는 독소저해균의 항균활성과 선발된 독소저해균에 대해 폿트수준의 생물검정 실험을 실시하였다. 재배중인 느타리버섯 폐면배지와 양송이 퇴비에서 세균갈색무늬병원균이 분비하는 독소(tolaasin)를 가장 강하게 억제하는 미생물 HC1를 선발하였으며, 생리 생화학적 실험과 유전적 실험결과 HC1균주는 Pseudomonas sp.로 동정되었다. 생물검정을 위하여 독소분해균 Pseudomonas sp. HC1을 양송이, 팽이, 느타리에 처리한 결과 각각 69%, 68%, 55%의 방제효과를 보였다. 따라서 Pseudomonas sp. HC1이 버섯 세균갈색무늬병 방제를 위해 합성농약을 대체할 수 있는 친환경적인 방제방법이 될 수 있을 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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