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누에 핵다각체병 바이러스의 다각체 단백질 유전자의 위치 탐색 및 염기서열 (Location and Nucleotide Sequence of the Bombyx mori Nuclear Polyhedrosis Virus Polyhedrin Gene)

  • 우수동;김현욱;박범석;강석권;양재명;정인식
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제34권2호
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    • pp.20-25
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    • 1992
  • 유용물질을 생산할 수 있는 곤충 baculovirus expression vector system의 국내 개발을 위하여, Bm-NPV의 다각체 단백질 유전자를 탐색, 클로닝 하고 그 구조를 분석한 결과는 다음과 같다. 1. AcNPV의 다각체 단백질 유전자를 포함하고 있는 EcoRI-Ⅰ fragment내의 0.93kb를 probe로 하여 southern 분석한 결과, BmNPV의 다각체 단백질 유전자는 PstⅠ-F fragment(7.4Kb)에 위치하였다. 2. BmNPV의 다각체 단백질 유전자를 포함하는 PstⅠ-F fragment를 E. coli에 클로닝시켜서 pBmP-F라 명명하고, 다시 southern분석을 통해 subcloning하여 pBmP-H라 명명하였으며 pBmP-H의 제한효소 지도를 작성하였다. 3. pBmP-H의 염기서열분석결과 구조유전자를 포함한 1,259 bp의 염기서열이 결정되었다. Iatrou 등이 보고한 BmNPV 다각체 단백질 유전자의 염기서열과 비교한 결과 10개의 염기서열에서 차이를 보였으며, 74 Val이 Ile로, 76 Asn이 Ser으로 155 Met이 Val로 아미노산 변경된 결과를 보였다.

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Staphylococcus aureus에서 분리된 plasmid상의 항생물질 저항성 인자에 관한 연구 : Chloramphenicol 저항성 인자의 클로닝 (Studies on antibiotics resistance gene in Staphylococcus aureun Plasmid: Cloning of chloramphenicol resistance determinant)

  • 권동현;김영선;변우현
    • 미생물학회지
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    • 제24권4호
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    • pp.341-351
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    • 1986
  • 항생제에 대하여 다중 저항성을 갖는 Shaphylococcus aµreus D-H-1으로부터 chloram phenicol(Cm) 저항성 유전자를 가진것으로 확인된 R-plasmid(pSBK203, 2.5MdaJ.)를 분리하여 Bacillus subtilis BD 170 내에셔 발현시켰으며 이 Cm 저항성 유전자를 cloning하기 위하여 pSBK203상의 제한효소 인식부위를 결정하였다. pSBK203 상의 TaqI 부분 절편 0.3 kb을 pBD9 CZaI 인식부위내에 삽입하여 얻은 재조합 plasmid(pTQ16)와 TaqI부 분절편과 O.lkb 엇갈럼이 있는 RsaI 단일절떤(1. 3 kb} pBR322의 Seal 인식부위에 삽입하여 얻은 재조합 p plasmid(pHW20)에서 Cm 저항성이 획득되었다. pBD9 및 pBR322 상에 삽입된 두 절펀내에 Hinf, Taq I 빛 BglII의 제한효소 인식부위가 존재하였으며 이들 중 행III 인식부위에 의하여 Cm 저항성이 불활성 되었다.

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흡수성 반월상 연골나사를 사용한 얇은 골연골 골절의 치료 - 증례 보고 - (Biodegradable Meniscus Screw Fixation of Thin Flap Osteochondral Fracture - Two Case Report -)

  • 전재균;선두훈;송인수;김영우;정재용;이봉주
    • 대한관절경학회지
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    • 제14권2호
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    • pp.131-134
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    • 2010
  • 관절내 골연골 골절은 적절한 치료가 이루어 지지 않은 경우 골관절염을 초래하여 통증과 기능장애를 초래할 수 있다. 골 연골 골절의 크기가 큰 경우에는 관혈적 정복 및 금속고정 수술등으로 치료를 할 수 있으나, 골편의 두께가 2mm 이하로 얇은 경우 튼튼한 고정력을 얻기 어려워 제거 하는 경우가 많았다. 저자들은 대퇴 내과에 발생한 박리성 골연골염 환자와 슬개골 골절로 골편의 두께가 2mm이하인 환자에서 흡수성 반월상 연골나사를 이용하여 좋은 결과를 얻었기에 보고하고자 한다.

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A Gene-Tagging System for Monitoring of Xanthomonas Species

  • Song, Wan-Yeon;Steven W. Hutcheson;Efs;Norman W. Schaad
    • The Plant Pathology Journal
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    • 제15권3호
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    • pp.137-143
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    • 1999
  • A novel chromosomal gene tagging technique using a specific fragment of the fatty acid desaturase-like open reading frame (des-like ORF) from the tox-argK gene cluster of Pseudomonas syringae pv. phaseolicola was developed to identify Xanthomonas spp.released into the environment as biocontrol agents. X. campestris pv. convolvuli FB-635, a pathogen of Convolvulus arvensis L., (bindweed), was chosen as the organism in which to develop and test the system. A 0.52 kb DES fragment amplified from P. syringae pv. phaseolicola C-199 was inserted into pGX15, a cosmid clone containing a 10.3 kb Eco RI-HindIII fragment derived from the xanthomonadin biosynthetic gene cluster contained in plasmid pIG102, to create a pigG::DES insertion. The 10.8 kb EcoRI-BamHI fragment carrying the pigG:: DES insertion was cloned into pLAFR3 to generate pLXP22. pLXP22 was then conjugated into X. campestris pv. convolvuli FB-635 and the pigG::DES insertion integrated into the bacterial chromosome by marker exchange. Rifampicin resistant, tetracycline sensitive, starch hydrolyzing, white colonies were used to differentiate the marked strain from yellow pigmented wild-type ones. PCR primers specific for the unique DES fragment were used for direct detection of the marked strain. Result showed the marked strain could be detected at very low levels even in the presence of high levels of other closely related or competitive bacteria. This PCR-based DES-tagging system provides a rapid and specific tool for directly monitoring the dispersal and persistence of Xanthomonas spp.released into the environment.

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A Genetic Marker Associated with the A1 Mating Type Locus in Phytophthora infestans

  • KIM KWON-JONG;EOM SEUNG-HEE;LEE SANG-PYO;JUNG HEE-SUN;KAMOUN SOPHIEN;LEE YOUN SU
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제15권3호
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    • pp.502-509
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    • 2005
  • Sexual reproduction plays an important role in the biology and epidemiology of oomycete plant pathogens such as the heterothallic species Phytophthora infestans. Recent worldwide dispersal of A2 mating type strains of P. infestans resulted in increased virulence, gene transfer, and genetic variation, creating new challenges for disease management. To develop a genetic assay for mating type identification in P. infestans, we used the Amplified Fragment Length Polymorphism (AFLP) technique. The primer combination E+AT/M+CTA detected a fragment specific to A1 mating type (Mat-A1) of P. infestans. This fragment was cloned and sequenced, and a pair of primers (INF-1, INF-2) were designed and used to differentiate P. infestans Mat-A1 from Mat-A2 strains. The Mat A1-specific fragment was detected using Southern blot analysis of PCR products amplified with primers INF-1 and INF-2 from genomic DNA of 14 P. infestans Mat-A1 strains, but not 13 P. infestans Mat-A2 strains or 8 other isolates representing several Phytophthora spp. Southern blot analysis of genomic DNAs of P. infestans isolates revealed a 1.6 kb restriction enzyme (EcoRI, BamHI, AvaI)-fragment only in Mat-A1 strains. The A1 mating type-specific primers amplified a unique band under stringent annealing temperatures of $63^{\circ}C-64^{\circ}C$, suggesting that this PCR assay could be developed into a useful method for mating type determination of P. infestans in field material.

골편적출술을 적용한 후두골 골절 치료 (Treatment of an Occipital Fracture by Esquillectomy)

  • 박진욱;조기래;장동우;최석화;김근형
    • 한국임상수의학회지
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    • 제27권4호
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    • pp.450-452
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    • 2010
  • 4년령의 수컷 요크셔테리어가 두부의 둔상에 의한 구토와 무의식을 주증으로 내원하였다. 육안검사에서 안면 부종, 피하 출혈, 과유연을 확인하였다. 방사선 검사에서 후두골편이 뒤쪽으로 변위되어 있음이 확인되었다. 3차원으로 재구성한 컴퓨터단층촬영 영상에서 골편의 배쪽 부분이 불완전하게 부착되어 있음을 보여주었고, 골편의 불안정성 때문에 골편적출술을 실시하기로 결정하였다. 골편의 제거 후, 결손부는 널판근을 이용한 근육판으로 보강하였다. 환자 상태는 약간의 실조성 보행을 제외하고, 점차 개선되었다. 술 후 20개월째 추적조사에서 운동실조는 더 이상 관찰되지 않았다. 심한 두 개 내 출혈과 두개골 골절에도 불구하고, 수술적인 중재를 시작하기까지 환자의 신경학적인 상태는 심하게 악화되지는 않았다. 이는 바깥쪽으로 변위된 골편이 신경학적 악화를 야기할 수 있는 두개내압의 증가를 방지하는데 주요한 역할을 했기 때문이라고 사료된다.

고려인삼(Panax ginseng C.A. Meyer) ATPase $\alpha$-subunit 유전자의 Cloning (Molecular Cloning of ATPase $\alpha$-Subunit Gene from Mitochondria of Korean Ginseng (Panu ginseng C.A. Meyer))

  • Park, Ui-Sun;Choi, Kwan-Sam;Kim, Kab-Sig;Kim, Nam-Won;Choi, Kwang-Tae
    • Journal of Ginseng Research
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    • 제19권1호
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    • pp.56-61
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    • 1995
  • Molecular cloning and restriction mapping on ATPase $\alpha$-subunit gene (atpA) were carried out to obtain genomic information concerned with the gene structure and organization in Korean ginseng mitochondria. Two different clones containing the homologous sequence of atpA gene were selected from SalI and PstI libraries of mitochondrial DNA (mtDNA) of Korean ginseng. The sizes of mtDNA fragments inserted in SalI and PstI clones were 3.4 kb and 13 kb, respectively. Southern blot analysis with [$^{32}P$] labelled Oenothera atPA gene probe showed that atpA gene sequence was located in 2.0 kb XkaI fragment in PstI clone and in 1.7 kb XbaI fragment in SalI clone. A partial sequening ascertained that the SalI clone included about 1.2 kb fragment from SalI restriction site to C-terminal sequence of this gene but about 0.3 kb N-terminal sequence of open reading frame was abscent. The PstI fragment was enough large to cover the full sequence of atpA gene. The same restriction pattern of the overlapped region suggests that both clones include the same fragment of atiA locus. Data of Southern blot analysis and partial nucleotide sequencing suggested that mtDNA of Korean ginseng has a single copy of atpA gene. Key words ATPase a-subunit, mitochondrial DNA, Panax ginseng.

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상악 전치부 치관 파절의 보존적이고 심미적인 접근법: 파절편 재부착 (Conservative and esthetic approach in crown fracture of maxillay anterior tooth: tooth fragment reattachment)

  • 정경화;권은영;김소연;전혜미;손성애;박정길
    • 구강회복응용과학지
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    • 제35권2호
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    • pp.105-112
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    • 2019
  • 치관 파절은 영구치, 특히 치열에서 가장 노출된 위치에 존재하는 상악 전치에 가장 많이 발생하는 외상성 손상이다. 파절편 조각이 존재하고 상태가 양호한 경우 치관 파절을 치료하는 방법 중 하나는 원래 위치에 다시 파절편을 재부착하는 것이다. 이번 연구에서는 상악 전치에 발생한 치관 파절 증례를 파절편 재부착 술식으로 치료하였으며 심미적, 기능적으로 만족할만한 결과를 얻었기에 이를 보고하는 바이다.

Linkage of the Kanamycin Resistance Gene with the Streptothricin Resistance Gene in Staphylococcus aureus SA2

  • Shin, Chul Kyo;Sung Hwan Im;Woo Koo Kim;Kyung Bo Moon
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제6권3호
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    • pp.219-220
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    • 1996
  • The pKH2 isolated from the multidrug-resistant Staphylococcus aureus SA2 is a 40.98-kb plasmid and mediates resistance to ampicillin, clindamycin, erythromycin, kanamycin, and streptomycin. The 3.4-kb HindIII fragment conferring kanamycin resistance was cloned from the pKH2 into pBluescriptII $KS^+$ and partial sequence determination of that fragment was carried out. Sequence analysis revealed that the kanamycin resistance gene which encoded aminoglycoside 3'-phosphotransferase was linked to the streptothricin resistance gene. But a nonsense mutation was found in the streptothricin resistance gene and this mutation resulted in a truncated protein of streptothricin acetyltransferase. Homology comparison with nucleotide sequence databases revealed that the 3.4-kb HindIII fragment of pKH2 had been derived not from S. aureus but from Gram-negative Campylobacter coli.

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Isolation of an Autonomously Replicating DNA Sequence from Aspergillus nidulans

  • Jang, Seung-Hwan;Jahng, Kwang-Yeon
    • Journal of Microbiology
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    • 제37권2호
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    • pp.51-58
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    • 1999
  • Using yeast, Saccharomyces cerevisiae, and the integrate vector system, we have isolated and characterized an autonomously replicating sequence (ARS) from Aspergillus nidulans. The DNA fragment, designated ANR1, is 5.0 kb in size and maintained free from the chromosome in S. cerevisiae. The YIplac211-ANR1 recombinant plasmid, which consists of sequences derived from the yeast integrative vector YIplac211 and 5.0 kb ANR1 fragment, showed a 104-fold enhancement in transformation efficiency over that found for YIplac211, and was easily recovered from the transformed yeast. Genetic analysis of transformants showed that YIplac21-ANR1 could be over 96% cured when cultured over 20 generations in complete medium and thus suggests that this sequence is mitotically unstable. In A. nidulans, recombinant plasmid PILJ16-4.5 which carries the 4.5 kb EcoRI fragment of ANR1 showed a 170-fold enhancement in transformation efficiency compared to that of the integrative vector PILJ16.

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