Zaky, Abdelrahman Saleh;Greetham, Darren;Louis, Edward J.;Tucker, Greg A.;Du, Chenyu
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.26
no.11
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pp.1891-1907
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2016
Yeasts that are present in marine environments have evolved to survive hostile environments that are characterized by high exogenous salt content, high concentrations of inhibitory compounds, and low soluble carbon and nitrogen levels. Therefore, yeasts isolated from marine environments could have interesting characteristics for industrial applications. However, the application of marine yeast in research or industry is currently very limited owing to the lack of a suitable isolation method. Current methods for isolation suffer from fungal interference and/or low number of yeast isolates. In this paper, an efficient and non-laborious isolation method has been developed and successfully isolated large numbers of yeasts without bacterial or fungal growth. The new method includes a three-cycle enrichment step followed by an isolation step and a confirmation step. Using this method, 116 marine yeast strains were isolated from 14 marine samples collected in the UK, Egypt, and the USA. These strains were further evaluated for the utilization of fermentable sugars (glucose, xylose, mannitol, and galactose) using a phenotypic microarray assay. Seventeen strains with higher sugar utilization capacity than the reference terrestrial yeast Saccharomyces cerevisiae NCYC 2592 were selected for identification by sequencing of the ITS and D1/D2 domains. These strains belonged to six species: S. cerevisiae, Candida tropicalis, Candida viswanathii, Wickerhamomyces anomalus, Candida glabrata, and Pichia kudriavzevii. The ability of these strains for improved sugar utilization using seawater-based media was confirmed and, therefore, they could potentially be utilized in fermentations using marine biomass in seawater media, particularly for the production of bioethanol and other biochemical products.
Kim, Kyung Min;Lim, Jaeho;Lee, Jae Jung;Hurh, Byung-Serk;Lee, Inhyung
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.27
no.2
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pp.251-261
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2017
Initially, we screened 18 Aspergillus sojae-like strains from Aspergillus spp. isolated from meju (Korean traditional fermented soybean brick) according to their morphological characteristics. Because members of Aspergillus section Flavi are often incorrectly identified because of their phylogenetic similarity, we re-identified these strains at the morphological and molecular genetic levels. Fourteen strains were finally identified as A. sojae. The isolates produced protease and ${\alpha}-amylase$ with ranges of 2.66-10.64 and 21.53-106.73 unit/g-initial dry substrate (U/g-IDS), respectively, which were equivalent to those of the koji (starter mold) strains employed to produce Japanese soy sauce. Among the isolates and Japanese koji strains, strains SMF 127 and SMF 131 had the highest leucine aminopeptidase (LAP) activities at 6.00 and 6.06 U/g-IDS, respectively. LAP plays an important role in flavor development because of the production of low-molecular-weight peptides that affect the taste and decrease bitterness. SMF 127 and SMF 131 appeared to be non-aflatoxigenic because of a termination point mutation in aflR and the lack of the polyketide synthase gene found in other A. sojae strains. In addition, SMF 127 and SMF 131 were not cyclopiazonic acid (CPA) producers because of the deletion of maoA, dmaT, and pks/nrps, which are involved in CPA biosynthesis. Therefore, A. sojae strains such as SMF 127 and SMF 131, which have high protease and LAP activities and are free of safety issues, can be considered good starters for soybean fermentations, such as in the production of the Korean fermented soybean products meju, doenjang, and ganjang.
This study is to investigate for obtaining the operating conditions of continuous vinegar production using fluidized bed reactor by Acetobacter aceti cell immobilized in Ca-alginate gel. The optimum conditions obtaining by batch fermentation using fluidized bed reactor were as follows; The fermentation temperature and aeration rate were 3$0^{\circ}C$ and 1.0VVM and the initial concentration of ethanol and acetic acid in medium were 33g/l and 27g/l respectively. The amount of bead used was 25%(w/v). The overall acetic acid productivities of batch fermentations by free cell and immobilized cell were 0.31g/l-hr and 0.48g/l-hr, respectively, at the final acetic acid concentration of 50g/l. In the continuous vinegar production using fluidized bed reactor by immobilized cell under optimum conditions, it was possible to produce 23g/l acetic acid continuously up to 90 days with maximum acetic acid productivity of 2.76g/l-hr at dilution rate 0.12hr-1.
Ethanol fermentations of inulin by K.fraglis in aqueous two-phase system of PEG/Dextran were performed not only to investigate the characteristics of partition of ethanol, sugar, and cell in the upper phase and the bottom phase but also to compare the fermentation properties with those of single phase system. In the range of 1 to 3 wt% of Dextran, ethanol fermentability and ethanol productivity reduced according to the increase of the molecular weight of PEG. But the cell yield and the cell productivity showed the opposite trend. In the region of 6 to 10 wt% of PEG, the increase of the concentration of PEG, caused the minute decrease of ethanol productivity but the remarkable augmentation of cell productivity. According to the increase of the molecular weight of PEG, the partition coefficient of inulin slightly decreased. But with the increment of the concentration of Dextran, the partition coefficient and the partition yield of inulin in the bottom Phase represented the trends of increase.
The influences of impeller types on morphology and protein expression were investigated in a submerged culture of Aspergillus oryzae. The impeller types strongly affected mycelial morphology and protein production in batch and fed-batch fermentations. Cells that were cultured by propeller agitation grew in the form of a pellet, whereas cells that were cultured by turbine agitation grew in a freely dispersed-hyphal manner and in a clumped form. Pellet-grown cells showed high levels of protein production for both the intracellularly heterologous protein (${\beta}$-glucuronidase) and the extracellularly homologous protein (${\alpha}$-amylase). The feeding mode of the carbon source also influenced the morphological distribution and protein expression in fed-batch fermentation of A. oryzae. Pulsed-feeding mainly showed high protein expression and homogeneous distribution of pellet whereas continuous feeding resulted in less protein expression and heterogeneous distribution with pellet and dispersed-hyphae. The pellet growth with propeller agitation paralleling with the pulsed-feeding of carbon source showed a high level of protein production in the submerged fed-batch fermentation of recombinant A. oryzae.
The biosynthesis of lovastatin, a cholesterol lowering agent formed by the filamentous fungus Aspergillus terreus, was examined in a 2.5 L jar fermenter. In batch bioreactor cultures conducted at various agitation rates, 400 rpm showed the best result in terms of lovastatin production. Notably, the effect of pH on lovastatin biosynthesis was found to be significant: when the pH was controlled at around 5.8 during the whole fermentation period, lovastatin concentration reached 598 mg/L, which is much hihger than the amounts obtained by pH-uncontrolled and pH 7.4-controlled fermentations. In addition, both L-histidine and L-tryptophan were observed to be favorable amino acids for the enhancement of lovastatin production when 6 g/L of the respective amino acids were supplemented at the beginning of the fermentation period. By further optimization of the production media and the physical environment, lovastatin production was increased to 836 mg/L (3.5 mg/L/hr) which is approximately 10 times higher than the productivity of the basic control culture.
Objective : The purpose of this study was to investigate the changes in the contents of constituents in Socheongryong-tang (CY) and its fermentations (FCY) with 10 species of lactic acid bacteria. Methods : Ten strains of lactic acid bacteria, Lactobacillus casei 127, L. acidophilus 128, L. casei 129, L. plantarum 144, L. amylophilus 161, L. curvatus 166, L. delbruekil subsp. lactis 442, L. casei 693, B. breve 744, and B. thermophilum 748, were used for the fermentation of Socheongryong-tang. The increased and decreased constituents were identified using HPLC/DAD and various liquid chromatographic techniques, and the structure was elucidated using NMR and MS. These compounds were quantitatively analyzed using an HPLC/DAD system. Results : The increased constituents were identified to be liquiritigenin (1) and cinnamyl alcohol (2), and the decreased constituent was determined to be liquiritin (3). Liquiritigenin (1) and cinnamyl alcohol (2) were increased in all of the FCYs, while liquiritin (3) was decreased. The fermentation of the ten lactic acid bacteria demonstrated that the decomposable rate of these three compounds in FCYs were different. Socheongryong-tang fermented by L. plantarum 144 and L. amylophilus 161 showed the most remarkable changes. Conclusions : CY could be increased antibacterial, neuroprotective, or antiinflammatory effect by fermentation with lactic acid bacteria, especially with L. plantarum and L. amylophilus, considering their known biological activities. In addition, it is expected that this study will help to establish quality control parameters for FCY.
The aim of this work was to establish the optimal conditions for production of carboxymethylcellulase (CMCase) by a newly isolated marine bacterium using response surface methodology (RSM). A microorganism producing CMCase, isolated from seawater, was identified as Cellulophaga lytica based 16S rDNA sequencing and the neighborjoining method. The optimal conditions of rice bran, ammonium chloride, and initial pH of the medium for cell growth were 100.0 g/l, 5.00 g/l, and 7.0, respectively, whereas those for production of CMCase were 79.9 g/l, 8.52 g/l, and 6.1. The optimal concentrations of $K_2HPO_4$, NaCl, $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, and $(NH_4)_2SO_4$ for cell growth were 6.25, 0.62, 0.28, and 0.42 g/l, respectively, whereas those for production of CMCase were 3.72, 0.54, 0.70, and 0.34 g/l. The optimal temperature for cell growth and the CMCase production by C. lytica LBH-14 were $35^{\circ}C$ and $25^{\circ}C$, respectively. The maximal production of CMCase under optimized condition for 3 days was 110.8 U/ml, which was 5.3 times higher than that before optimization. In this study, rice bran and ammonium chloride were developed as carbon and nitrogen sources for the production of CMCase by C. lytica LBH-14. The time for production of CMCase by a newly isolated marine bacterium with submerged fermentations reduced to 3 days, which resulted in enhanced productivity of CMCase and a decrease in its production cost.
Lactic acid bacteria (LAB) play an important role in dairy fermentations, notably as cheese starter cultures. During the cheese production and ripening period, various enzymes from milk, rennet, starter cultures, and non-starter LABs are involved in flavor formation pathways, including glycolysis, proteolysis, and lipolysis. Among these three pathways, starter LABs are particularly related to amino acid degradation, presumably as the origins of major flavor compounds. Therefore, we used several enzymes as major criteria for the selection of starter bacteria with flavor-forming ability. Lactococcus lactis subsp. lactis LDTM6802 and Lactococcus lactis subsp. cremoris LDTM6803, isolated from Korean raw milk and cucumber kimchi, were confirmed by using multiplex PCR and characterized as starter bacteria. The combinations of starter bacteria were validated in a miniature Gouda-type cheese model. The flavor compounds of the tested miniature cheeses were analyzed and profiled by using an electronic nose. Compared to commercial industrial cheese starters, selected starter bacteria showed lower pH, and more variety in their flavor profile. These results demonstrated that LDTM6802 and LDTM6803 as starter bacteria have potent starter properties with a characteristic flavor-forming ability in cheese.
Off-flavors and odors in fermented cucumbers result from the growth of undesirable microorganisms during the secondary fermentation. Under laboratory conditions using a sterile fermented cucumber slurry medium, the spoilage fermentations were reproduced. Using this system the salt and pH conditions that allow the spoilage to occur were determined by varying the NaCl concentration and pH of the slurry medium. At pH 3, no spoilage was observed, regardless of the salt concentration, while at pH 3.5, pH 4, and pH 4.5, spoilage occurred in the 0 and 2% NaCl samples. For pH 5.0 samples, spoilage products were seen for all NaCl treatments. Based on these results the Preservation Prediction Chart was developed. The Chart may be used for selection of proper pH value and salt concentration for long term storage of fermented cucumber.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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