In this study, Bacillus licheniformis which has been used as probiotics was isolated from Korean traditional fermented soybean. A total of 69 strains were presumptively identified as B. licheniformis by phenotypic methods. Based on PCR amplification and 16S rRNA gene sequencing, the multilocus sequence typing of gyrA and rpoB, followed by phylogenetic analysis was performed. The isolates were distinctly differentiated and found to be closely related to B. amyloliquefaciens, B. subtilis, and B. aerius. The partial 16S rRNA gene sequences of those strains matched those of B. sonorensis (97%) and B. aerius (98%) in the phylogenetic tree. In contrast, multilocus phylogenetic analysis (MLPA) showed that only 61 (86.9%) out of 69 strains were B. licheniformis. The rest of those strains were found to be B. subtilis (5.8%), B. amyloliquefaciens (2.9%), and B. sonorensis (2.9%), respectively. Therefore, our results suggested that since the 16S rRNA gene sequencing alone was not sufficient to compare and discriminate closely related lineages of Bacillus spp., it was required to analyze the MLPA simultaneously to avoid any misleading phenotype-based grouping of these closely related species.
Obejectives : The purpose of this study is to find out the efficacy of pacemaker potentials of interstitial Cells of Cajal (ICC) by Fermented Lotus Root (FLR) in small intestine. Methods : Enzyme digestions were used to separate the ICC. Using electrophysiological methods, pacemaker potentials were measured and intestinal transit rates (ITR) experiments were conducted to identify in vivo gastrointestinal motility. Results : 1. FLR (0.5-10 mg/ml) caused membrane depolarization by electrophysiological methods. 2. In the case of pretreatment with a Ca2+ free solution and thapsigargin, the pacemaker potential disappeared and in this case, FLR did not have a membrane depolarization reaction. 3. Lowering the concentration of extracellular Na+ concentration stoped the pacemaker potentials and inhibited the reaction caused by FLR. Flufenamic acid also inhibited the reaction by FLR. 4. In mice, ITR was increased by FLR. Conclusions : This study shows that FLR can control ICC by an internal/external Ca2+ and Na+. It also shows that FLR can be a good candidate for gastrointestinal motility medication development.
To compare the medical efficacy of original Socheongyong-tang with fermented Socheongyong-tang, we've studied the two medicines according to the search for optimal bacteria and optimal conditions, component analysis, assessment of medical efficacy and toxicity, and have the result below. The results were obtained as follows: Considering bacterial growth, $CO_2$ gas emission and pH, we examined that using 3 kinds of bacteria(S. cerevisiae KCTC 7913, L. casei KCTC 3109, L. brevis KCTC 3102) is desirable. There is no main difference in optimum conditions between incubator and shaking incubator. And it is considered that ideal fermentation time is 2 days after vaccination. As the result of componential analysis of before and after fermentation, there's a noticeable decrease of total sugar and protein. But there's no alterations in total phenolics compounds and in total flavonoid compounds that influence on medical effect. The result was interpreted that it can promote the assimilation of herbal decoction after fermentation. As the result of medical efficacy assessment, we can check out that there is more anti-oxidating effects in fermented Socheongyong-tang, whereas anti-inflammatory effects and obesity-preventing effects were favorable in original Socheongyong-tang. And there is no main difference of whitening and COX-2 removing effects between before and after the fermentation. As a result of assessing weight change, hepatotoxicity and nephrotoxicity, we can not notice any unusual difference between before and after the fermentation. According to the results above, it is considered that we checked out the optimal bacteria and optimal conditions, advantages and disadvantages of the medical efficacy of original Socheongyong-tang and fermented Socheongyong-tang. And we suggest that there will have to be a following in-depth and systematic research on this subject in the future.
진주담치에 기본양념, 데리야끼 양념과 매실양념으로 제조한 젓갈 3종의 일반성분을 분석하여 비교한 결과 수분과 조단백은 데리야끼 양념, 회분은 기본양념, 조지방은 매실 양념이 다소 높았다. 식염함량은 기본양념이 가장 낮게 나타났다. 아미노산을 분석한 결과 구성 아미노산 중 glutamic acid가 모든 시료에서 가장 높은 함량을 보였으며, 총 아미노산 함량의 경우 기본양념 젓갈이 9,169.48 mg/100 g으로 가장 높았다. 주요 지방산은 포화지방산의 주체를 이룬 C16:0 (palmitic acid)가 대부분 많은 함량분포를 보였으며 첨가한 양념에 따라 지방산 조성에 따른 함량이 다소 달라지는 것을 알 수 있었다. 시료별 관능검사는 모든 측정 항목에서 매설양념과 데리야끼 양념 젓갈에서 높은 점수를 받았으며, 유의성은 없는 것으로 나타났다.
The effects of antlers have long been known in traditional Asian medicine. However, few studies have investigated the effects of antlers on immunity. In this study, we investigated whether fermented antler extract (FAE) has immunomodulatory effects on spleen cells. FAE enhanced the activity of spleen cells in a concentration dependent manner compared to antler extract. Interestingly, FAE significantly increased the production of interleukin-12, a representative cytokine of cell-mediated immunity, while it marginally increased that of tumor necrosis factor-alpha. Flow cytometry analysis demonstrated that FAE can protect spleen cells from spontaneous cell death without a significant proportional change in subsets, mainly lymphocytes. Taken together, the results of the present study showed that FAE has beneficial effects on spleen cells, a major type of immune cell, indicating that it can function as an immunomodulator without significant cytotoxicity. These data may broaden the use of FAE in basic research and clinical areas.
Objectives: We investigated about the microbial properties and changes in the efficacy of the Codonopsis lanceolata (CL) by natural fermentation. Methods: CL was fermented for four weeks in a well-ventilated place with 2.5% salt. pH, total sugar, total polyphenol, and total flavonoid were measured to determine fermentation characteristics according to fermentation period and salt treatment. Polymerase chain reaction denaturing gradient gel electrophoresis and random amplification of polymorphic DNA-polymerase chain reaction were carried out for microbial analysis during fermentation. In addition, HepG2 cell was cultured to check the lipid accumulation through oil red O staining and the glucose uptake was analyzed by measuring the 2-NBDG at C2C12 cell. Results: The pH level and the total sugar decreased with the CL fermentation. Total polyphenol and flavonoid increased after CL fermentation. It was confirmed that Leuconostoc mesenteroides were maintained continuously during fermentation. In the salt treatment CL, there was a sharp increase in Rahnella aquatilis. Lactobacillus plantarum matrix was observed in fermented CL. In addition, Lactococcus lactis, Weissella koreensis, R. aquatilis, L. plantarum, Leu. mesenteroides have been added to the salt treatment. Glucose uptake were significantly increased after fermentation with salt for four weeks. Lipid accumulation in the HepG2 cells was observed that there was difference (P<0.01) between free fatty acid group (100%) and decreased 4 weeks after fermentation (90.38%) at $800{\mu}g/mL$. Conclusions: Total polyphenol and flavonoid were increased after CL fermentation. Especially, percentage of the glucose uptake and lipid accumulation inhibition increased in CL fermentation with salt. It is expected that fermentation of salt treated CL will be more effective in diabetes and fatty liver.
Chungtaejeon is a traditional tea introduced in the age of the Three States and is the only "Don-cha" culture in the world that survived on the southwestern shore of Korea. To restore Chungtaejeon and to make the tea with consistent quality, the microorganisms involved in traditional type fermentation of Chungtaejeon were isolated, and the tea was prepared with high fermentation ability starters. The sensuous characteristics of Chungtaejeon were also examined. Only Bacilli were found in 3 and 5 year aged Chungtaejeon samples. The Lactobacilli were isolated from properly fermented kimchi and one of them showed high growth capability in media containing green tea extract and also showed strong antagonistic activity against methicillin-resistant Staphylococcus aureus, S. aureus, Salmonella, and E. coli. It was identified and named Lactobacillus plantarum CHO25. Chungtaejeon was fermented with a single starter of L. plantarum CHO25 and with a mixed starter (L. plantarum CHO25, Saccharomyces cerevisiae and Bacillus amyloliquefaciens CHO104). The single fermented sample had the highest cell growth after 5 days of inoculation and the level decreased slowly thereafter. The mixed fermented sample showed strong growth of S. cerevisiae. The highest hunter values were the a value of the single fermented sample and the b value of the mixed sample. The single fermented tea showed the best incense score.
Guibi-tang is a traditional medicine used for the treatment of colds. We investigated the levels of several compounds in Guibi-tang before and after fermentation with Lactobacillus and tested their ability to inhibit angiotensin-converting enzyme. Six known compounds (decursin, decursinol angelate, nodakenin, liquiritin, formononetin, and 6-gingerol) and 2 unidentified compounds were detected in Guibi-tang (GB) and fermented Guibi-tang (FGB) by an established HPLC-DAD method. The levels of the 6 known compounds were decreased after fermentation. FGB showed more potent inhibition of angiotensin-converting enzyme activity than GB. In conclusion, fermentation with Lactobacillus affects the content of several compounds in GB and improves its angiotensin-converting enzyme inhibitory activity.
Objectives: The purpose of this study was to examine the single dose toxicity with oral administration and genotoxicities of Ssanghwa-tang fermented with Lactobacillus acidophyllus. Materials and Methods: Clinical signs, weight changes, lethal doses$(LD_{50})$, and postmortem evaluation were determined by Globally Harmonized Classification System(GHCS) in a single-dose oral toxicity study. In vitro mammalian chromosomal aberration test was conducted with Ames test by cell proliferation suppression assessment using the cultivated CHO-K1(Chinese hamster ovary fibroblast) origins. Bacterial reversion assay was performed using Salmonella typhimurium (TA98, TA100, TA1535, and TA1537) and Escherichia coli (WP2uvrA). In vivo micronucleus test was performed using ICR mouse bone marrow. Results: No clinical sign was observed and none of the groups with doses up to 2000 mg/kg showed significant acute oral toxicity in the single dose oral administration. None of the sample doses taken during the 6 to 18 hour groups showed significant aberrant metaphases comparing to the negative control group in the in vitro mammalian chromosomal aberration test. No evidence of mutagenicity was seen for Escherichia coli (WP2uvrA) or Salmonella typhimurium (TA98, TA100, TA1535, and TA1537). No significant increase in the frequency of micronuclei was seen in the micronucleus test. Conclusion: These results indicate that the $LD_{50}$ value of Ssanghwa-Tang fermented with Lactobacillus acidophyllus may be over 2000 mg/kg and it have no acute oral toxicity and genotoxicity.
The purpose of this study is to investigate the effect of water extract from Artemisiae Argi Folium Fermented with Lactobacillus pentosus (AFL) on hydrogen peroxide production within human hepatocyte HepG2 cells treated with gallic acid, EtOH, nicotine, acetaminophen, and acetaldehyde. AFL (0~400 ug/mL) was treated with gallic acid, EtOH, nicotine, acetaminophen, and acetaldehyde. And the intracellular productions of hydrogen peroxide were measured by dihydrorhodamine 123 (DHR) assay. AFL showed the restoration of the intracellular productions of hydrogen peroxide which were reduced by gallic acid, EtOH, nicotine, acetaminophen, and acetaldehyde in HepG2 Cells. AFL could be supposed to have the hepatoprotective effect related with hepatocytologic signaling activity against gallic acid, EtOH, nicotine, acetaminophen, and acetaldehyde.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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