• 제목/요약/키워드: freeze-dried cells

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In vitro assay for osteoinductive activity of different demineralized freeze-dried bone allograft

  • Vaziri, Shahram;Vahabi, Surena;Torshabi, Maryam;Hematzadeh, Somayeh
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제42권6호
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    • pp.224-230
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    • 2012
  • Purpose: Various bone graft materials have been used for periodontal tissue regeneration. Demineralized freeze-dried bone allograft (DFDBA) is a widely used bone substitute. The current widespread use of DFDBA is based on its potential osteoinductive ability. Due to the lack of verifiable data, the purpose of this study was to assess the osteoinductive activity of different DFDBAs in vitro. Methods: Sarcoma osteogenic (SaOS-2) cells (human osteoblast-like cells) were exposed to 8 mg/mL and 16 mg/mL concentrations of three commercial types of DFDBA: Osseo+, AlloOss, and Cenobone. The effect of these materials on cell proliferation was determined using the 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay. The osteoinductive ability was evaluated using alizarin red staining, and the results were confirmed by evaluating osteogenic gene expression using reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Results: In the SaOS-2 cells, an 8 mg/mL concentration of Osseo+ and Cenobone significantly increased cell proliferation in 48 hours after exposure (P<0.001); however, in these two bone materials, the proliferation of cells was significantly decreased after 48 hours of exposure with a 16 mg/mL concentration (P<0.001). The alizarin red staining results demonstrated that the 16 mg/mL concentration of all three tested DFDBA induced complete morphologic differentiation and mineralized nodule production of the SaOS-2 cells. The RT-PCR results revealed osteopontin gene expression at a 16 mg/mL concentration of all three test groups, but not at an 8 mg/mL concentration. Conclusions: These commercial types of DFDBA are capable of decreasing proliferation and increasing osteogenic differentiation of the SaOS-2 cell line and have osteoinductive activity in vitro.

벼 흰빛잎마름병균의 균주보관에 따른 병원성 및 집락변이현상 (Preservation Methods of Xanthomonas campestris pv. oryzae in Relation to Virulence and Colony-Type Variation)

  • 황인규;조용섭
    • 한국식물병리학회지
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    • 제2권3호
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    • pp.150-157
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    • 1986
  • 벼흰빛잎마름병균의 균주를 효과적으로 보관하기 위하여 동결건조, 동결, 액체파라핀, 살균수, 계대배양등의 방법을 사용하여 생존율과 병원성유지 정도를 4개월에 걸쳐 조사하였다. 실험결과 $10\%$ sucrose와 $1\%$ gelatin을 함유한 현탁액에서 가장 높은 생존율을 나타냈으며 병원성은 $2\%$ dextrin, $0.5\%$ ascorbic acid, $0.5\%$ ammonium chloride, $0.5\%$ tguiyrea, $0.85\%$ NaCl 등을 함유한 현탁액에서 가장 잘 유지되었다. 계대배양한 균주는 병원성이 약화되었다. 거친집락형은 동결건조 또는 동결과정에서 모두 나타났으며 이는 정상집락에 반해 주름진 집락모습과 사상형이었다. 거친집락형은 병원성이 매우 약하였으며, 탄소원 요구도가 다양하였으므로 동결건조 과정에서 대사작용의 저해가 일어난 것으로 추측되었다.

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다양한 마늘 추출물이 HepG2 세포에서 콜레스테롤 합성에 미치는 효과 (Effects of Various Garlic (Allium sativum) Extracts on Cholesterol Synthesis in HepG2 Cells)

  • 정수한;이상훈;고광석
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제44권12호
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    • pp.1779-1784
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    • 2015
  • 본 연구에서는 마늘의 다양한 조리법에 따른 냉수추출 마늘 추출물이 HepG2 세포 내 콜레스테롤 합성에 미치는 효과에 대하여 알아보고자 세포 내 중성지방 및 콜레스테롤 함량을 확인하고 real-time PCR을 이용하여 작용 기전을 알아보았다. 마늘을 $25^{\circ}C$에서 60분간 숙성하였을 경우 1분간 숙성하였을 때와 비교하여 추출물 내 alliin 함량이 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 마늘 추출물을 HepG2 세포에 처리하였을 때 세포 내 중성지방 및 콜레스테롤의 함량이 감소하는 모습을 보여주었으며, 특히 동결건조 마늘 추출물이 그 효과가 가장 우수하였다. 콜레스테롤 합성의 제한효소인 HMGCoA reductase의 발현량 역시 마늘 추출물을 처리함에 따라 감소하는 모습을 보였으며, 동결건조 마늘 추출물을 처리하였을 때 가장 많이 감소하는 모습을 보였다. 다만 산성처리를 한 마늘의 추출물을 세포에 처리하였을 때에는 그 효과가 감소하는 것으로 나타났다. 동결건조 마늘 추출물의 농도 비례 효과를 살펴본 결과 동결건조 마늘 추출물의 경우 생마늘을 상온에 60분 숙성시킨 마늘 추출물과 구운마늘 추출물에 비하여 세포 내 중성지방과 콜레스테롤 합성 감소에 효과가 뛰어난 것으로 나타났으며, 이러한 결과는 HMGCoA reducatase mRNA의 상대적 발현 수준 차이 이상의 지질 감소 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 동결건조 마늘의 경우 생마늘을 섭취하였을 때와 유사한 또는 더 우수한 효능을 보이면서도 오히려 보관성이 우수하고 생마늘 섭취 시 나타날 수 있는 과민 반응 및 알레르기 반응의 위험이 적기 때문에 다양하게 응용될 수 있는 가능성이 있을 것으로 사료되며, 이를 뒷받침할 방안들의 연구가 진행되어져야 할 것으로 판단된다.

발아조건 및 건조방법이 발아현미의 이화학적 특성에 미치는 영향 (Effect of Germination Condition and Drying Methods on Physicochemical Properties of Sprouted Brown Rice)

  • 김선림;손영구;손종록;허한순
    • 한국작물학회지
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    • 제46권3호
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    • pp.221-228
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    • 2001
  • 1. 현미를 상온저장시 2주까지는 발아율에 차이가 없으나, 저장 3주후부터는 발아율이 급격히 감소되어 발아율이 80%에 미치지 못하기 때문에 발아현미의 재배를 위해서는 도정후 2주 이내의 현미를 사용하는 것이 바람직한 것으로 판단되었다. 2. 24시간 침종처리가 무침종에 비하여 현미의 초기발아율이 약 2-3%증가되었고, $25^{\circ}C$는 현미의 발아율과 생육상태가 좋았을 뿐만 아니라 부패발생도 적었다. 3. 동결건조된 발아현미는 열풍건조된 발아현미와는 달리 호분층 및 내배유부분의 분리현상이 발생되었고, 배유의 전분 저장세포뿐만 아니라 전분립간의 균열현상이 관찰되었다. 4. 열풍건조는 동결건조 보다 유리하였고, 55$^{\circ}C$로 48시간 건조시 발아현미의 불쾌취가 제거되었다. 5. 조단백 및 amylose는 발아일수가 경과함에 따라 함량의 변화가 미미하였으나 조회분, 조섬유 및 유리당은 발아일수가 경과함에 따라 감소되었고, 조지방과 총아미노산의 함량은 증가하였다. 6. $\alpha$-amylase활력은 발아 5일부터 급격히 증가하다가 발아 8일부터 감소되는 경향이었다. 7. 유리당의 함량은 발아기간(0-8일)중 지속적으로 감소되는 경향이었으며 sucrose와 glucose의 감소가 현저하였고 발아 5일 이후 fructose와 maltose는 증가되었다.

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Ramie Leaf Extracts Suppresses Adipogenic Differentiation in 3T3-L1 Cells and Pig Preadipocytes

  • Lee, Joomin;Kim, Ah-Ra;Lee, Jae-Joon
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제29권9호
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    • pp.1338-1344
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    • 2016
  • The present study was carried out to evaluate the anti-obesity effect of different concentrations of extracts of hot air-dried ramie leaf (HR) and freeze-dried ramie leaf (FR) in 3T3-L1 cells and pig preadipocytes. To analyze the effect on cell proliferation, cells were treated with $25{\mu}g/mL$ or $100{\mu}g/mL$ HR or FR extract for 2 days. Cell differentiation was evaluated by measuring glycerol-3-phosphate dehydrogenase and lipoprotein lipase (LPL) activities and intracellular triglyceride content. Treatment with either HR or FR extracts inhibited the proliferation of 3T3-L1 cells and pig preadipocytes in a dose-dependent manner. HR extract treatment inhibited the differentiation of both cell types more effectively than FR treatment. The extent of triglyceride accumulation decreased significantly in both cells following either HR or FR treatment. Furthermore, LPL activity significantly decreased after treatment with HR or FR extract. These results indicated that HR and FR extracts may inhibit proliferation and differentiation of 3T3-L1 cells and pig preadipocytes. Further studies are needed to explore the anti-obesity effect of HR and FR extracts.

Improving the Viability of Freeze-dried Probiotics Using a Lysine-based Rehydration Mixture

  • Arellano, Karina;Park, Haryung;Kim, Bobae;Yeo, Subin;Jo, Hyunjoo;Kim, Jin-Hak;Ji, Yosep;Holzapfel, Wilhelm H.
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제49권2호
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    • pp.157-166
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    • 2021
  • The probiotic market is constantly continuing to grow, concomitantly with a widening in the range and diversity of probiotic products. Probiotics are defined as live microorganisms that provide a benefit to the host when consumed at a proper dose; the viability of a probiotic is therefore of crucial importance for its efficacy. Many products undergo lyophilization for maintaining their shelf-life. Unfortunately, this procedure may damage the integrity of the cells due to stress conditions during both the freezing and (vacuum-) drying process, thereby impacting their functionality. We propose a lysine-based mixture for rehydration of freeze-dried probiotics for improving their viability during in vitro simulated gastric and duodenum stress conditions. Measurement of the zeta potential served as an indicator of cell integrity and efficacy of this mixture, while functionality was estimated by adhesion to a human enterocyte-like Caco-2 cell-line. The freeze-dried bacteria exhibited a significantly different zeta potential compared to fresh cultures; however, this condition could be restored by rehydration with the lysine mixture. Recovery of the surface charge was found to influence adhesion ability to the Caco-2 cell-line. The optimum lysine concentration of the formulation, designated "Zeta-bio", was found to be 0.03 M for improving the viability of Lactiplantibacillus plantarum Lp-115 by up to 13.86% and a 7-strain mixture (400B) to 41.99% compared to the control rehydrated with distilled water. In addition, the lysine Zeta-bio formulation notably increased the adherence ability of lyophilized Lp-115 to the Caco-2 cell-line after subjected to the in vitro stress conditions of the simulated gastrointestinal tract passage.

Trehalose가 발광미생물의 동결건조시 생존 및 발광강도에 미치는 영향과 첨가방법에 대한 연구

  • 박지은;장덕진
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2000년도 춘계학술발표대회
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    • pp.390-393
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    • 2000
  • 재조합 발광미생물인 UV2와 YH9을 보존제로서 trehalose를 혼합한 현탁액을 바로 동결건조한 것과 이 현탁액을 $30^{\circ}C$ incubator에서 15분 동안 진탕배양한 후 동결건조한 것과 trehalose가 첨가된 배지에 약 $6{\sim}7$시간 정도 배양한 배양액을 동결건조한 결과, trehalose를 첨가한 후 15분 동안 진탕배양했을 경우가 UV2는 0.08M의 이상에서 약 45.0%, 50.0%, YH9은 0.16M에서 48.7%, 54.1%로 회복율을 가장 높이는 최적의 조건으로 조사되었다.

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Effect of Protective Compounds on the Survival, Electrolyte Leakage, and Lipid Degradation of Freeze-Dried Weissella paramesenteroides LC11 During Storage

  • Yao, Amenan A.;Wathelet, Bernard;Thonart, Philippe
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제19권8호
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    • pp.810-817
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    • 2009
  • The effect of cryoprotectants (maltodextrin+glycerol) and cryoprotectants+antioxidant [ascorbic acid and/or butylated hydroxytoluene (BHT)] mixtures on the survival, electrolyte leakage, and lipid degradation of freeze-dried Weissella paramesenteroides LC11 during storage was investigated and compared with that of the control (cells without additives) over a 90-day storage period at 4 or $20^{\circ}C$ in glass tubes with water activity ($a_w$) of 0.23. The survival, electrolyte leakage, and lipid degradation were evaluated through colony counts, electrical conductivity, and thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) content, respectively. The fatty acids composition was determined by gas chromatography, in both the total lipid extract and the polar lipid fraction, and compared with that of the control after the 90-day storage period. As the storage proceeded, increases in leakage value and TBARS content, as well as a decrease in viability, were observed. After 90 days of storage, the major fatty acids found in both the total lipid extract and the polar lipid fraction were palmitic (16:0), palmitoleic (16:1), stearic (18:0), oleic (18:1), linoleic (18:2), and linolenic (18:3) acids. The survival, leakage value, TBARS content and 18:2/16:0 or 18:3/16:0 ratio were the greatest for the protected strain held at $4^{\circ}C$. Cells with the cryoprotectants+BHT mixture showed the highest percentage of survival and 18:2/16:0 or 18:3/16:0 ratio in both lipid extracts, as well as the lowest leakage value and TBARS content after the 90-day storage period. Drying cells with the cryoprotectants+BHT mixture considerably slowed down polar lipid degradation and loss of membrane integrity, resulting in improved viability during storage.

동결건조 진주담치 추출물의 항산화 및 DNA 손상 보호 활성 (Antioxidant and DNA Damage Protective Activities of Freeze-Dried Blue Mussel (Mytilus edulis))

  • 이선우;최미주;김시경;이승철;박은주
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제43권12호
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    • pp.1801-1807
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    • 2014
  • 동결건조에 의한 진주담치의 생리활성의 변화를 살펴보고자 DPPH 라디칼 소거능, ORAC, CAC 등의 항산화 활성과 comet assay를 이용한 DNA 손상 보호능을 측정하였다. 생 진주담치 및 동결건조 진주담치에서 물 추출물을 제외한 에탄올과 메탄올 추출물에서 DPPH 라디칼 소거능을 확인하였고, 메탄올 추출물의 경우 동결건조에 의해 DPPH 라디칼 소거능이 증가하는 것으로 나타났다. 생 진주담치의 ORAC 수치는 물 추출물에서 가장 높게 나타난 반면, 동결건조 진주담치의 경우 메탄올 추출물에서 가장 높게 나타났다. 동결건조 후 ORAC 수치는 물 추출물에서만 유의적으로 감소된 반면 HepG2 세포의 라디칼 소거능(CAC)의 경우 물 추출물에서 유의적으로 증가하여 소거 대상 라디칼에 따라 항산화 활성의 차이가 있는 것으로 나타났다. 생 또는 동결건조 진주담치는 모든 추출물에서 산화적 스트레스에 의한 DNA 손상을 억제하는 보호 효과가 있음이 밝혀졌고 동결건조에 의한 보호 효과는 유의적인 변화가 없는 것으로 나타났다. 결론적으로 진주담치는 물 추출물의 DPPH 라디칼 소거능을 제외하고는 모든 추출물에서 항산화 활성과 더불어 DNA 손상의 보호 효과가 관찰되었고 동결건조 가공처리에 의해서 그 활성이 크게 영향을 받지 않거나 추출물에 따라 오히려 활성이 증가함을 알 수 있었다. 이러한 결과를 바탕으로 우리나라에서 생산되는 진주담치의 식품 첨가물이나 기능성 식품 개발을 위한 생리활성 소재로의 가능성을 확인할 수 있었다.

神授衛生湯의 抗腫瘍 效果 (Effects of Shinsuwuisaeng-Tang on the Anti-Tumor)

  • 배진석;최정화;김종한
    • 한방안이비인후피부과학회지
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    • 제15권2호
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    • pp.132-144
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    • 2002
  • Shinsuwuisaeng-Tang was a drug that treated carbuncle and cellulitis. So, the purpose of this Study was to investigate effect of Shinsuwuisaeng-Tang on the anti-cancer and nitric oxide(NO) production of peritoneal macrophages. We used Shinsuwuisaeng-Tang extract(SWT) with freeze-dried, 8wks-old male mice. and cancer cell lines(L1210, sarcoma-180) for this Study. The proliferation of cells was tested using a colorimetric tetrazoliun assay(MTT assay). The results of this Study were obtained as follow; SWT was showed cytotoxicity on the L1210 and sacoma-180(S-180) cell lines, SWT inhibited significantly proliferation of L1210 cells in L1210 cells transplanted mice, SWT accelerated NO production of peritoneal macrophages in L1210 cells transplanted mice. And SWT inhibited significantly tumor weight, increased significantly body weight and mean survival days in S-180 cells transplanted mice. This results suggest that SWT has anti-cancer by producing NO of peritoneal macrophages.

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