To produce the functional food materials from edible mushrooms, hot-water extracts from 70 kinds of mushroom mycelia were examined for anti-complementary activity and Phellinus linteus showed the highest activity through the complement fIxation test. The maximum production of Phellinus linteus mycelia with anti-complementary activity was observed in culture medium containing soluble starch 3.0%, peptone 0.3%, yeast extract 0.4%, $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ 0.1%, $K_2HPO_4$ 0.2% and in the culture conditions controlled at initial pH 7.0, $30^{\circ}C$ and 150 rpm by the rotary shaker. In addition, the maximum production of mycelial dry weight was 15 mg/mL after 18 days under the optimal conditions, and anti-complementary activity was reached to 88% in 5 L-jar fermenter.
BYUN , DAE-SEOK;KIM, DOO-SANG;J. SAMUEL GODBER,;NAM, SOO-WAN;OH, MYONG-JOO;SHIM, HANG-SUN;KIM, HYEUNG-RAK
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.14
no.6
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pp.1134-1141
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2004
A bacterial strain capable of hydrolyzing sulfate ester bonds in p-nitrophenyl sulfate and agar was isolated from the Southeast coast of Korea. The isolated strain (AS6330) is aerobic, Gram-negative, rod-shaped, and motile. Octadecanoic acid was the major cellular fatty acid in the isolate. An almost complete 16S rDNA sequence of the isolate was determined and the sequence similarity of the 16S rDNA with those of known Sphingomonas spp. was found to be at most $96.4\%$, implying that the isolate was a new Sphingomonas species. The organism was grown optimally at NaCl concentration of $1.5-3.5\%$. Optimum culture conditions were determined to be $30^{\circ}C$ and pH 7.0 for 48 h fermentation using a laboratory fermentor under constant culture conditions. Partially purified arylsulfatase through Q-Sepharose and phenylSepharose chromatographies catalyzed hydrolysis of sulfate ester bonds in agar, and $97\%$ of sulfates in agar were removed after 4 h reaction at $45^{\circ}C$ and pH 7.0. The arylsulfatase from the isolated bacterium might be useful for the removal of sulfate groups in agar.
PASSARINHA L. A.;DIOGO M. M.;QUEIROZ J. A.;MONTEIRO G. A.;FONSECA L. P.;PRAZERES D. M. F.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.1
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pp.20-24
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2006
Plasmid DNA (pDNA) is a product of interest for many biopharmaceutical companies and research laboratories, because of increase in the number of gene therapy protocols that use nonviral vectors. This work was undertaken to study the effect of antibiotic and dissolved oxygen concentration (DOC) on the production of a ColE 1-type plasmid (pVAX1-LacZ) hosted in Escherichia coli $DH5\alpha$ and cultured in a batch fermentor with 0.751 of Terrific Broth. A decrease in the DOC from $60\%\;to\;5\%$ was shown to increase the specific pDNA concentration approximately 1.5-fold, due to the downregulation of growth. Additionally, this increase in the pDNA concentration led to a 2.2-fold increase in the purity of cell lysates obtained after cell lysis. However, the use of higher DOC led to 2.8-fold higher volumetric productivity as a consequence of a faster growth rate, reducing the fermentation time from 24 to 8 h. Interestingly, the specific pDNA concentration, and pDNA productivity and purity were always higher $(10-15\%)$ in the absence of antibiotic. Overall, the data indicate that nonselective conditions can be used without compromising yield, productivity, and purity of pDNA.
High-level expression of the lipase B26 gene from Bacillus pumilus was achieved using Bacillus subtilis Chungkookjang isolated from the Korean traditional fermented bean paste, Chungkookjang. For the secretory production of recombinant lipase B26 in a Bacillus host system, pLipB26 was constructed by ligating the lipase B26 gene into the recently designed Escherichia coli-Bacillus shuttle vector, pLipSM, and that was then transformed into B. subtilis Chungkookjang. Among the various vector, medium, and host combinations, B. subtilis Chungkookjang harboring the pLipB26 exhibited the highest lipase activity in PY medium, and B. subtilis Chungkookjang secreted two times more enzymes than B. subtilis DB 104 under the same condition. When B. subtilis Chungkookjang harboring the pLipB26 was cultured in a 5-1 jar-fermentor containing 21 of a PY medium, the maximum lipase activity (140 U/ml) and production yield (0.68 g/l) were obtained during the late exponential phase from a cell-free culture broth. Although B. subtilis Chungkookjang also secreted extracellular proteases at the late exponential phase, these results suggested the potential of B. subtilis Chungkookjang as a host for the secretory production of foreign proteins.
A UVmutant of Candida rugosa IF00750 was made and used to convert butYlic acid to D-$\beta$-hydroxybutyric acid(D-$\beta$-HBA). Major regulating factors for D-$\beta$-HBA fennentation were investigated via chemostat analyses. The maximum specific productivity was achieved at a specific growth rate of $0.06h^{-1}$ where the glucose and butyric acid concentrations in the fermentor were 10 g/L and 8.7 g/L. respectively. A fed-batch fennentation was performed with maintenance of the optimum glucose and butyric acid concentrations. The D-$\beta$-HBA concentration after 120 h of cultivation reached 12.4 g/L, which was 4.7 times greater illan the concentration obtained by batch fermentation.
The morphology of filamentous fungi closely correlates with the productivity in submerged culture. Using itaconic acid (IA) production by Aspergillus terreus as a research model, the quantitative relationship between the growth form of A. terreus and IA production was investigated. IA fermentation was scaled up from shake flasks to a 7 L stirred tank bioreactor based on the quantitative relationship. Our results demonstrated the following: (1) Three morphologies of A. terreus were formed by changing the inoculum level and shape of the flask. (2) Investigation of the effects of the three morphologies on broth rheology and IA production revealed the higher yield of IA on dry cell weight (DCW, IA/DCW) and yield of glucose on DCW (consumed glucose/DCW) were achieved during clump growth of A. terreus. (3) By varying the $KH_2PO_4$ concentration and culture temperature, the relationships between clump diameter and IA production were established, demonstrating that the yield of IA on DCW ($R^2$ = 0.9809) and yield of glucose on DCW ($R^2$ = 0.9421) were closely correlated with clump diameter. The optimum clump diameter range for higher IA production was 0.40-0.50 mm. (4) When the clump diameter was controlled at 0.45 mm by manipulating the mechanical stress in a 7 L fermentor, the yield of IA on DCW and yield of glucose on DCW were increased by 25.1% and 16.3%, respectively. The results presented in this study provide a potential approach for further enhancement of metabolite production by filamentous fungi.
Medium compositions for the hyperthermophilic archaeon, Thermococcus onnurineus NA1 was statistically optimized to enhance formate-driven hydrogen ($H_2$) production by using response surface methodology. From the Plackett-Burman design-based experiment, it was confirmed that among the minor components of medium such as KCl, $MgSO_4$, $NH_4Cl$, Cystein-HCl, trace elements, Fe-EDTA and $CaCl_2$, the trace elements were screened as the only positively effective components with respect to $H_2$ production. Subsequently, the optimal concentrations of the trace elements and the major components of a medium such as NaCl, yeast extract and sodium formate were determined from the five-level central composite design (CCD)-based experiment. The resulting quadratic model predicted the maximum $H_2$ production of 46.6 mmol/L in serum bottle and it was validated experimentally using the optimal medium initially supplemented with 26.70 g/L of NaCl, 9.81 g/L of sodium formate, 3.50 g/L of yeast extract and 4.59 mL/L of trace elements. From the duplicate batch cultivations in the fermentor using the optimized medium, the a maximum $H_2$ production rate up to 71.8 mmol/L/h could be obtained, which was a 65% enhanced value compared with that obtained using the control medium, showing the high efficiency of the optimized medium.
Aldehyde production by cells of a methanol utilizing yeast, Hansenula nonfermentans KYP-1 was improved when they were grown in a methanol-limited continuous culture, in comparison with cells grown in a batch culture. A higher cell yield was also obtained in continuous culture than in batch culture. This could be due to the fact that a lower methanol concentration was maintained in the jar fermentor to minimize growth inhibition by methanol. A maximum cell productivity of 0.219 g.$liter^{-1}.hr^{-l}$ and a cell yield of 47% were obtained at dilution rates of 0.1 $hr{-1}$ and 0.06 hr{-1}, respectively. The greatest amount of aldehyde was measured at a dilution rate of 0.08 $hr{-1}$. Under optimum reaction conditions, 915.7 mM of acetaldehyde was produced from 1.5 M ethanol after 21 hours reaction, with a conversion rate of 61%. Propionaldehyde and acrolein were produced with conversion rates of 32.7% and 44%, respectively.
Streptomyces themocyaneovio-laceus producing the thermostable xylanase was used for the production of xylooligosaccharides from xylan. The optimal conditions for the xylanase production were investigated in jar fermentor, which operated at 2 vvm aera-tion and 400 rpm agitation speed at $50^{\circ}C$ for 24 h. The optimal reaction condtion for the production of xylooli-gosaccharides with xylanases which were prepared by the percipitation with ammonium sulfate were obtained by the reaction at $60^{\circ}C$ for 12 h in the mixture composed of 10% birchwood xylan in 50 mM sodium phosphate buffer (pH 6.0)and 10 unit/ml of xylanase. In this optimal condition for the xylooligosaccharides production the mixture of xylooligosaccharides (58.8 g/I) which were composed of 20.1 g/I of xyobiose, 8.9 g/I of xylotriose 4.5 g/I of xylotetraose 16.2g/I of xylopentaose and 9.1 g/I xylohexaose and 5.0 g/I of xylose was produced from 100 g/I of birchwood xylan by the xylanases of S thermocyaneoviolaceus .
YUN, HYE SUN;DO YOUNG KIM;CHUNG WOOK CHUNG;HYUNG WOO KIM;YOUNG KI YANG;YOUNG HA RHEE
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.13
no.1
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pp.64-69
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2003
Pseudomonas chlororaphis HS21 was isolated from a soil sample and found to produce medium-chain-length polyhydroxyalkanoates (MCL-PHAs) using palm kernel oil (PKO) as the sole carbon source. Up to 3.3 g/1 dry cell weight containing $45\%$ MCL-PHA was produced, when the strain was grown for 21 h in a jar fermentor culture containing 5 g/1 PKO. The polymer produced from PKO consisted of unsaturated monomers of $7.3\%$ 3-hydroxy-5-cis-tetradecenoate and $2.3\%$ 3-hydroxy-5,8,-cis, cis-tetradecadienoate as well as saturated even-carbon number monomers ranging from $C_6\;to\;C_14$, as determined by GC and El GC/MS The PHA was a transparent, sticky material at room temperature. A differential scanning calorimetric analysis revealed that the polymer was amorphous with a $-44^{\circ}C$ glass transition temperature. The number average molecular weight and polydispersity index of the PHA were 83,000 and 1.53, respectively. Although the PHA was practically biodegradable, its degradability was lower than that of poly(3-hydroxyoctanoate) based on a comp:trison of the clear zones formed by growing PHA depolymerase-producing bacteria on an agar plate containing the respective polymers.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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