Fungal pathogens have huge impact on health and economic wellbeing of human by causing life-threatening mycoses in immune-compromised patients or by destroying crop plants. A key determinant of fungal pathogenesis is their ability to undergo developmental change in response to host or environmental factors. Genetic pathways that regulate such morphological transitions and adaptation are therefore extensively studied during the last few decades. Given that epigenetic as well as genetic components play pivotal roles in development of plants and mammals, contribution of microbial epigenetic counterparts to this morphogenetic process is intriguing yet nearly unappreciated question to date. To bridge this gap in our knowledge, we set out to investigate histone modifications among epigenetic mechanisms that possibly regulate fungal adaptation and processes involved in pathogenesis of a model plant pathogenic fungus, Magnaporthe oryzae. For functional and comparative analysis of histone modifications, a web-based database (dbHiMo) was constructed first to archive and analyze histone modifying enzymes from eukaryotic species whose genome sequences are available. Based on the database entries, we carried out functional analysis of genes encoding histone modifying enzymes. Here I provide examples of such analyses that show how histone acetylation and methylation is implicated in regulating important aspects of fungal pathogenesis. Current analysis of histone modifying enzymes is followed by ChIP-seq and RNA-seq experiments to pinpoint the genes that are controlled by particular histone modifications. We anticipate that our work will provide not only the significant advances in our understanding of epigenetic mechanisms operating in microbial eukaryotes but also basis to expand our perspective on regulation of development in fungal pathogens.
The chitinase-producing bacterial strain C-1 is one of the key chitinase-producing biocontrol agents used for effective bioformulations for biological control. These bioformulations are mixed cultures of various chitinolytic bacteria. However, the precise identification, biocontrol activity, and the underlying mechanisms of the strain C-1 have not been investigated so far. Therefore, we evaluated in planta biocontrol efficacies of C-1 and determined the draft genome sequence of the strain in this study. The bacterial C-1 strain was identified as a novel Serratia sp. by a phylogenic analysis of its 16S rRNA sequence. The Serratia sp. C-1 bacterial cultures showed strong in planta biocontrol efficacies against some major phytopathogenic fungal diseases. The draft genome sequence of Serratia sp. C-1 indicated that the C-1 strain is a novel strain harboring a subset of genes that may be involved in its biocontrol activities.
Fungal secondary metabolites constitute a wide variety of compounds which either playa vital role in agricultural, pharmaceutical and industrial contexts, or have devastating effects on agriculture, animal and human affairs by virtue of their toxigenicity. Owing to their beneficial and deleterious characteristics, these complex compounds and the genes responsible for their synthesis have been the subjects of extensive investigation by microbiologists and pharmacologists. A majority of the fungal secondary metabolic genes are classified as type I polyketide synthases (PKS) which are often clustered with other secondary metabolism related genes. In this review we discuss on the significance of our recent discovery of chalcone synthase (CHS) genes belonging to the type III PKS superfamily in an industrially important fungus, Aspergillus oryzae. CHS genes are known to playa vital role in the biosynthesis of flavonoids in plants. A comparative genome analyses revealed the unique character of A. oryzae with four CHS-like genes (csyA, csyB, csyC and csyD) amongst other Aspergilli (Aspergillus nidulans and Aspergillus fumigatus) which contained none of the CHS-like genes. Some other fungi such as Neurospora crassa, Fusarium graminearum, Magnaporthe grisea, Podospora anserina and Phanerochaete chrysosporium also contained putative type III PKSs, with a phylogenic distinction from bacteria and plants. The enzymatically active nature of these newly discovered homologues is expected owing to the conservation in the catalytic residues across the different species of plants and fungi, and also by the fact that a majority of these genes (csyA, csyB and csyD) were expressed in A. oryzae. While this finding brings filamentous fungi closer to plants and bacteria which until recently were the only ones considered to possess the type III PKSs, the presence of putative genes encoding other principal enzymes involved in the phenylpropanoid and flavonoid biosynthesis (viz., phenylalanine ammonia-lyase, cinnamic acid hydroxylase and p-coumarate CoA ligase) in the A. oryzae genome undoubtedly prove the extent of its metabolic diversity. Since many of these genes have not been identified earlier, knowledge on their corresponding products or activities remain undeciphered. In future, it is anticipated that these enzymes may be reasonable targets for metabolic engineering in fungi to produce agriculturally and nutritionally important metabolites.
Park, Jaejin;Kong, Sunghyung;Kim, Seryun;Kang, Seogchan;Lee, Yong-Hwan
The Plant Pathology Journal
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제30권2호
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pp.136-150
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2014
Although multiple transcription factors (TFs) have been characterized via mutagenesis to understand their roles in controlling pathogenicity and infection-related development in Magnaporthe oryzae, the causal agent of rice blast, if and how forkhead-box (FOX) TFs contribute to these processes remain to be characterized. Four putative FOX TF genes were identified in the genome of M. oryzae, and phylogenetic analysis suggested that two of them (MoFKH1 and MoHCM1) correspond to Ascomycota-specific members of the FOX TF family while the others (MoFOX1 and MoFOX2) are Pezizomycotina-specific members. Deletion of MoFKH1 (${\Delta}Mofkh1$) resulted in reduced mycelial growth and conidial germination, abnormal septation and stress response, and reduced virulence. Similarly, ${\Delta}Mohcm1$ exhibited reduced mycelial growth and conidial germination. Conidia of ${\Delta}Mofkh1$ and ${\Delta}Mohcm1$ were more sensitive to one or both of the cell cycle inhibitors hydroxyurea and benomyl, suggesting their role in cell cycle control. On the other hand, loss of MoFOX1 (${\Delta}Mofox1$) did not show any noticeable changes in development, pathogenicity, and stress response. Deletion of MoFOX2 was not successful even after repeated attempts. Taken together, these results suggested that MoFKH1 and MoHCM1 are important in fungal development and that MoFKH1 is further implicated in pathogenicity and stress response in M. oryzae.
Helicobasidium mompa Tanaka and Resellinia necatrix Prillieux cause violet root rot and white root rot of various crops, respectively. Intensive cultural practices, such as the use of dwarf stock, glasshouse cultivation, etc., predispose plants to the diseases. The diseases can be controlled only by biennial drench of 50100L of chemicals for each tree. Biocontrol with soil microorganisms proved ineffective under field conditions. Long-term control may be hampered by the perennial growth of hosts and by the difficulty in the establishment of antagonists in soil. Crop rotation or soil amendment is not applicable, either. Fungal viruses with dsRNA genome (Buck 1986) are promising against root diseases of fruit trees since they exist within the cytoplasm of fungal hyphae and need no effort to help them persist in the field. The viruses are considered to spread though the network of fungal mycelia in the soil once they enter the fungal cytoplasm. Here, we present preliminary results from a project to control the root diseases of fruit trees with dsRNA.(중략)
In order to understand the molecular interactions that occur between rice and the rice blast fungus during infection, we previously identified a number of rice blast fungal elicitor-responsive genes from rice (Oryza sativa cv. Milyang 117). Here, we report the cloning and characterization of the rice fungal elicitor-inducible gene Oshin1 (GenBank Accession Number AF039532). Sequence analysis revealed that the Oshin1 cDNA is 1067 bp long and contains an open reading frame encoding 205 amino acid residues. The Oshin1 gene shows considerable sequence similarity to the tobacco hin1 and hin2 genes. The predicted Oshin1 protein has a cysteine-rich domain at the N-terminus and is rich in leucine, serine, and alanine residues. Southern blot analysis suggests that Oshin1 gene is a member of a small gene family in the rice genome. To examine the expression of Oshin1, Northern blot analysis was conducted. Expression of the Oshin1 transcript is rapidly induced in suspension-cultured rice cells treated with fungal elicitor, salicylic acid or hydrogen peroxide. In addition, Oshin1 transcript levels are rapidly increased by treatment with $Ca^{2+}$/A23187. The expression of Oshin1 was also elevated in 3-week old leaf tissues upon ethephon application or fungal elicitor treatment. Our results suggest that the Oshin1 gene is involved in plant defense responses to environmental stresses.
The application of recombinant DNA technology has been remarkable and nearly replaced commonly used traditional methods. Traditional industrial microbiology long depended on the discovery of valuable strains and mutagenesis of such strains to improve its secretion capacity of enzymes and secondary metabolites on the industrial scale. Commodities included industrial enzymes and biopharmaceuticals. The purpose of genome manipulation by the crossing of different strains or genetic recombination of naked DNA to the genome is of increased production of valuable metabolites. We optimized a transformation method to either for removal of innate genes, introduction of heterologous genes, or combination of both. We have been used selected whole or partial genes to manipulate target fungi toward the development of strains overproducing invaluable proteins. We have also used the whole genome sequence information of fungal genomes in public databases and functional genomics approach to select genes to manipulate and eventually contributing greatly to the development of overproducing industrial strains overproducing proteins or secondary metabolites. I will briefly review 1) filamentous fungi as a host for production of recombinant proteins and secondary metabolites, 2) markets of industrial metabolites, 3) a new approach to manipulate up to five genes at the same time in the system that ProxEnrem uses.
Jonson, Miranda Gilda;Seo, Jang-Kyun;Cho, Hong-Soo;Kim, Jeong-Soo;Kim, Kook-Hyung
The Plant Pathology Journal
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제25권4호
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pp.417-421
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2009
The analysis of the full length genome of Korean isolates of Pepper mottle virus (PepMoV) in previous study showed molecular variations and are found to be related to symptom variation and pathogenicity (Kim et al., 2009, Virus Res. 144:83-88). To fully understand the molecular variation of PepMoV in Korea, we further assessed the role of RNA recombination to biological variation and evolution of PepMoV. Full-length genome of a total of 17 Korean-PepMoV and 2 American (CA and FL) isolates were examined for possible detection of genetic recombination using different recombination detections programs and detected 5 and 8 tentative recombination events using RDP3 and Splits Tree4 programs, respectively. Interestingly, tentative recombinants detected such as isolates 57, 134 and 217 were previously identified as severe isolates and 205135 and 205136 as differentiating isolates (Kim et al., 2009, Virus Res. 144:83-88). In addition, recombination was frequently detected in the Vb isolate, the first PepMoV isolate reported in Korea, suggesting significant involvement in the evolution of PepMoV in Korea. These initial results of our recombination analyses among PepMoV isolates in Korea may serve as clues to further investigate the biological variations and evolution of PepMoV brought about by recombination.
Ayesha, Wisal;Asad Ullah;Waheed Anwar;Carlos M. Morel;Syed Shah Hassan
Genomics & Informatics
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제21권3호
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pp.34.1-34.10
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2023
Nosocomial infections, commonly referred to as healthcare-associated infections, are illnesses that patients get while hospitalized and are typically either not yet manifest or may develop. One of the most prevalent nosocomial diseases in hospitalized patients is pneumonia, among the leading causes of mortality and morbidity. Viral, bacterial, and fungal pathogens cause pneumonia. More severe introductions commonly included Staphylococcus aureus, which is at the top of bacterial infections, per World Health Organization reports. The staphylococci, S. aureus, strain RMI-014804, mesophile, on-sporulating, and non-motile bacterium, was isolated from the sputum of a pulmonary patient in Pakistan. Many characteristics of S. aureus strain RMI-014804 have been revealed in this paper, with complete genome sequence and annotation. Our findings indicate that the genome is a single circular 2.82 Mbp long genome with 1,962 protein-coding genes, 15 rRNA, 49 tRNA, 62 pseudogenes, and a GC content of 28.76%. As a result of this genome sequencing analysis, researchers will fully understand the genetic and molecular basis of the virulence of the S. aureus bacteria, which could help prevent the spread of nosocomial infections like pneumonia. Genome analysis of this strain was necessary to identify the specific genes and molecular mechanisms that contribute to its pathogenicity, antibiotic resistance, and genetic diversity, allowing for a more in-depth investigation of its pathogenesis to develop new treatments and preventive measures against infections caused by this bacterium.
Rice blast fungus, Magnaporthe oryzae, is the most destructive pathogen of rice in the world. This fungus has a biotrophic phase early in infection and switches to a necrotrophic lifestyle after host cell death. During the biotrophic phase, the fungus competes with host for nutrients and oxygen. Continuous uptake of oxygen is essential for successful establishment of blast disease of this pathogen. Here, we report transcriptional responses of the fungus to oxygen limitation. Transcriptome analysis using RNA-Seq identified 1,047 up-regulated genes in response to hypoxia. Those genes were involved in mycelial development, sterol biosynthesis, and metal ion transport based on hierarchical GO terms and well-conserved among three different fungal species. In addition, null mutants of three hypoxia-responsive genes were generated and tested for their roles on fungal development and pathogenicity. The mutants for a sterol regulatory element-binding protein gene, MoSRE1, and C4 methyl sterol oxidase gene, ERG25, exhibited increased sensitivity to hypoxia-mimetic agent, increased conidiation, and delayed invasive growth within host cells, suggesting important roles in fungal development. However, such defects did not cause any significant decrease in disease severity. The other null mutant for alcohol dehydrogenase gene, MoADH1, showed no defect in the hypoxia-mimic condition and fungal development. Taken together, this comprehensive transcriptional profiling in response to a hypoxia condition with experimental validations would provide new insights on fungal development and pathogenicity in plant pathogenic fungi.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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