To know if small changes in rearing water temperature and density affect the number of bacterial and fungal colonies in metamorphosed frogs, Dybowski's frog tadpoles were reared from Gosner 25-26 stages at either low ($1^{\circ}C$ low to ambient water temperature), ambient, or high ($1^{\circ}C$ high) water temperature (each 15 tadpoles in 20 L water) condition and at either low (10 tadpoles/20 L water), medium (20 tadpoles), or high (30 tadpoles) density condition. Immediately after metamorphosis, we sampled bacteria and fungi from skin, liver, and heart of six metamorphosed frogs, randomly selected for each treatment group. After separate incubation of bacteria and fungi on 3M Petrifilm plates, we counted the number of bacterial and fungal colonies appeared on the plates and compared the numbers among the temperature and density treatment groups. For temperature treatment, high-temperature group had fewer bacterial colonies, while low-temperature group had more fungal colonies than the other two groups. For density treatment, low-density group had fewer bacterial colonies than the other two groups, but the number of fungal colonies were not different among the groups. Our results suggest that small increased rearing water temperature and lowered rearing density could potentially reduce pathogens in farming frogs.
Twenty isolates of Bacillus spp. obtained from livestock manure composts and cotton-waste composts were tested for in vitro antagonistic effects against soilborne plant pathogenic fungi, Fusarium oxysporum, Phytophthora capsici, Rhizoctonia solani AG-4, and Sclerotinia sclerotiorum. Seven isolates of Bacillus spp. had antagonistic effects on mycelial growth of all the isolates of F. oxysporum tested. The bacterial isolate RM43 was the most effective to inhibit the mycelial growth of the fungal isolates. Twelve isolates of Bacillus spp. had antagonistic effects on mycelial growth of all the isolates of P. capsici tested. The bacterial isolates M34 and M47 were very effective to inhibit the mycelial growth of the fungal isolates. Thirteen isolates of Bacillus spp. had antagonistic effects on mycelial growth of all the isolates of R. solani AG-4 tested. The bacterial isolates M27 and M75 were very effective to inhibit the mycelial growth of the fungal isolates. Fourteen isolates of Bacillus sp. had antagonistic effects on mycelial growth of all the isolates of S. sclerotiorum tested. The bacterial isolates M49 and M75 were very effective to inhibit the mycelial growth of the fungal isolates. The antagonistic effects of most Bacillus spp. isolates against the isolates of the four fungi differed depending on the fungal species and the isolates of each fungus. The bacterial isolates M27 and M75 were the most effective to inhibit the mycelial growth of all four fungi.
Fluctuation of fungal zoospores on agar strips were observed in the rumen of sheep fed three different levels of dietary concentrate, timothy hay: concentrate = 3:0 (AF diet), timothy hay: concentrate = 2:1 (MC diet), timothy hay : concentrate = 1:2 (HC diet) respectively. The number of zoospores on the strip was drastically decreased after morning feed with AF diet. The number was the highest at 0 h ($1.34{\times}10^2/cm^2$), then declined to $2.0{\times}10^3/cm^2$ at 9 h after feeding. In the rumen of animals fed MC diet, the number of zoospores decreased with time after feeding, although the decrement was slower than that with AF diet. During 0-3 h after feeding, number of zoospores was $1.6{\times}10^4/cm^2$. Although the number slightly decreased at 6 and 9 h, relatively high levels were maintained. It seems that the inducers for zoospore-release were maintained at relatively high concentration throughout incubation period. The fluctuation pattern of number of germinated zoospores was different in the rumen of animals fed HC diet from those of AF and MC diets. The number of zoospores was constantly maintained at lower level ($1.0{\times}10^3/cm^2$) than the other diets. For MC diet, continuous high number of germinated zoospores may be due to the continuous release of zoospores by hemes in timothy hay and concentrate feed, and by unknown mechanisms. Unlike AF diet which promoted relatively rapid decline of zoosporogenesis, supplementation of concentrate feed to the timothy hay did not promote such rapid decline of zoosporogenesis. It was suggested that release of inducers for zoosporogenesis from concentrate feed persisted longer time than from timothy hay. HC diet promoted the lowest zoospore production, suggested the lowest fungal population size in this experiment. These results show that an appropriate amount of concentrate may support fungal growth and stimulate zoosporogenesis in the rumen.
Very few studies have addressed the phylogenetic diversity of fungi from Northeast India under the Eastern Himalayan range. In the present study, an attempt has been made to study the phylogenetic diversity of culturable soil fungi along the altitudinal gradients of eastern Himalayas. Soil samples from 24 m above sea level to 2,000 m above sea level altitudes of North-East India were collected to investigate soil micro-fungal community structure and diversity. Molecular characterization of the isolates was done by PCR amplification of 18S rDNA using universal primers. Phylogenetic analysis using BLAST revealed variation in the distribution and richness of different fungal biodiversity over a wide range of altitudes. A total of 107 isolates were characterized belonging to the phyla Ascomycota and Zygomycota, corresponding to seven orders (Eurotiales, Hypocreales, Calosphaeriales, Capnodiales, Pleosporales, Mucorales, and Mortierellales) and Incertae sedis. The characterized isolates were analysed for richness, evenness and diversity indices. Fungal diversity had significant correlation with soil physico-chemical parameters and the altitude. Eurotiales and Hypocreales were most diverse and abundant group of fungi along the entire altitudinal stretch. Species of Penicillium (D=1.44) and Aspergillus (D=1.288) were found to have highest diversity index followed by Talaromyces (D=1.26) and Fusarium (D=1.26). Fungal distribution showed negative correlation with altitude and soil moisture content. Soil temperature, pH, humidity and ambient temperature showed positive correlation with fungal distribution.
During the course of evolution, animals encountered the harmful effects of fungi, which are strong pathogens. Therefore, they have developed powerful mechanisms to protect themselves against these fungal invaders. ${\beta}$-Glucans are glucose polymers of a linear ${\beta}$(1,3)-glucan backbone with ${\beta}$(1,6)-linked side chains. The immunostimulatory and antitumor activities of ${\beta}$-glucans have been reported; however, their mechanisms have only begun to be elucidated. Fungal and particulate ${\beta}$-glucans, despite their large size, can be taken up by the M cells of Peyer's patches, and interact with macrophages or dendritic cells (DCs) and activate systemic immune responses to overcome the fungal infection. The sampled ${\beta}$-glucans function as pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) and are recognized by pattern recognition receptors (PRRs) on innate immune cells. Dectin-1 receptor systems have been incorporated as the PRRs of ${\beta}$-glucans in the innate immune cells of higher animal systems, which function on the front line against fungal infection, and have been exploited in cancer treatments to enhance systemic immune function. Dectin-1 on macrophages and DCs performs dual functions: internalization of ${\beta}$-glucan-containing particles and transmittance of its signals into the nucleus. This review will depict in detail how the physicochemical nature of ${\beta}$-glucan contributes to its immunostimulating effect in hosts and the potential uses of ${\beta}$-glucan by elucidating the dectin-1 signal transduction pathway. The elucidation of ${\beta}$-glucan and its signaling pathway will undoubtedly open a new research area on its potential therapeutic applications, including as immunostimulants for antifungal and anti-cancer regimens.
Kim, Yeong Chae;Kim, Yeon Hwa;Lee, Young Hee;Lee, Sang Woo;Chae, Yun-Soek;Kang, Hyun-Kyung;Yun, Byung-Wook;Hong, Jeum Kyu
The Plant Pathology Journal
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v.29
no.3
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pp.305-316
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2013
Non-protein amino acid, ${\beta}$-amino-n-butyric acid (BABA), has been involved in diverse physiological processes including seedling growth, stress tolerance and disease resistance of many plant species. In the current study, treatment of kimchi cabbage seedlings with BABA significantly reduced primary root elongation and cotyledon development in a dose-dependent manner, which adverse effects were similar to the plant response to exogenous abscisic acid (ABA) application. BABA was synergistically contributing ABA-induced growth arrest during the early seedling development. Kimchi cabbage leaves were highly damaged and seedling growth was delayed by foliar spraying with high concentrations of BABA (10 to 20 mM). BABA played roles differentially in in vitro fungal conidial germination, mycelial growth and conidation of necrotroph Alternaria brassicicola causing black spot disease and hemibiotroph Colletotrichum higginsianum causing anthracnose. Pretreatment with BABA conferred induced resistance of the kimchi cabbage against challenges by the two different classes of fungal pathogens in a dose-dependent manner. These results suggest that BABA is involved in plant development, fungal development as well as induced fungal disease resistance of kimchi cabbage plant.
Shiraishi, T.;Kiba, A.;Inata, A.;Sugimoto, M.;Toyoda, K.;Ichinose, Y.;Yamada, T.
Proceedings of the Botanical Society of Korea Conference
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1998.07a
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pp.10-18
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1998
For improvement of plants in disease resistance, it is most important to elucidate the mechanism to perceive and respond to the signal molecules of invaders. A model system with pea and its pathogen, Mycosphaerella pinodes, showed that the fungal elicitor induced defense responses in all plant species tested but that the suppressor of the fungus blocked or delayed the expression of defense responses and induced accessibility only in the host plant. In the world, many researchers believe that the pathogens` signals are recognized only on the receptors in the plasma membranes. Though we found that the ATPase and polyphosphoinositide metabolism in isolated plasma membranes responded to these fungal signals, we failed to detect specific actions of the suppressor in vitro on these plasma membrane functions. Recently, we found that ATPase (NTPases) and superoxide generating system in isolated cell wall were regulated by these fungal signals even in vitro, especially, by the suppressor in a strictly species-specific manner and also that the cell wall alone prepared an original defense system. The effects of both fungal signals on the isolated cell wall functions in vitro coincide perfectly with those on defense responses in vivo. In this treatise, we discuss the key role of the cell wall, which is plant-specific and the most exterior organelle, in determining host-parasite specificity and molecular target for improvement of plants.
Lee, Kyung Joon;Lee, Kyu Hwa;Tamolang-Castillo, Evangeline;Budi, Sri Wilarso
Journal of Korean Society of Forest Science
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v.98
no.5
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pp.539-547
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2009
This study was conducted to investigate the arbuscular mycorrhizal fungal biodiversity, spore density and root colonization in relation to site ages at expressway cut-slopes in Korea. Stabilization of exposed surface involved soil amendments and spraying seed mixture of turf grasses and/or nitrogen-fixing shrub species. Eighteen sites were selected with varying ages (2 to 16 years). Soil samples collected in October from each site were analyzed for fungal diversity and spore counts. Fine root samples from the plants were assayed for fungal colonization. Of the total 37 plants inspected in the sites, 26 species had endomycorrhizal colonization with an average root colonization rate of 18%, and with a range from 1 to 67%. The average endomycorrhizal colonization rate of initially introduced Festuca arundinacea which became the most dominant grass in later stage showed 22.8%, while that of Lespedeza bicolor which became the most dominant woody species were 21.6%. Naturally-invading Robinia pseudoacacia showed higher colonization rate in the old sites. Although site age did not show significant effects on fungal diversity, the root colonization rates of initially introduced plants decreased with the site aging, while those of invading plants increased with aging of the sites. The soil chemical properties, pH, N, and P contents, were negatively correlated with spore density, root colonization and endomycorrhizal species diversity. A total of forty arbuscular mycorrhizal fungal species in seven genera were identified. Of the 40 species, Acaulospora lacunosa, Glomus aggregatum, Glomus constrictum, Scutellospora erythropa, and Acaulospora spinosa were the five most dominant species in the decreasing order.
Inhibitory effects of fungal metabolites isolated from foodstuffs on growth of human cancer cell lines were evaluated. Isolated strains were divided into four classes based on color (aerial, reverse), shape, and growth speed. Fungal metabolites extracted with ethyl acetate were investigated for their growth inhibition on six kinds of human cancer cells by MTT assay. Ethyl acetate extract showed high growth inhibition against all cancer cells tested, with D4 exhibiting the strongest growth inhibition effects against Kato III, AGS, Hepa1c1c7, and MDA-MB-231 cancer cells. These results suggest ethyl acetate extract from fungal metabolites as effective natural cancer therapeutic material.
Iron plays a key role in host-pathogen interactions. Microbial pathogens require iron for survival and virulence, whereas mammalian hosts sequester and withhold iron as a means of nutritional immunity. We previously identified two paralogous genes, CFT1 and CFT2, which encode homologs of a fungal iron permease, Cft1 and Cft2, respectively, in the human fungal pathogen Cryptococcus neoformans. Cft1 was shown to play a role in the high-affinity reductive iron uptake system, and was required for transferrin utilization and full virulence in mammalian hosts. However, no role of Cft2 has been suggested yet. Here, we identified the third gene, CFT3, that produces an additional fungal iron permease homolog in C. neoformans, and we also generated the cft3 mutant for functional characterization. We aimed to reveal distinct functions of Cft1, Cft2 and Cft3 by analyzing phenotypes of the mutants lacking CFT1, CFT2 and CFT3, respectively. The endogenous promoter of CFT1, CFT2 and CFT3 was replaced with the inducible GAL7 promoter in the wild-type strain or in the cft1 mutant for gain-of-function analysis. Using these strains, we were able to find that CFT2 is required for growth in low-iron conditions in the absence of CFT1 and that overexpression of CFT2 compensates for deficiency of the cft1 mutant in iron uptake and various cellular stress conditions. However, unlike CFT2, no clear phenotypic characteristic of the cft3 mutant and the strain overexpressing CFT3 was observed. Overall, our data suggested a redundant role of Cft2 in the high-affinity iron uptake and stress responses in C. neoformans.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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