Rock bream iridovirus (RBIV) causes high mortality and economic losses in the rock bream (Oplegnathus fasciatus) aquaculture industry in Korea. Viral open reading frames (ORFs) expression profiling at different RBIV infection stages was investigated using microarray approaches. Rock bream were exposed to the virus and held for 7 days at 23 ℃ before the water temperature was reduced to 17 ℃. Herein, 28% mortality was observed from 24 to 35 days post infection (dpi), after which no mortality was observed until 70 dpi (end of the experiment). A total of 27 ORFs were significantly up- or down-regulated after RBIV infection. In RBIV-infected rock bream, four viral genes were expressed after 2 dpi. Most RBIV ORFs (26 genes, 96.2%) were significantly elevated between 7 and 20 dpi. Among them, 12 ORF (44.4%) transcripts reached their peak expression intensity at 15 dpi, and 14 ORFs (51.8%) were at peak expression intensity at 20 dpi. Expression levels began to decrease after 25 dpi, and 92.6% of ORFs (25 genes) were expressed below 1-fold at 70 dpi. From the microarray data, in addition to the viral infection, viral gene expression profiles were categorized into three infection stages, namely, early (2 dpi), middle (7 to 20 dpi), and recovery (25 and 70 dpi). RBIV ORFs 009R, 023R, 032L, 049L, and 056L were remarkably expressed during RBIV infection. Furthermore, six ORFs (001L, 013R, 052L, 053L, 058L, and 061L) were significantly expressed only at 20 dpi. To verify the cDNA microarray data, we performed quantitative real-time PCR, and the results were similar to that of the microarray. Our results provide novel observations on broader RBIV gene expression at different stages of infection and the development of control strategies against RBIV infection.
The global pattern of growth-dependent gene expression in Streptococcus pneumoniae strains was evaluated using a high-density DNA microarray. Total RNAs obtained from an avirulent S. pneumoniae strain R6 and a virulent strain AMC96-6 were used to compare the expression patterns at seven time points (2.5, 3.5, 4.5, 5.5, 6.0, 6.5, and 8.0 h). The expression profile of strain R6 changed between log and stationary growth (the Log-Stat switch). There were clear differences between the growth-dependent gene expression profiles of the virulent and avirulent pneumococcal strains in 367 of 1,112 genes. Transcripts of genes associated with bacterial competence and capsular polysaccharide formation, as well as clpP and cbpA, were higher in the virulent strain. Our data suggest that late log or early stationary phase may be the most virulent phase of S. pneumoniae.
Nguyen, Lisa L.;Kriketos, Adamandia D.;Hancock, Dale P.;Caterson, Ian D.;Denyer, Gareth S.
BMB Reports
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제39권4호
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pp.457-463
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2006
Insulin resistance is commonly observed in patients prior to the development of type 2 diabetes and may predict the onset of the disease. We tested the hypothesis that impairment in insulin stimulated glucose-disposal in insulin resistant patients would be reflected in the gene expression profile of skeletal muscle. We performed gene expression profiling on skeletal muscle of insulin resistant and insulin sensitive subjects using microarrays. Microarray analysis of 19,000 genes in skeletal muscle did not display a significant difference between insulin resistant and insulin sensitive muscle. This was confirmed with real-time PCR. Our results suggest that insulin resistance is not reflected by changes in the gene expression profile in skeletal muscle.
봉독은 관절염 치료를 비롯한 여러 질환에 그 응용범위가 넓어지고 있으며 기전규명과 새로운 치료효과 개발을 위한 연구가 필요하다. 연골의 파괴는 진행된 각종 관절병증의 공통 병리기전이며 연골세포의 기능이상은 이 기전에 중요한 의미를 지닌다. 사람 연골세포의 특성을 유지하고 있는 HTB-94 연골육종세포를 배양하고 봉독을 처치했을 때의 유전자 발현양상을 microarray를 이용하여 관찰하였다. 대조군에 비해 4배 이상 발현의 차이가 있는 경우를 유의한 것으로 보았을 때 microarray의 344개 유전자중 봉독처치시 발현이 증강되는 유전자는 없었으며 발현이 억제되는 유전자는 interleukin 6 receptor, interleukin 1 alpha, tissue inhibitor of metalloproteinase 1, matrix metalloproteinase 1, tumor necrosis factor (ligand) superfamily, members 4, 8 and 12, and caspases 2, 6, and 10등 35개가 관찰되었다. Microarray를 통한 유전자발현 분석을 통해 관절염에 대한 봉독치료의 기전을 시사하는 유용한 자료를 얻을 수 있었으며 앞으로 보다 넓은 범위에 대한 연구가 필요할 것이다.
Jung, Yong;Seo, Hwa-Jeong;Park, Yu-Rang;Kim, Ji-Hun;Bien, Sang Jay;Kim, Ju-Han
Genomics & Informatics
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제9권1호
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pp.19-27
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2011
Gene Expression Omnibus (GEO) has kept the largest amount of gene-expression microarray data that have grown exponentially. Microarray data in GEO have been generated in many different formats and often lack standardized annotation and documentation. It is hard to know if preprocessing has been applied to a dataset or not and in what way. Standard-based integration of heterogeneous data formats and metadata is necessary for comprehensive data query, analysis and mining. We attempted to integrate the heterogeneous microarray data in GEO based on Minimum Information About a Microarray Experiment (MIAME) standard. We unified the data fields of GEO Data table and mapped the attributes of GEO metadata into MIAME elements. We also discriminated non-preprocessed raw datasets from others and processed ones by using a two-step classification method. Most of the procedures were developed as semi-automated algorithms with some degree of text mining techniques. We localized 2,967 Platforms, 4,867 Series and 103,590 Samples with covering 279 organisms, integrated them into a standard-based relational schema and developed a comprehensive query interface to extract. Our tool, GEOQuest is available at http://www.snubi.org/software/GEOQuest/.
Tamoxifen (TAM), a non-steroidal anti estrogen anticancer drug and chemopreventive agent for breast cancer, have caused cholestasis in liver. The potent hepatocarcinogenicity of this drug has been reported. Methotrexate (MTX) is dihydrofolate reductase inhibitor which interfaces with the synthesis for urine nucleotide and dTMP. And it may cause atrophy, necrosis and steatosis in liver. These two anticancer drug have well-known hepatotoxicity. So, in this study we compare the gene expression pattern of antitumor agent TAM and MTX, using the cDNA microarray. We have used 4.8 K cDNA microarray to identify hepatotoxicity-related genes in 5-week-old male Sprague-Dawley (SD) rats. Confirm the pattern of gene expression, we have used Real time PCR for targeted gene. In the case of MTX, Protease related gene (Ctse, Ctsk) and Protein kinase (Pctk 1) have shown specific expression pattern. And in the case of TAM, apoptosis related gene (Pdcd 8) and signal transduction related gene (kdr) have significantly up regulated during treatment time. Gene related with growth factor, lipid synthesis, chemokins were significantly changed. From the result of this study, the information about influence of TAM and MTX to hepatoxicity will provide.
Objective : Bone homeostasis is maintained by balance of bone formation and resorption. Therefore, bone related diseases arose by disturbance of this balance between osteoblast and osteoclast activities. To develop a successful screening system the therapeutic components based on oriental medicine is essential to set up systematic approach for that purpose. The purpose of this study is to the know the gene expression using cDNA microarray assay. Methods : Cervi Pantotricuhum Cornu Herbal-acupuncture extract was prepared by boiling. human osteosarcoma cells(HOS) were treated with Cervi Pantotricuhum Cornu Herbal-acupuncture solution. Then mRNA was extracted and cDNA microarray assay was performed. Results : Human osteosarcoma cells(HOS) treated with Cervi Pantotricuhum Cornu Herbal-acupuncture solution($500{\mu}g/m{\ell}$) showed that thioredoxin, TAFII31 and two novel genes were increased. However many genes decreased their expression by Cervi Pantotricuhum Cornu Herbal-acupuncture. Conclusions : This type of approach will give a good chance to explore the favorable effects of Cervi Pantotricuhum Cornu Herbal-acupuncture. Further study is needed for investigating the effect of Cervi Pantotricuhum Cornu Herbal-acupuncture.
Although much is known about the molecular biology of platelets, the megakaryocytes' (MKs) molecular biology was not understood so well because of their rareness. By the cloning and characterization of thrombopoietin (TPO), which is the principal regulator of the growth and development of the MKs, researches on the MKs have been growing rapidly. To understand megakaryocytopoiesis, we investigated the gene expression profile of the MKs using oligonucleotide microarray where 10,108 unique genes were spotted. Comparing the fluorescence intensities of which ratio is $\ge$${\mid}2{\mid}$, 372 genes were up-regulated and 541 genes were down-regulated in MKs. For confirmatory expression, RNase protection assay (RPA) establishing abundant apoptotic gene expression was carried out. In MKs, many of the known genes, including several platelet related genes, GATA binding protein were highly expressed. Particularly, TGF beta, clusterin (complement lysis inhibitor), and thymosin beta 4 (actin-sequestering molecules) were expressed highly in MKs. As MKs specific expressed genes may regulate normal and pathologic platelet (and/or MK) functions, the transcript profiling using microarray was useful on molecular understanding of MKs,
Silencing of Dicer1 by siRNA did not inhibit development up to the blastocyst stage, but decreased expression of selected transcription factors, including Oct-4, Sox2 and Nanog, suggesting that Dicer1 gene expression is associated with differentiation processes at the blastocyst stage (Cui et al., 2007). In order to get insights into genes which may be linked with microRNA system, we compared gene expression profiles in Gapdh and Dicer1 siRNA-microinjected blastocysts using the Applied Biosystem microarray technology. Our data showed that 397 and 737 out of 16354 genes were up- and down-regulated, respectively, following siRNA microinjection (p<0.05), including 24 up- and 28 down-regulated transcription factors. Identification of genes that are preferentially expressed at particular Dicer1 knock down embryos provides insights into the complex gene regulatory networks that drive differentiation processes in embryos at blastocyst stage.
Objective : It has long been known about the anticancer effect of GRR-HAS, however, it has not been systemically determined the differentially regulated genes by GRR-HAS in cancer cells. The purpose of this study is to screen the GRR-HAS mediated differentially expressed genes in cancer cells such as SNU484 gastric cancer cell lines. Oligonucleotide microarray approache was employed to screen the differential expression genes. Methods : GRR-HAS was prepared by boiling and stored at $-70^{\circ}C$ until use. Cells were treated with various concentrations of GRR-HAS(0.1, 0.5, 1.5, 10, 20mg/ml) for 24 h. Cell toxicity was tested by MTT assay. To screen the differentially expressed genes in cancer cells, cells were treated with 1.5mg/ml of GRR-HAS. For oligonucleotide microarray assay, total RNA was used for gene expression analysis using oligonucleotide Genechip (Human genome Ul33 Plus 2.0., Affimatrix Co.). Results : It has no cytotoxic effects on both HepG2 and SNU484 cells in all concentrations(0.1, 0.5, 1.5, 10, 20mg/ml). In oligonucleotide microarray assay, in SNU484 cells, the number of more than twofold up-regulated genes was 346. The number of more than twofold down-regulated genes was 9. Discussion : This study showed the comprehensive gene expression analysis using oligonucleotide microarray for the screening of GRR-HAS mediated differentially regulated genes. These results will provide a better application of GRR-HAS in cancer field and drug target development.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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