The genus Bacillus includes a variety of diverse bacterial species, which are widespread throughout the environment due to their ubiquitous nature. A well-known member of the genus, Bacillus cereus, is a food poisoning bacterium causing both emetic and diarrhoeal disease. Other Bacillus species, particularly B. subtilis, B. licheniformis, B. pumilus, and B. thuringiensis, have also recently been recognized as causative agents of food poisoning. However, reviews and research pertaining to bacilli have focused on B. cereus. Here, we review the literature regarding the potentially toxigenic Bacillus species and the toxins produced that are associated with food poisoning.
The gram-positive bacterium Staphylococcus aureus is a common cause of abscesses, sinusitis and food poisoning. The emergence of antibiotic-resistant strains has caused significant clinical issues worldwide. The HslU-HslV complex was first identified as a prokaryotic homolog of eukaryotic proteasomes. HslU is an unfoldase that mediates the unfolding of the substrate proteins, and it works with the protease HslV in the complex. To date, the protein complex has been mostly studied in gram-negative bacteria. In this study, we report the purification and crystallization of the full-length HslU from S. aureus. The crystal diffracted X-rays to a $3.5{\AA}$ resolution, revealing that the crystals belong to space group $P2_1$, with unit cell parameters of a = 166.5, b = 189.6, $c=226.6{\AA}$, and ${\beta}=108.1^{\circ}$. We solved the phage problem by molecular replacement using the structure of HslU from Haemophilus influenzae as a search model. The cell content analysis with this molecular replacement solution revealed that 24 molecules are contained in the asymmetric unit. This structure provides insight into the structural and mechanistic difference of the HslUV complex of gram-positive bacteria.
Histamine은 적색육 어류의 histidine이 어육 중의 Morganella morganii, Hafnia alvei 및 Klebsiella pneumoniae와 같은 부패세균에 의해 탈탄산 되어 초기에 형성되는 것으로 allergy성 식중독을 일으킬 수 있다. 이는 적색육 어류인 고등어의 선도저하 시에 많이 생성된다. 그리고 부패 후기에는 histamine을 분해하는 세균도 존재하는 것으로 알려져 있다. 그러므로, histamine 식중독의 잠재력을 지닌 자반고등어로 인한 식중독 사고 예방과 그 위생 대책을 수립하는데 필요한 자료를 얻고자 자반고등어에서 histamine 분해능을 가진 균을 분리, 동정하였다. 시료는 대형마트에서 시판되는 상태로 구입하였다. 질소원과 탄소원으로써 histamine만을 첨가한 제한배지를 사용하여 histamine 분해능을 가진 균을 분리하였다. 그리고 Cram staining, oxidase, catalase, citrate, TSI test, $H_{2}S$ reaction 및 indole 생성 등의 기본적인 생화학적 동정시험을 거쳐 10종의 시험균주를 선택하였다. 이 균주들을 16SrRNA gene 염기서열 비교에 의한 계통발생학적 분석을 이용하여 동정 하였다. 그 결과, Pseudomonas putida strain RA2, Halomonas marina, Uncultured Arctic sea ice bacterium clone ARKXV1/2-136, Halomonas venusta, Psychrobacter sp. HS5323, Pseudemonas putida KT2440, Rhodococcus erythropolis, Klebsiella terrigena (Raoultella terrigena), Alteromonadaceae bacterium T1, Shewanella massilia의 10종이 모두 동정 되 었으며, 각각 $100\%,{\;}100\%,{\;}99\%,{\;}99\%,{\;}99\%,{\;}99\%,{\;}100\%,{\;}95\%,{\;}99\%,{\;}100\%$의 상동성을 보였다. Histamine분해능의 존재를 탁도측정법과 효소법에 의해 확인한 결과, 분리된 10종 모두의 histamine 분해능이 재확인 되었고, 그 중 Shewanella massilia가 최대의 histamine 분해능을 보이는 것으로 확인되었다. 이 결과로 자반고등어 시판 제품에는 다수의 histamine 분해 세균이 존재하는 것을 확인할 수 있었으며, 이 세균을 활용한다면 식품 내 존재하는 histamine을 효과적으로 분해할 수 있을 것이라 예상된다.
본 연구는 식중독 원인 세균인 Salmonella enteritidis JK-15를 장미추출물에 노출시켜 나타나는 살균효과를 조사하기 위하여 실시하였다. 분리세균인 S. enteritidis JK-15는 장시간 노출된 음식으로부터 농화, 분리되었다. 16S rRNA PCR을 수행하여 S. enteritidis JK-15의 유전학적 계통수를 작성하였다. BIOLOG 분석 시스템과 16S rRNA 염기서열 분석을 통하여 S. enteritidis 종(species)과 98% 유사성을 가졌으며, 이 균주를 S. enteritidis JK-15로 명명 하였다. 5~100 mg/ml 범위의 장미추출물에 노출된 S. enteritidis JK-15의 살균효과를 조사하였고, 100 mg/ml의 장미추출물에서 6시간, 그리고 50 mg/ml에서 12시간 이내에 완전히 살균되었다. 지수생장기의 S. enteritidis JK-15 균주는 노출된 장미추출물의 농도와 시간에 따라 lipopolysaccharide의 양이 변화하는 것을 SDS-PAGE와 silver staining을 통하여 관찰하였다. 또한, 주사전자현미경을 이용하여 장미추출물에 노출시킨 세균의 외부 형태를 분석한 결과, 움푹 패이고 불규칙적인 간균 형태로 관찰되었다.
Kim, Soo-Min;Noh, Bong-Soo;Kim, Hae-Yeong;Park, Se-Jin;Ji, Geun-Eog
Food Science and Biotechnology
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제14권3호
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pp.410-412
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2005
Vibrio parahaemolyticus is a gram-negative bacterium which acts as a causative agent for food poisoning. Studies with respect to specific extracellular proteins of V. parahaemolyticus would be useful for the development of specific detection methods against V. parahaemolyticus. In our present study, outer membrane proteins (OMPs) of V. parahaemolyticus were obtained from insoluble traction of 1% sarkosyl treated-cell wall materials. SDS-PAGE analysis showed the presence of several conserved outer membrane proteins among five strains of V. parahaemolyticus, and three bands were identified as V. parahaemolyticus OMPs through MALDI-TOF analysis. Polyclonal antibodies enriched with anti-OmpU were obtained from immunized rabbits. The antibodies against these proteins may be useful for the development of detection methods for V. parahaemolyticus.
법미생물 검사실에서는 식품의 미생물 분석이 요구되는 경우들이 있다. 국립과학수사연구원에 식품 미생물분석이 의뢰된 샘플들 중에서 Bacillus cereus 균이 분리되었던 일부 증례가 있었다. B. cereus는 식중독을 일으킬 수 있는 중요한 병원성 세균이다. 따라서 우리는 최근 미생물 검사를 위해 의뢰된 멸치액젓에서 B. cereus를 분리한 후, 16S rDNA 서열을 기반으로 하는 MSId 방법 및 real-time PCR 법에 따라 균을 동정 하였다. 또한 설사 독소 유전자 및 구토 독소 유전자 검출을 위한 PCR을 실시하고 B. cereus 분리 균주에서 nheABC, bceT 및 entFM 설사 독소 유전자의 존재를 확인하였다. 임상적으로 중요한 몇 가지 식중독 세균들은 식품 미생물 검사 시 주목해야 할 필요가 있다. 특히, 이러한 식중독 세균들 중에서 B. cereus는 환경저항성 및 내열성이 강한 내생포자를 형성하고, 내열성 독소를 형성할 수도 있기 때문에 조리된 음식을 섭취해도 식중독을 일으킬 수 있다. 본 연구를 통해서 B. cereus등의 임상적으로 중요한 세균을 구별하는 것이 식품미생물 검사 시 중요함을 강조하고, 또한 법미생물 검사실에 앞으로 의뢰될 식품미생물 분석 사례들을 위해 B. cereus의 식별 및 세균의 독소 유전자 검출을 위한 지침을 제공 하고자 한다.
This study was performed to survey distribution of microorganisms and food-borne pathogenic bacterium in order to estimate microbiological safety in seonsik and saengsik. Total aerobic bacteria was detected over $10^5\;CFU/g$ in raw materials($4.3\%$) and products($35.7\%$) of saengsik. Coliforms were detected over $10^2\;CFU/g$ in seonsik products($27.3\%$) and in raw materials($4.3\%$) and products($35.7\%$) of saengsik. Cl. perfringens was detected in saengsik products($4.8\%$). B. cereus was detected in raw materials($12.5\%$) and products($18.2\%$) of seonsik and raw materials($13.0\%$) and products($23.8\%$) of saengsik. Concentration and detection rate of microorganisms in products were higher than raw materials. These results show some food hygiene problems but do not cause food poisoning because concentration of Clostridium perfringens and B. cereus were lower than $10^5\;CFU/g$.
The objective of this study was to analyze bacteriological and chemical hazards in minimally processed commercial fish products, including Hwangtae (freeze-dried pollock), dried anchovy, fermented anchovy sauce, and salted and dried yellow croaker. Escherichia coli counts from all samples were below the regulation limits of the Korean Ministry of Food and Drug Safety Standards on Quality of Seafood and Seafood Products (Food Code). However, the food poisoning bacterium Staphylococcus aureus was detected at levels above $1.0{\times}10^2$ colony forming units (CFU)/g in Hwangtae, dried anchovy, and salted and dried yellow croaker, which are commonly ingested without heating and pose bacteriological hazards. The detection of S. aureus, an organism indicative of poor personal hygiene, which can be introduced by employees and multiply during distribution, indicates the necessity of improving the sanitary control of minimally processed commercial fish products. Histamine was not detected from dried anchovy or salted and dried yellow croaker, but was detected at some of the highest levels in fermented anchovy sauces. This result suggests that efforts to reduce the amount of histamine in fermented anchovy sauces are required.
조리방법을 달리한 마늘을 대상으로 새로운 식품개발 및 천연 보존료 개발의 일환으로 물, 에탄올로 추출한 항균활성 물질을 몇 종의 병원균과 식중독균 식품과 관련이 있는세균, 젖산균 및 효모등 10개 균주에 대한 항균활성 검색을하였으며, 항균력이 강한 마늘 에탄을 추출물을 용매 계통분획하여 각 분획별 항균활성을 조사하였다. 또한 에탄을안정성, pH 등을 조사하였다. 생마늘과 마늘장아찌 추출물의 항균활성은 에탄을 추출물과 물 추출물이 10균주 중 세균에 대하여 항균활성이 강하였으나, 젖산균 및 효모에 대해서는 항균활성이 나타나지 않았다. 열처리한 자숙마늘, 구운 마늘, 전자렌지로 익힌 마늘은 항균활성이 나타나지 않았으며 이러한 결과로 볼 때 마늘의 항균성물질은 가공방법중 열처리에 의하여 활성이 급격히 소실됨을 알 수 있었다. 마늘의 에탄을 추출물을 핵산, 디에칠에테르, 에칠아세테이트 및 물로 용매계통 분획하여 얻은 각 분획물의 항균활성은 에탄올, 에칠아세테이트와 물층에서 강한 항균활성을 보였고 균주별로 일반세균은 항균활성이 나타났으며, 효모와 젖균에서는 항균활성이 나타나지 않았다. 생마늘의 에탄올 추출물의 최소저해농도는 그람양성세균은 0.1 mg/mL이었고, 그람음성세균은 0.5 mg/mL 효모와 젖산균은 2 mg/mL이었다. 마늘의 에탄을 추출물에 함유되어 있는 항균활성물질은 50$^{\circ}C$에서는 비교적 안정하나 온도가 높아질수록 점점 clear zone이 작아져 90$^{\circ}C$에서 10분 이상 가열시 항균활성은 급격히 저하되었고, pH 변화에서는 비교적 안정한 것으로 나타났다.
Hwang, Hyelyeon;Lee, Ho Jae;Lee, Mi-Ai;Sohn, Hyejin;Chang, You Hyun;Han, Sung Gu;Jeong, Jong Youn;Lee, Sung Ho;Hong, Sung Wook
한국축산식품학회지
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제40권4호
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pp.512-526
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2020
Synthetic nitrite is considered an undesirable preservative for meat products; thus, controlling synthetic nitrite concentrations is important from the standpoint of food safety. We investigated 1,000 species of microorganisms from various kimchi preparations for their potential use as a starter culture for the production of nitrites. We used 16S rRNA gene sequence analysis to select a starter culture with excellent nitrite and nitric oxide productivity, which we subsequently identified as Staphylococcus hominis subspecies hominis WiKim0113. That starter culture was grown in NaCl (up to 9%; w/v) at 10℃-40℃; its optimum growth was observed at 30℃ at pH 4.0-10.0. It exhibited nonproteolytic activity and antibacterial activity against Clostridium perfringens, a bacterium that causes food poisoning symptoms. Analysis of Staphylococcus hominis subspecies hominis WiKim0113 with an API ZYM system did not reveal the presence of β-glucuronidase, and tests of the starter culture on 5% (v/v) sheep blood agar showed no hemolytic activity. Our results demonstrated the remarkable stability of coagulase-negative Staphylococcus hominis subspecies hominis WiKim0113, especially in strain negative for staphylococcal enterotoxins and sensitive to clinically relevant antibiotics. Moreover, Staphylococcus hominis subspecies hominis WiKim0113 exhibited a 45.5% conversion rate of nitrate to nitrite, with nitrate levels reduced to 25% after 36 h of culturing in the minimal medium supplemented with nitrate (200 ppm). The results clearly demonstrated the safety and utility of Staphylococcus hominis subspecies hominis WiKim0113, and therefore its suitability as a starter culture.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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