Background: In the present study, various freezing containers were tested for mouse embryos of respective developmental stages; embryos were vitrified and then their survival rate and developmental rate were monitored. Mouse two cell, 8 cell, and blastula stage embryos underwent vitrification freezing-thawing and then their recovery rate, survival rate, development rate, and hatching rate were investigated. Methods: EM-grid, OPS, and cryo-loop were utilized for vitrification freezing-thawing of mouse embryos. Results: It was found that recovery rate and survival rate were higher in the group of cryo-loop compared to those of EM-grid (p < 0.05). Embryonic development rate, two cell embryos to blastocyst, as well as hatching rate were higher in the control group compared to the EM-grid group and OPS group (p < 0.05), yet no difference was noted between the control group and cryo-loop group. Development rate and hatching rate of eight cell morulae and blastocysts were all lower in the treatment groups than the control group whilst hatching rate of blastocysts was higher in the control group compared to the groups of EM-grid and OPS (p < 0.05); although the cryo-loop group was shown to be slightly higher than other groups, it was not statistically significant. Conclusions: In the study, we investigate effects of freezing containers on vitrified embryos of respective developmental stages; it was demonstrated that higher developmental rate was shown in more progressed (or developed) embryos with more blastomeres. There was however, no difference in embryonic development rate was shown amongst containers. Taken together, further additional studies are warranted with regards to 1) manipulation techniques of embryos for various vitrification freezing containers and 2) preventive measures against contamination via liquid nitrogen.
In order to understand response of geo-structures to the freezing-thawing process in the ground, it is necessary to consider phase change of the pore water of the ground and also to understand soil interaction with structures. In this study, numerical analysis was carried out for freezing and thawing effect on the modular road system. Neumann's theoretical equation for freezing-thawing processes in porous media can be used to estimate frozen depth and heaving from basic soil properties and ground and surface temperature, but its application is limited to the case for the sediment with fully saturated condition and zero unfrozen water content. Numerical analysis of the modular road system was performed on various soil types and different ground water table as the varying freezing index. The amount of heaving in the silty soil was much larger than those in granite weathered soil or sandy soil, and lowering groundwater level reduced ground heaving induced by freezing. Numerical analysis for temperature history of the ground surface predicted residual heaving near the surface by the freeze-thaw process in silty soil. It ought to reduce stiffness and bearing capacity of the ground so that it will impair stability and serviceability of new road system. However, the amount of residual heaving was insignificant for the road system installed in weathered soil granite and sandy soil. Since modular road system is a pavement structure mounted on the supporting substructure unlike the prevalent road pavement system, strict criteria should be applied for uniform and differential settlement of the pavement system.
A series of experiments were conducted to determine the suitable freezing and thawing temperatures for the freezing of boar semen in 5 ml maxi-straws. The ultrastructure, in vitro fertilization (IVF) and artificial insemination (AI) of frozen-thawed semen were also be evaluated. The 5 cm freezing height gave the best results not only in post-thaw motility rate (54.00%), but also in normal acrosome morphology rate (NAR) (80.23%). There was no significant difference in the post-thaw motility between different thawing temperatures and corresponding thawing times (p>0.05); the group of $52^{\circ}C$ and 25 s gave the highest motility rate (45.00%). As a whole, not only from the motility but also the NAR, thawing at $42^{\circ}C$ was better than the other two treatments. In the freezing packages, 5 ml maxi-straw gave a little lower mobility (40%), viability rate (49.58%), plasma membrane integrity rate (53.91%) and NAR (52.65%) than the 0.25 ml straw, but there was no significant difference between the two straw volumes (p>0.05). The IVF capacity of frozen-thawed semen in this experiment was similar to fresh semen. From ultrastructure observation, the main damage to boar spermatozoa after freezing was seen in the acrosome, such as swelling and formation of vesicles. After AI in recipient Shanghai White sows, frozen-thawed semen from 5 ml maxi-straws and pellets produced 72.2% and 80% conception rate and 7.8 and 8 litter sizes, respectively, and there was no significant difference between the 5 ml maxi-straw and the pellet (p>0.05).
This study were carried out to investigate the effective concentration of cryoprotective agents and sucrose by one-step straw method, and to determine the optimum thawing temperature and equilibration time of frozen porcine embryos. The porcine embryos foflowing dehydration by cryoprotective agents and a various concentration of sucrose were directly plunged into liquid nitrogen and thawed in 3$0^{\circ}C$ water. Survival rate was defined by FDA test. The results are sunnnarized as follows : 1. The survival rates of porcine embryos after ultrarapid frozen4hawing in the freezing medium with a various concentration of glycerol, DMSO and propanediol added 0.25M sucrose were higher survival rate than those of sucrose concentration of 0.50M. 2. The survival rates of porcine embryos after ultrarapid ftozen4hawing in the freezing medium added 0.25M and 0.SOM sucrose were higher survival rate than those of sucrose concentration of 0.75M and 1.00M. 3. The temperature thawed at 2$0^{\circ}C$ and 3$0^{\circ}C$ resulted in a significantly higher embryos survival rate after 72 hrs in culture than did at 35$^{\circ}C$. 4. The equilibration time on the survival rate of porcine embryos was attained after short period of time(2.5~5 min.) in the freezing medium higher than long period of time(10~20 min.).
This experiment was carried out to investigate effects of DMSO or ethylene glycol as a cryopotectant and of freezing methods on survival rate of forozen-thawed rat 2-cell embryos by morphological observation. 2-cell embryos were recovered from oviducts of Sprague Dawley females mated with males of same strain on day 2 of pregnancy after inducing superovulation by intrapertioneal injection of PMSG and HCG. In slow freezing and thawing groups, embryos were frozen to -79$^{\circ}C$ or -196$^{\circ}C$ in a glass test tube containing 0.2ml PBI with 1.5M DMSO or 1.2M ethylene glycol at a rate of 0.3-1.0C/min. and thawed slowly. When samples were frozen to -79$^{\circ}C$, higher survival rate was obtained in the medium containing DMSO (43.9%) than ethylene glycol (41%). And similar result was obtained (32.5% in DMSO vs. 31.4% in ethylene glycol) when samples were frozen. In rapid freezing and thawing groups, embryos were frozen to -79 or -196$^{\circ}C$ in a glass test tube containing 0.2ml of PBI with 1.5M DMSO or 1.2M ethylene glycol by rapid cooling, and thawed rapidly. When samples were frozen to -79$^{\circ}C$, 1.5M DMSO (13.2%) was more effective than 1.2M ethylene glycol (6.1%). When the storage temperature was -196$^{\circ}C$, survival rates were 9.8% in 1.5M and 5.4% in 1.2M ethylene glycol.
Kim, Byoung-Mok;Jeong, Jee-Hee;Jung, Min-Jeong;Kim, Jong-Chan;Jun, Ki-Hong;Kim, Dong-Soo;Lee, Kwang-Pyo;Jun, Joon-Young;Jeong, In-Hak
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.48
no.5
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pp.655-660
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2015
This study investigated the effects of freezing storage temperature and thawing time on the separation of leg meat of the red snow crab Chionoecetes japonicus. Crabs were stored at -20, -30, -40, or -50°C for 2 days and thawed for either 5, 10, 20, 30, or 40 seconds. While thawing, there were no significant differences in pH or acidity among the experimental groups, while the volatile basic nitrogen content increased continuously. The redness of samples stored at -20°C was higher than that of the other groups. The overall acceptance of samples stored at -20°C was also the best. These results demonstrate that no-heating methods may be useful for separating red snow crab leg meat.
Effects of freezing period and chilling process after thawing on the physicochemical properties and palatability of hind shank meat from Korean native beef were investigated. There were no significant differences in the Hunter's color, volatile basic nitrogen (VBN) or collagen amount of hind shank meat upon freezing with vacuum packing at $-20^{\circ}C$ for 9 months. In addition, while pH, thiobarbituric acid (TBA) value, hardness, drip and boiling loss of hind shank meat increased and palatability decreased, there significant difference were observed only after 9 months. Softness, water holding capacity, L-glutamic acid, oleic acid, and polyunsaturated fatty acid contents increased upon chilling for 4 days after thawing, and there was a significant increase in palatability. The values of VBN and TBA increased markedly upon 6 days of chilling after thawing, and there was a significant decrease in palatability.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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