Marine Microorganism strain 96CJ10356 produced extracellular polysaccharide (EPS-R) accompanied with cell growth. To improve the production of EPS-R, the effect of aeration rate was tested in a 5-liter jar fermentor with STN medium. The production of EPS-R was increased with aeration rate and after 72 hour cultivation, 12.20 g/l of EPS-R was obtained with an aeration rate of 1.5 vvm and the apparent viscosity was measured to be about 1000 cp with culture broth.
The aim of this study was to transfer the 18.5 kb gene clusters coding for 17 genes from Lactobacillus rhamnosus to Lactococcus lactis subsp. cremoris MG1363 in order to determine the effect of host on exopolysaccharide (EPS) production and to provide a model for studying the phosphorylation of proteins which are proposed to be involved in EPS polymerization. Lactobacillus rhamnosus RW-9595M and ATCC 9595 have 99% identical operons coding for EPS biosynthesis, produced different amounts of EPS (543 vs 108 mg/l). L. lactis subsp. cremoris MG1363 transformed with the operons from RW-9595M and ATCC 9595 respectively, produced 326 and 302 mg/l EPS in M17 containing 0.5% glucose. The tyrosine protein kinase transmembrane modulator (Wzd) was proposed to participate in regulating chain elongation of EPS polymers by interacting with the tyrosine protein kinase Wze. While Wzd was found in phosphorylated form in the presence of the phosphorylated kinase (Wze), no phosphorylated proteins were detected when all nine tyrosines of Wzd were mutated to phenylalanine. Lactococcus lactis subsp. cremoris could produce higher amounts of EPS than other EPS-producing lactococci when expressing genes from L. rhamnosus. Phosphorylated Wzd was essential for the phosphorylation of Wze when expressed in vivo.
The aims of this novel work were to determine the microbial strains and exopolysaccharide (EPS) producers in water kefir from Nakhon Ratchasima Province, Thailand. Thirty-three microbial strains were identified using 16S rRNA gene analysis consisting of 18 bacterial strains, as 9 strains of acetic acid bacteria (AAB), 9 strains of lactic acid bacteria (LAB), and 15 yeast strains. All bacteria were able to produce EPS with a diverse appearance on agar media containing different sugars at a concentration of 8%. Culture supernatants from AAB and LAB showed 31-64% 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) scavenging activity with the highest antioxidant activity of 64% from Acetobacter pasteurianus WS3 and WS6. Crude EPS from A. pasteurianus WS3 displayed the highest ferric reducing antioxidant power at 280 mM $FeSO_4/g$ EPS, greatest anti-tyrosinase activity at 20.35%, and highest EPS production of 1,505 mg EPS/L from 8% sucrose. These microbes offer beneficial health implications and their EPSs can be used as food additives and cosmetic ingredients.
A screening was performed to isolate exoploysaccharide-producing microorganisms, which synthesized specific exopolysaccharide for the substitutive of commercial polysaccharides, from natural sources. Soil bacterium, one of 378 mucoid isolates, was finally selected as potential producer of polysaccharides which made the culture broth very viscous and thus examined in detail for optimal medium composition. Isolated strain was identified as Xanthomonas sp. EPS- 1 from the results of morphological and biochemical characteristics. The composition of optimal medium for exopolysaccharide production was as follows: 50 g sucrose, 1.5 g peptone, 2 g KH$_{2}$PO$_{4}$, 2 g MgSO$_{4}$, -7H$_{2}$O, 3 g NaCl, 0.05 g CaCO$_{3}$, 0.07 g FeSO$_{4}$-7H$_{2}$O and 0.05 g MnSO$_{4}$-7H$_{2}$O in 1 liter of distilled water. From the experiments of temperature and pH dependence, the optimal conditions for exopolysaccharide biosynthesis seemed to be 30$\circ$C and 8.0, respectively. About 14.9 gram of maximum exopolysaccharide per liter was obtained at the initial pH 8.0, 30$\circ$C and 250 rpm in a flask culture. The exopolysaccharide EPS-1 had such potential as an emulsifying agent and a gelling agent in comparision with commercial exopolysaccharide.
The present study focused on the production, characterization, and in vitro prebiotic evaluation of an exopolysaccharides (EPS) from Bacillus sonorensis MJM60135 isolated from ganjang (fermented soy sauce). Strain MJM60135 showed the highest production ($8.4{\pm}0.8g/l$) of EPSs compared with other isolates that were screened for EPS production based on ropy culture morphology. Furthermore, MJM60135 was cultured in 5 L of medium and the EPS was extracted by ethanol precipitation. The emulsification activity of the EPS was higher in toluene than in o-xylene. Fourier transform infrared spectroscopy analysis showed the presence of hydroxyl and carboxyl groups and glycosidic linkages. The isolated EPS contained mannose and glucose, as observed by thin-layer chromatography analysis of the EPS hydrolysate. Lactic acid bacteria (LAB) and pathogenic E. coli K99 and Salmonella enterica serovar Typhimurium were tested for their growth utilizing the EPS from B. sonorensis MJM60135 as the sole carbon source for its possible use as a prebiotic. All the tested LAB exhibited growth in the EPS-supplied medium compared with glucose as carbon source, whereas the pathogenic strains did not grow in the EPS-supplied medium. These findings indicate that the EPS from B. sonorensis MJM60135 has potential application in the bioremediation of hydrocarbons and could also be used as a prebiotic.
To isolate lactic acid bacteria having high exopolysaccharides (EPS) production ability, 50 strains were initially isolated from the sourdough. Twenty-one strains formed highly mucoid colonies on the sucrose agar medium, which are indicative of active EPS synthesis. DU-07, DU-10, DU-12, DU-19, and DU-21 produced $11.51{\pm}0.167$, $13.09{\pm}0.193$, $12.72{\pm}0.108$, $11.61{\pm}0.284$, and $13.32{\pm}0.094\;g/L$ EPS, respectively, in MRS medium. The isolated strains, DU-10, DU-12, and DU-21, were identified as Enterococcus flavescens, Enterococcus faecium, and Lactobacillus amylovorus, respectively, by using API 50CHL kit and determining partial sequences of their 16S rDNA. Especially, L. amylovorus DU-21 showed the highest production of EPS, as well as the highest inhibitory activities against pathogenic (p<0.05). Interestingly, the L. amylovorus DU-21 seem to be endemic to sourdough fermentations, as they have not been isolated from other environments.
The present study isolated seven different kinds of probiotics from various food sources and identified them with Bacillus sp. and Lactobacillus sp. by 16S rDNA sequencing. Their supernatants were prepared after a 24 hr culture, and their effects on nitric oxide (NO) production in mouse RAW 264.7 cells were investigated. Among the treated samples, the culture supernatants of two strains (Bacillus sp. FG-1 and Lactobacillus sp. FG-6) significantly decreased NO production in LPS-activated RAW 264.7 cells. Moreover, they dramatically reduced the expression of pro-inflammatory genes such as COX-2, iNOS, and TNF-α. To examine whether exopolysaccharide (EPS) is responsible for the anti-inflammatory effects of probiotics, EPS was purified from the culture supernatants of Bacillus sp. FG-1 and Lactobacillus sp. FG-6 strains. The EPS treatment produced by FG-1 and FG-6 strains decreased NO production in a dose-dependent manner in LPS-stimulated RAW 264.7 cells without affecting cell viability, while also reducing pro-inflammatory gene expression. Overall, these results suggest that EPS might be one of the key molecules responsible for the anti-inflammatory effects of probiotics.
The polysaccharide isolated from Phellinus species has been known as a folk remedy, including antitumor and immune-stimulating activities. However, there are lacks of knowledge about mycelial growth and exopolysaccharide (EH) production in its submerged culture. We investigated the optimal conditions on mycelial growth and EPS production in Phellinus baumii. The optimal temperature and initial pH for mycelial growth and EPS production in shake flask culture of P. baumii were proved to be 3$0^{\circ}C$ and pH 5.0, respectively. In case of carbon source, cellobiose and maltose were highly efficient for mycelial growth and fructose and mannitol were also relatively favorable for EPS production. Yeast extract was the most suitable nitrogen source for mycelial growth and EPS production. The composition of optimal culture medium was determined to be fructose 20 g/L, yeast extract 20 g/L, and $CaCl_2$ 0.55 g/L, respectively. Under the optimal culture condition, the maximum mycelial biomass and EPS achieved in a 5-L stirred-tank fermenter were 17.43 g/L and 3.6 g/L, respectively. It was found that the EPS was a glycoprotein onsisted of mainly arginine (14.1%) and glycine (12.0 %) in protein moiety and mainly mannose (48.7%) and arabinose (38.4%) in carbohydrate moiety.
Pilsung Kang;Sung Jin Kim;Ha Ju Park;Il Chan Kim;Se Jong Han;Joung Han Yim
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.34
no.5
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pp.1135-1145
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2024
When cells are exposed to freezing temperatures, high concentrations of cryoprotective agents (CPA) prevent ice crystal formation, thus enhancing cell survival. However, high concentrations of CPAs can also cause cell toxicity. Exopolysaccharides (EPSs) from polar marine environments exhibit lower toxicity and display effects similar to traditional CPA. In this study, we sought to address these issues by i) selecting strains that produce EPS with novel cryoprotective activity, and ii) optimizing culture conditions for EPS production. Sixty-six bacteria producing mucous substances were isolated from the Ross Sea (Antarctic Ocean) using solid marine agar plates. Among them, Pseudoalteromonas sp. RosPo-2 was ultimately selected based on the rheological properties of the produced EPS (p-CY02). Cryoprotective activity experiments demonstrated that p-CY02 exhibited significantly cryoprotective activity at a concentration of 0.8% (w/v) on mammalian cells (HaCaT). This activity was further improved when combined with various concentrations of dimethyl sulfoxide (DMSO) compared to using DMSO alone. Moreover, the survival rate of HaCaT cells treated with 5% (v/v) DMSO and 0.8% (w/v) p-CY02 was measured at 87.9 ± 2.8% after freezing treatment. This suggests that p-CY02 may be developed as a more effective, less toxic, and novel non-permeating CPA. To enhance the production of EPS with cryoprotective activity, Response Surface Methodology (RSM) was implemented, resulting in a 1.64-fold increase in production of EPS with cryoprotective activity.
An efficient method to produce water-soluble polysaccharides from Lentinus lepideus is described. The productivity of both endopolysaccharides (PPS) and exopolysaccharides (EPS) was compared under various culture conditions. The effect of treating their own PPS and EPS on immune cytokine production was also studied in relation to culture factors. High yield production of EPS required a moderate culture temperature $(25^{\circ}C)$ as well as long culture period (16-20 days). In contrast, PPS production required a high culture temperature $(30^{\circ}C)$ and short culture period (8 days). Most of the carbon sources did not affect polysaccharides and mycelial production except for sucrose. Immune cytokine levels in the EPS treatment varied among carbon sources or culture periods. PPS did not appear to affect much on the production of cytokines, regardless of the culturing factors, except for the culture period. These results suggest that the optimal culture conditions for L. lepideus vary according to culture purposes, and different culture conditions should be used for different targets including mycelial biomass, EPS, and PPS. Whereas the immunomodulating activitiy of EPS appeared to be affected by culture conditions in L. lepideus, that of PPS did not.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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