For the purpose of developing a high quality agricultural microbial inoculant, methods and materials for improving encapsulation were investigated. Preparation of capsule was conducted by improving extrusion system with micro-nozzle and peristaltic pump. The sodium alginate was selected because of its cheapness, stability of cells, and gel formation ability. The yields, physical properties and gel formation abilities of extractable alginate from sea tangle were investigated by hot water extractable and alkali soluble methods. The extraction yields of hot water extractable alginate (HWEA) and alkali soluble alginate (ASA) from sea tangle were 8 and 20%, respectively. The HWEA was almost not viscous even in 1.5% of the sample solution, whereas the ASA was very highly viscous in above 3% sample solution. The gel formation ability of each samples varied from 1.5% to 5% and the ASA showed a good gel formation ability at 3% solution as commercial alginate (CA). The soil microbial inoculant, Bacillus thuringiensis, Bacillus subtilis, Lactobacillus plantarum and Geotrichum candidum encapsulated sodium alginate with starch and zeolite for stabilizer. The survivability of encapsulated soil microbial inoculant using alginate without stabilizer appeared to be 66, 52, 70 and 50%, respectively. Inclusion of starch and zeolite with alginate bead increased viabilities in Bacillus sp. and Geotrichum candidum by 81-83% and 89%, respectively.
In order to increase the persistence of plant growth promoting rhizobacteria (PGPR) in rhizpsphere soil, the growth of tomato was examined after the application of Arthrobacter woluwensis ED immobilized in alginate bead, which was known as PGPR. When tomato seedlings were treated with A. woluwensis ED of $1{\times}10^6$ cells g $soil^{-1}$ and incubated for 30 days in a plant growth chamber, the shoot length, root length, fresh weight and dry weight of the grown tomato plants treated with the suspended inoculants significantly increased by 36.2, 59, 51.1, and 37.5%, respectively compared to those of the uninoculated control. The treatment of the immobilized bacteria increased those by 42, 67.4, 62.5, and 60.4%, respectively compared to those of the uninoculated control. Therefore, the enhancement of tomato growth by the treatment of the immobilized bacteria was higher than those by the suspended inoculants. The effects of the inoculation on indigenous bacterial community and the fate of the inoculated bacteria were monitored by denaturing gradient gel electrophoresis analysis. The DNA band intensity of A. woluwensis ED in the tomato rhizosphere treated with the suspended inoculants continuously decreased after the inoculation, but the band intensity in the tomato rhizosphere soils treated with the immobilized inoculants showed the maximum at 1 week after inoculation and the decreasing rate was less than that of the suspended inoculants, which indicated the longer maintenance of the immobilized bacteria at rhizosphere soils. Therefore, encapsulation of PGPR in alginate beads may be more effective than liquid inoculant for the plant growth promotion and survival of PGPR at plant rhizosphere.
Alterations of the p53 gene arc among the most frequent genetic changes in human cancer and often result in increased levels of p53 protein within the malignant cells. Detection of accumulated p53 protein can be a useful prognostic tool in human cancer. In order to make polyclonal antibodies for immunohistochemical screening. human p53 gene was expressed in E. coli in the form of GST (glutathione S-transfi.:rase) fusion proteins. Two p53 gene fragments. which were N('()I small fragment encoding amino acid residues of 1-151-: and Ncol large fragment of 159-393. were subeloned into the unique BamHI site present within the pGEX-2T vector using BamHI linker and recombinant plasmids pGTNS and pGTNL were constructed. respectively. The p53 cDNA fragment (from pC53-$SN_3$,) encoding amino acid 38-145 (proline at residue 72) was amplified by polymerase chain reaction(PCR). The amplified DNA was digested with BamHI and Prull and inserted into the BamHI-Smal sites of pG EX-2T and recombinant plasmid pGTBP was constructed. After IPTG induction of these plasmids for 4 hours. fusion proteins were purified from E. coli extracts with glutathione Sepharose beads. The bound proteins were resolved by 10% SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and the molecular weights were 54 kDa. 53 kDa and 40 kDa. respectively. Approximately one milligram of fusion proteins were purified from 1 -liter cultures.
In these experiment, the conditions of entrapping immobilization of Zygosaccharomyces rouxii that participate in the soysauce brewing are investigated. And carried out the fermentation and aging test by immobilized Zygosaccharomyces rouxii with the hydrolyzed solution prepared from soysauce koji. The results obtained were as follows: 1. Immobilizing conditions of Zygosaccharomyces rouxii. 1) When the concentration of Na-alginate solution is 2.0-2.5%, the bead formation was very good. And the concentration of Na-alginate solution not influenced on the fermentation activity of immobilized Zygosaccharomyces rouxii. 2) Effect of ratio of the precultured Zygosaccharomyces rouxii solution and Na-alginate solution on the fermentation activity of immobilized Zygosaccharomyces rouxii was not highly recognized. But if the ratio of precultured Zygosaccharomyces rouxii solution increased, the fermentation activity of immobilized Zygosaccharomyces rouxii was slightly high. 3) The fermentation activity of immobilized Zygosaccharomyces rouxii that grew over 36hrs was higher than that grew below 24hrs. 4) Increasing the ratio of immobilized Zygosaccharomyces rouxii gel to the fermentative medium, the fermentation activity of Zygosaccharomyces rouxii was higher. 2. The fermentation test by immobilized Zygosaccharomyces rouxii with the hydrolyzed solution of soysauce koji. 1) When fermented for about 96 hrs, the alcoholic fermentation almost stopped and alcohol concentration into the hydrolyzed solution of soysauce koji was 2.6%(v/v) approximately.
To compare the quality of genomic DNA extracted from potato for PCR detection, four different methods, such as silica-based membrane method, silica-coated bead method, STE solution treatment, and CTAB-phenol/chloroform method, were evaluated. Also, to remove an excessive carbohydrate from the potato, ${\alpha}$- and ${\beta}$-amylase were used individually and in combination. When used both silica-based membrane method and silica-coated bead method combined with enzymes, the genomic DNAs were extracted from the raw potato with high purity for PCR. However, the silica-coated head method combined with enzyme treatment was the most efficient for extraction of the genomic DNA from the frozen fried potatoes. When applied with STE solution, the highly purified DNA was extracted from the raw potatoes without enzyme treatment in adequate yield for PCR. In cases of processed potatoes, such as frozen-fried potato and fabricated potato chips, CTAB-phenol/chloroform method is mostly feasible for DNA extraction and PCR efficacy at high sensitivity. As the results of PCR amplification, 216bp of PCR product was detected on 2% agarose gel electrophoresis, but any amplicons derived from New leaf and New leaf Y gene was not detected in any sample.
Polymeric reinforcement and coatings of alginate beads were carried out to control the release rate of drug from alginate beads. A poorly water-soluble ibuprofen (IPF) was selected as a model drug. A commercially available $Eudragit^{\circledR}$ RS100 was also used as a polymer. Effects of polymeric contents, the presence of plasticizers and amount of drug loading on the release rate of drug were investigated. The release rate of drug from alginate beads in the simulated gastric fluid did not occur within 2 h but released immediately when dissolution media were switched to the simulated intestinal fluid. No significant difference of release rate from polymer-reinforced alginate bead without plasticizers was observed when compared to plain (simple) beads. However, the release rate of drug from polymer-reinforced alginate beads was further sustained and retarded when aluminium tristearate (AT) as a plasticizer was added to polymer. However, polyethylene glycol 400 (PEG400) did not change the release rate of drug from alginate beads although PEG400 was used to improve dispersion of polymer and sodium alginate, and plasticize $Eudragit^{\circledR}$ RS100 polymer. The presence of plasticizer was crucial to reinforce alginate gel matrices using a polymer. As the amount of drug loading increased, the release rate of drug increased as a result of decreasing effects of polymer contents in matrices. The significantly sustained release of drug from polymer-coated alginate beads occurred as the amount of polymer increased because the thickness of coated membrane increased so that cracks and pores of the outer surface of alginate beads could be reduced. The sustained and retarded action of polymer-reinforced and coated beads may result from the disturbance of swelling and erosion (disintegration) of alginate beads. From these findings, polymeric-reinforcement and coatings of alginate gel beads can provide an advanced delivery system by retarding the release rate of various drugs.
Park, Yun-Joo;Yun, Yeo-Pyo;Lee, Hyung-Joo;Jang, Hae-Dong
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.28
no.1
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pp.99-104
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1996
Carbohydrate-free caseinomacropeptide (CMP) was isolated from the sweet whey powder by a precipitation method using 12% trichloroacetic acid. The yield of carbohydrate-free CMP was 2.7 g from 100 g sweet whey powder. The electrophoretic pattern and the amino acid analysis of CMP showed that isolated CMP was quite pure, indicating the precipitation with 12% trichloroacetic acid was very effective for isolating carbohydrate-free CMP from the sweet whey powder. Trypsin, covalently immobilized on pore glass beads by carbodiimide (EDC) method, was 20mg per 1g glass beads. CMP was almost completely hydrolyzed by soluble trypsin in 24hr, but not by immobilized trypsin. The tryptic hydrolysates were fractionated on a Bio-Gel P 4 column $(1.5{\times}120\;cm)$and separated peptides were tested for their capacities to inhibit platelet aggregation using a aggregometer. The hydrolysate obtained from CMP after 24hr digestion by immobilized trypsin showed the highest activity.
Cell-Cell interaction and the extracellular matrix (ECM) are belisved to play essential roles during in vitro culturing of primary hepatocytes in the control of differentiation and in the maintenance of tissue spcific functions. The objective of this study was to examine the effects of degree of cell-cell contact (DCC) on liver sperific function of rat promary hepatocytes. Hepatocyte aggregates with various with various degrees of cell-cell contantact, I. e., dispersed cell, longish aggregate, rugged aggregate, and smooth spheroid were obtained at 1, 5-6, 15-20, and 36-48 hrs, respectively in suspension cultures grown in spinner flasks embedded in Caalginate bead and collagen gel in order. The may result from mass transfer limitation and shear damage caused by agitation during aggregation. The rugged aggregate showed a higer viability and albumin secretion rate than the dispersed cells or the other aggregates. This result indicates the possible enhancement of a bioartificial liver's (BAL) performance using primary hepatocytes and the reduction in time to prepare a BAL through optimization of the immobilization time.
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2016.02a
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pp.410.1-410.1
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2016
Vanadium dioxide ($VO_2$) is a well-known material that exhibits a metal-semiconductor transition at 340 K, with drastic change of transmittance at NIR region. However, $VO_2$ based thermochromics accompany with low visible transmittance value and unfavorable color (brownish yellow). Herein, we demonstrate the adjustment of visible transmittance of $VO_2$ thin film by nanosphere template assisted patterning process using sol-gel method. 2-Dimenstional honeycomb shape was varied as function of diameter of nanosphere and coating conditions. The morphological geometry of the films was investigated by FE-SEM and AFM. Result shows that inversed shape of nanosphere was formed clearly and pattern width was altered according to the bead size. This structure creates the geometrical blank area from the position of nanosphere which improves the optical transmittance at the visible region. Moreover, such patterned $VO_2$ thin film not only maintains the optical switching efficiency, but also generate the gorgeous scattering effect which presumably support the glazing application.
Park, Hee-Jung;Kim, Hyong-Ju;Lee, Chang-Moon;Kim, Jin;Lee, Hong-Kum;Yim, Joung-Han;Lee, Ki-Young
한국생물공학회:학술대회논문집
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2005.04a
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pp.566-569
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2005
The extracellular polysaccharide...(EPS) has been used in a wide variety of industrial applications because of gel formation, emulsion stability, control of the surface tension, water absorption and film formation etc. In this study, inhibitory activity on tyrosinase and inhibitory activity on angiotensin converting enzyme...(ACE) are determined. UV adsorption wavelength, beads formation of EPS were investigated. In the result, in 1%(w/v) EPS concentration, EPS had inhibitory activity of 71.8% on tyrosinase and inhibitory activity of 61.5% on angiotensin converting enzyme in 1.5% EPS concentration. Adsorption wavelength of EPS was UV-B,C . Beads based on EPS were prepared by w/o emulsion method and the shape of EPS beads observed by SEM was spherical and uniform.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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