Kim, Hyun-Joo;Sung, Nak-Yun;Yong, Hae In;Kim, Hanwool;Lim, Younggap;Ko, Kwang Hyun;Yun, Cheol-Heui;Jo, Cheorun
한국축산식품학회지
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제36권4호
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pp.494-498
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2016
Cold plasma has been developed to reduce microbial contamination and to improve safety of food and medical products. In addition, the technology can be used in the manufacture of sausages without addition of nitrite. To be applied in food industry commercially, the new technology should be safe and efficient. However, toxicological test of plasma-treated food is limited. Therefore, the purpose of this study was to determine the mutagenicity and immune toxicity of the meat products cured with plasma-treated water (PTW) as a nitrite source. Emulsion sausages were prepared with no nitrite (control), sodium nitrite (SCS), and PTW (SCP). For a mutagenicity test, the Ames test was performed with the sausage samples. For immune toxicity test, 8-wk-old female Balb/c mice were given free access to the sausages in order to evaluate the tumor necrosis factor (TNF)-α level. As a result, no mutagenicity was detected in the sausages by the Ames test. The serum TNF-α values were less than 10 pg/mL in mice after feeding control and treated samples for 32 d, indicating that no inflammatory response was occurred by feeding the sausages made by PTW. Therefore, the present study opens the possibility of using plasma-treated water as a nitrite source without any toxicity.
Objective: Zona pellucida (ZP) has been thought to be the barrier of egg to sperm penetration before and after fertilization. The phenomenon of ZP hardening has been considered as a post-fertilization event until now, and it is generally accepted that it is caused by the secretory products of cortical granules released during the cortical reaction. Hardening of ZP could occur "spontaneously" in mammalian oocytes in standard culture conditions, and that it is probably not a consequence of cortical reaction. The purpose of our study was to investigate the effect of human amniotic fluid (HAF) on nuclear maturation (NM) and fertilization ability of mouse immature oocytes. Methods: HAF was obtained from patients undergoing amniocentesis at $16{\sim}20$ weeks of gestation. HAF from five to ten patients was centrifuged and the supernatants was pooled. Cumulusenclosed mouse immature oocytes were incubated in the medium containing HAF, and examined to confirm NM and fertilization. Female ICR mice (about 3 weeks old) were stimulated with 7.5 IU PMSG. Immature oocytes were isolated at $48{\sim}52$ hrs post PMSG injection and cultured in TCM-199 supplemented with 20% HAF for 18 hrs. FBS was used as a control for the examination. Matured oocytes (MII) were fertilized with sperms collected from the epididymis of male mice (over 10 weeks old). Fertilization was in conducted T6 medium containing 15 mg/ml BSA, and confirmed at 6 hrs post-insemination. Fertilization rate was assessed in zona-intact or zona-free oocytes (denuded by trypsin). Evaluation of NM and fertilization was carried out by rapid staining method. ZP hardening was evaluated by incubating cumulus cell-free mature oocytes in 0.001% chymotrypsin at $37^{\circ}C$ for 10 min. Results: There was no significant difference between the effects of HAF (86.6%) and FBS (87.7%) supplements on NM of immature oocytes. When maturation medium was supplemented with HAF, total fertilization rates (7%) were significantly lower (p<0.01) than that of FBS (85.1%). In HAF group, fertilization rate was increased (p<0.01) in zona-free oocytes (7% versus 100%). The resistance of mouse oocyte ZP to digestion by chymotrypsin after maturation in vitro was significantly higher (p<0.01) in HAF group (86.7%) than in FBS (6.7%). To culture oocytes in FBS were very effective in preventing ZP hardening. However cultured oocytes in HAF showed high rate of ZP hardening (p<0.01). Conclusions: These results suggest that HAF can be used as a supplement for the NM of mouse immature oocytes in vitro. However, HAF induces spontaneous hardening of ZP of mouse immaure oocytes during maturation in vitro.
Purpose of the present study was to find the optimal culture conditions for the maturation and fertilization of immature oocytes by the use human body fluids and gonadotropins (Gn) in the mouse model. Cumulus-enclosed mouse immature oocytes were incubated in the medium containing various human body fluids with or without Gn in vitro, and examined to confirm nuclear maturation (NM) and fertilization. Female ICR mice were stimulated with 7.5 IU pregnant mares' serum gonadotropin (PMSG). Cumulus-enclosed immature oocytes were isolated at 48-52 hr post PMSG injection and cultured in TCM 199 supplemented with various concentrations (20, 50, and 70%) of human body fluids such as fetal cord serum (hCS), follicular fluid (hFF), peritoneal fluid (hPF) and amniotic fluid (hAF) in the presence or absence of 10 IU/ml PMSG and 10 IU/ml human chorionic gonadotropin (hCG) for 18 hr. Fetal calf serum (FCS) was used as a control for the supplements. Matured oocytes were fertilized with sperm collected from the epididymis of male mice. Fertilization was conducted in T6 medium containing 15 mgl ml bovine serum albumin, and confirmed at 6 hr post-insemination. Evaluation of nucler maturation and fertilization was carried out by rapid staining using fuchin. There was no significant difference between the effects of human body fluids and FCS supplements on nuclear maturation of cumulus enclosed mouse immature oocytes. When maturation medium was supplemented with 20% hPF or 20% hAF, fertilization rates were significantly (P<0.01) lower than that of 20% FCS, hCS and hFF groups. However, higher concentrations of body fluids during IVM were not more beneficial on fertilizability of oocytes. The addition of Gn significantly increased the fertilization rates in hPF and hAF groups (hPF without Gn; 51.5%, compared with 85.1% for addition of Gn, and hAF without Gn; 30.1% compared with 85.8% for addition of Gn) at 20% concentration. These results suggest that human body fluids at 20% concentration and gonadotropins can be used as supplements for the maturation of mouse immature oocytes in vitro. When gonadotropins supplemented with the human body fluids in the maturation medium, fertilizability of mouse immature oocytes was increased in hPF and hAF groups. These results can be applied to maturation of human immature oocytes in vitro.
본 연구는 초코아이스크림의 안전성을 확보하기 위해서 30 kGy 조사된 초코아이스크림을 ICR 마우스에 90일간 섭취시킨 다음 독성평가를 수행하였다. 비 조사 시료 및 30 kGy 조사 초코아이스크림을 암수 마우스에 투여를 한 결과 시험기간 동안 시험 물질에 의한 임상증상이나 폐사 동물을 나타나지 않았으며, 체중변화, 사료섭취량 및 주요 장기 무게도 대조군에 비해 차이를 보이지 않았다. 혈액학적 검사 및 혈청학적 검사 모두 정상적인 수치를 나타내었다. 병리조직학적 검사 역시 간 및 신장 모두 정상적인 구조를 유지하고 있었으며 염증, 괴사 등의 유의할만한 병적 변화도 관찰되지 않았다. 따라서 30 kGy로 감마선 조사된 초코아이스크림은 암수 마우스에 3개월간 섭취시켜도 본 시험조건에서 독성이 없는 것으로 판명되었다.
Purpose: The utility of 18-fluordesoxyglucose positron emission tomography ([18F]-FDG-PET) combined with computer tomography or magnetic resonance imaging (MRI) in gastric cancer remains controversial and a rationale for patient selection is desired. This study aims to establish a preclinical patient-derived xenograft (PDX) based [18F]-FDG-PET/MRI protocol for gastric cancer and compare different PDX models regarding tumor growth and FDG uptake. Materials and Methods: Female BALB/c nu/nu mice were implanted orthotopically and subcutaneously with gastric cancer PDX. [18F]-FDG-PET/MRI scanning protocol evaluation included different tumor sizes, FDG doses, scanning intervals, and organ-specific uptake. FDG avidity of similar PDX cases were compared between ortho- and heterotopic tumor implantation methods. Microscopic and immunohistochemical investigations were performed to confirm tumor growth and correlate the glycolysis markers glucose transporter 1 (GLUT1) and hexokinase 2 (HK2) with FDG uptake. Results: Organ-specific uptake analysis showed specific FDG avidity of the tumor tissue. Standard scanning protocol was determined to include 150 μCi FDG injection dose and scanning after one hour. Comparison of heterotopic and orthotopic implanted mice revealed a long growth interval for orthotopic models with a high uptake in similar PDX tissues. The H-score of GLUT1 and HK2 expression in tumor cells correlated with the measured maximal standardized uptake value values (GLUT1: Pearson r=0.743, P=0.009; HK2: Pearson r=0.605, P=0.049). Conclusions: This preclinical gastric cancer PDX based [18F]-FDG-PET/MRI protocol reveals tumor specific FDG uptake and shows correlation to glucose metabolic proteins. Our findings provide a PET/MRI PDX model that can be applicable for translational gastric cancer research.
Objective : Osteoporosis is a disease of unbalanced bone metabolism that results in low bone mineral density with increased bone fragility and propensity for fractures. The increased rate of bone fracture due to osteoporosis places a significant burden on public health care expenditures. Therefore, numerous studies have been designed and performed to identify the drugs or health foods that can improve the bone quality or quantity. This study was designed to evaluate and analyze the therapeutic effects of rutin on histomorphometric values of the spine and femur in an osteoporotic mouse model induced by bilateral ovariectomy. Methods : Thirty female ICR mice (8 weeks old) underwent either a sham operation (only abdominal incision, sham group, n=10) or bilateral ovariectomy (n=20). The ovariectomized (OVX) animals were randomly divided into two groups : untreated OVX group (OVX-C, n=10), or rutin-administered group (OVX-R, n=10). The OVX-C group received weight-adjusted doses of saline vehicle and the OVX-R group received 50 mg/kg of rutin intraperitoneally, starting 1 day after surgery. At 4 and 8 weeks after surgery, serum estrogen, osteocalcin, alkaline phosphatase (ALP), and the telopeptide fragment of type I collagen C-terminus (CTX-1) were analyzed. Interleukin (IL)-1β, IL-6, IL-10, and tumor necrosis factor (TNF)-α were also analyzed. Bone histomorphometric parameters of the 4th lumbar vertebra and femur were determined by micro-computed tomography. Results : In OVX-C group, ALP, osteocalcin, CTX-1, IL-1β, IL-6, and TNF-α levels were significantly increased at 4 and 8 weeks compared to sham operation group. Rutin administration after OVX statistically significantly reduced ALP, CTX-1, IL-1β, IL-6, and TNF-α levels at 4 and 8 weeks. Rutin administration also improves bone histomorphometric parameters including trabecular bone volume fraction, trabecular thickness, and trabecular number. Trabecular separation was also decreased in OVX-R group compared to OVX-C group. Conclusion : The present study demonstrated that rutin has therapeutic effects on improving bone histomorphometric values in an OVX mouse model. The improvement in histomorphometric values may be associated with the reduction of osteoclastic activity via inhibition of IL-1β, IL-6, and TNF-α. In future studies, the mechanism for the effect of rutin on osteoporosis should be demonstrated more clearly to use rutin in human osteoporosis.
본 연구에서 배아의 생식세포 동결에 가장 흔히 쓰이고 있는 두 가지 동결 보호제, 즉 DMSO와 EG의 독성을 비교하고자 생쥐 수정란 모델을 이용한 실험을 하였다. 생후 6주령의 암컷 생쥐 $F_1$ hybrid mice에 10 IU의 PMSG를 복강 주사하여 과배란을 유도하고, 2-세포기 배아를 획득하고 DMSO와 EG 각각 노출시킨 후, 배양을 하였다. 배반포의 전체 세포수는 2-세포기 단계에서 DMSO($68.1{\pm}24.1$)로 EG($81.2{\pm}27.0$) 혹은 control($99.0{\pm}18.3$)(p<0.001) 처리구에 비해서 유의적으로 낮았다. DMSO 처리구가 EG 처리구에 비해 세포수가 적었다. DMSO($15.4{\pm}1.5$)와 EG($10.2{\pm}1.4$) 두 처리구는 대조구($6.1{\pm}0.9$, p<0.0001)와 비교해서 배반포에서 세포사 비율이 더 높음을 확인했다. 또한, DMSO 처리구는 EG 처리구(p<0.001)보다 더 많은 세포사멸된 세포가 확인되었다. DMSO 또는 EG 처리군과 대조군 사이에는 배아 부화율에 있어서 차이가 있었으며, 이는 배아에 대한 동결 보호제의 잠재적인 독성을 확인한 결과였다. 이번 연구에서 장기간 처리했을 때 EG 처리군보다 DMSO 처리군에서 배아발달과 세포수가 저하된 것은 DMSO의 독성이 더 높을 것으로 사료된다.
The increasing prevalence of Toxoplasma gondii infection in the human population in the Republic of Korea (= Korea) is due to various reasons such as an increase in meat consumption. However, the importance of cats in transmitting T. gondii infection through oocysts to humans has seldom been assessed. A total of 300 fecal samples of stray cats captured around Seoul from June to August 2013 were examined for T. gondii B1 gene (indicating the presence of oocysts) using nested-PCR. Fourteen (4.7%) of 300 cats examined were positive for B1 gene. Female cats (7.5%) showed a higher prevalence than male cats (1.4%). Cats younger than 3 months (5.5%) showed a higher prevalence than cats (1.5%) older than 3 months. For laboratory passage of the positive samples, the fecal suspension (0.2 ml) of B1 gene positive cats was orally inoculated into experimental mice. Brain tissues of the mice were obtained after 40 days and examined for the presence of tissue cysts. Two isolates were successfully passaged (designated KNIH-1 and KNIH-2) and were molecularly analyzed using the SAG5D and SAG5E gene sequences. The SAG5D and SAG5E gene sequences showed high homologies with the ME49 strain (less virulent strain). The results indicated the importance of stray cats in transmitting T. gondii to humans in Korea, as revealed by detection of B1 gene in fecal samples. T. gondii isolates from cats were successfully passaged in the laboratory for the first time in Korea.
This experiment was undertaken to investigate the effect of administration of Agyoju or Mokhyang on the maintenance of pregnancy, delivery and sex ratio in the mice in different gestation periods. Adult female mice were administered orally at three different periods, from ovulation to implantation (Exp.1), from post-implantation to organogenesis (Exp.2), and from fetal growth to parturition (Exp.3). In Experiment 1, number of fetus implanted and mean body weight were not significantly different. However, the delivery of male offspring was significantly increased in Agyoju and Mokhyang administrated groups than control group. In Experiment 2, the number of fetuses implanted, live offsprins and their body weight at delivery were significantly increased in the Agyoju administered group than Mokhyang and control groups. In Experiment 3, the number of live offspring and sex ratio were not different in both treatments and control group. However, mean body weight at delivery was significantly increased in both treatment groups than that of control group. These results suggest that 1) Agyoju and Mokhyang have beneficial effects in maintenance of pregnacy, and that 2) The action of unknown component(s) in Agyoju may be related to selection of male spermatozoa for fertilization in vivo, and that 3) the administration of Agyju of Mojhyang during mid-and late-pregnance periods were shown the increment of body weight of live offspring without decrease of litter size.
본 연구에서는 비만 및 대사성증후군 위험 인자를 개선하기 위하여 한방원리를 활용한 조성물 KSH28을 구성하고 동물실험과 인체실험을 통한 효능 평가를 수행하였다. 동물실험에서는 4주령의 수컷 C57BL/6 마우스에게 30%고지방 식이를 급여하면서 4주간 KSH28을 경구 투여하였다. 4주후 체중과 복부의 부고환 및 신장후 지방조직은 KSH28에 의해 용량 의존적으로 의미있게 감소하였다. 또한 지방조직내의 지방세포 평균단면적이 KSH28에 의해 용량 의존적으로 감소하여 지방조직 억제 효과가 뚜렷함이 발견되었다. 공복시 혈당과 혈중 중성지방 농도는 KSH28에 의해 유의적으로 감소하였다. 인체실험에서는 40명 (남성 8명, 여성 32명 )의 피험자들이 KSH28을 포함한 생식 제품(30 g)을 하루 2포 4주간 복용하였다. 체중은 4주간 평균적으로 1.91 kg(남 2.05 kg, 여 1.87 kg)감소하여 주당 약 0.5 kg의 감소를 나타내었고 체성분 분석에서는 체지방이 1.77kg(남 2.69kg,여 1.56kg) 감소하여 체중감량 부분의 대부분을 차지하였다. 수분과 단백질, 근육, 무기질은 변화가 없었다. 여성에서 수축기 혈압, 확장기 혈압과 혈중 총콜레스테롤, LDL콜레스테롤이 모두 의미있게 감소하여 대사성증후군을 개선시킴이 관찰되었다. 간기능의 지표로 이용되는 GPT 수치에는 변화가 없었고 기타의 특별한 부작용은 발견되지 아니하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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