It has recently been suggested that the release of "endocrine disrupters (EDs)" into the environment has resulted in adverse health effects on wild life populations and humans (Golden et al., 1998; Tyler et al., 1998; Kang et al., 2000). Human sperm counts have declined significantly throughout the world during the past fifty years, and which is a significant public health concern (Carlsen et al., 1992; Carlsen et al.. 1995). In addition, the EDs persisting in the environment are known to disrupt the normal endocrine systems of wildlife (Colborn, 1995; Crewet al., 1995; Folmer et at, 1996; Sumpter, 1995; Tyler, 1998). Some estrogenic chemicals bind to estrogen receptors (Bolger et al.. 1998), interfere with the binding of physiological ligands to steroid hormone-binding proteins (Danjo, 1997; Milligan et al., 1998). and show immunotoxicity (Sakae et al., 1998). (omitted) (omitted)
한국응용약물학회 2003년도 Annual Meeting of KSAP : International Symposium on Pharmaceutical and Biomedical Sciences on Obesity
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pp.114-114
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2003
Ginseng is a medicinal herb widely used in Asian countries, and its pharmacological effects has been demonstrated in various systems such as cardiovascular, central nervous, and endocrine systems. Its effects are mainly attributed to the ginsenosides. We hypothesize that a component of Panax ginseng, ginsenoside-Rbl, acts by binding to estrogen receptor. We have investigated the estrogenic activity of ginsenoside-Rbl in a transient transfection system using estrogen receptors ${\alpha}$ or ${\beta}$ with estrogen -responsive luciferase plasmids in COS monkey kidney cells. Ginsenoside-Rbl activated both estrogen receptors ${\alpha}$ and ${\beta}$ in a dose-dependent manner (0.5 -100 M ). Activation was inhibited by the specific estrogen receptor antagonist ICI 182,780, indicating that the estrogenic effect of ginsenoside-Rbl is estrogen receptor dependent. Next, we evaluated the ability of ginsenoside-Rbl to induce estrogen-responsive progesterone receptor gene by semi-quantitative RT-PCR assays. MCF-7 cells treated with l7${\beta}$-estradiol or ginsenoside- Rb1 exhibited an increased expression of progesterone receptor mRNA. However, ginsenoside-Rbl failed to displace the specific binding of [3H]17${\beta}$-estradiol to estrogen receptor in MCF-7 cells as examined by whole cell ligand binding assays, suggesting that there is no direct interaction of ginsenoside-Rbl with estrogen receptor. Our results indicate that estrogen-like activity of ginsenoside-Rbl is independent of direct estrogen receptor association.
The key targets of endocrine disruptors are nuclear hormone receptors, which bind to steroid hormones and regulate their gene transcription. A yeast-based steroid hormone receptor gene trascription assay was previously developed for the evaluation of chemicals with endocrine modulating activity. The yeast transformants used in this assay contain the human estrogen receptor along with the appropriate steroid response elements upstream of the $\beta$-galactosidase reporter gene. We tried to evaluate several natural and synthetic steroids of their potential to interact directly with the steroid receptor. Some putative endocrine disruptors, including nonylphenol, are weakly estrogenic. But the combined treatment oj these chemicals with di-(2-ethylhexyl)phthalate (DEHP) significantly increased the $\beta$-galactosidase activity in the yeast transformant. These results suggest that we also have to consider the synergistic effects of endocrine disruptors. In this study, we showed that yeast-based bioassay is a valuable tool for screening potential endocrine disruptors and quantitative determination of estrogenicity. And the possibility that the estrogen receptor binds multiple environmental chemicals adds another level of complexity to the interaction between the endocrine disruptors and the human hormone system.
현재 국내 사용중이며 내분비계 장애추정농약으로 분류된 benomyl, carbaryl, endosulfan등 17종 농약에 대한 estrogen성 영향을 검색하기 위하여 인체난소암세포(BG1Luc4E2)를 이용한 luciferase assay를 수행하였으며, luciferase assay에서 Eeq를 산출한 후 내분비계 장애추정 농약의 에스트로겐성 영향에 대한 식이섭취 위험도 평가를 실시하였다. Estrogen 수용체 결합시험에서 cypermethrin, dicofol, endosulfan, esfenvalerate 및 fenvalerate가 $10^{-5}$ M에서 최고 영향이 관찰되었고, mancozeb 등 8종 농약은 약한 영향이 관찰되었으며, benomyl 등 나머지 4종 농약은 영향이 없었다. 이들 중 활성이 비교적 강한 dicofol 및 endoeulfan의 1 nmol 17 $\beta$-estradiol에 대한 RLP 와 RLU는 dicofol의 경우 $10^{-5}$ 및 56%이었구, endosulfan은 $10^{-5}$ 및 72%이었다. MRL을 이용한 식이섭취 위험도 평가 결과 농약들의 추청 1일 최대농약섭취량은 cypermethrin 0.667, dicofol 0.1462, endosulfan 0.2066 및 lenvalerate/esfenvalerate 0.2098 mg/person으로 총 추정 1일 최대 농약섭취량이 1.2298 mg/person이었고, 남성 혈중 에스트로겐 증가 농도는 3.075 ng/L로 정상농도에 비해 15%정도 증가하였으나, 국내 모니터링 성적을 기준으로 평가한 결과 남성혈중 에스트로겐 증가 농도는 0.01938 ng/L로 정상농도에 비해 0.09693%정도 증가하였다.
Background: A typical sewage treatment plant is designed for organic and nutrient removal from municipal sewage water and not targeted to eliminate micropollutants such as pesticides, pharmaceuticals, and nano-sized metals which become a big concern for sustainable human and ecological system and are mainly discharged from sewage treatment plant. Therefore, despite contaminant removal by wastewater treatment processes, there are still remaining environmental risks by untreated pollutants in STP (sewage treatment plant) effluents. This study performed aquatic toxicity tests of raw wastewater and treated effluents in two sewage treatment plants to evaluate toxicity reduction by wastewater treatment process and analyze concentration of contaminants to reveal potential toxic factors in STP effluents. Methods: Water samples were collected from each treatment steps of two STPs, and acute and chronic toxicity tests were conducted following USEPA (United States Environmental Protection Agency) and OECD (Organization for Economic Cooperation and Development) guidelines. Endpoints were immobility for mortality and reproduction effect for estrogenicity. Results: Acute $EC_{50}s$ (median effective concentration) of influents for Seungki (SK) and Jungnang (JN) STPs are $54.13{\pm}32.64%$ and $30.38{\pm}24.96%$, respectively, and reduced to $96.49{\pm}7.84%$ and 100%. Acute toxicity reduction was clearly correlated with SS (suspended solids) concentration because of filter feeding characteristics of test organisms. Chronic toxicity tests revealed that lethal effect was reduced and low concentration of influents showed higher number of neonates. However, toxicity reduction was not related to nutrient removal. Fecundity effect positively increased in treated wastewater compared to that in raw wastewater, and no significant differences were observed compared to the control group in JN final effluent implying potential effects of estrogenic compounds in the STP effluents. Conclusions: Conventional wastewater treatment process reduced some organics and nutritional compounds from wastewater, and it results in toxicity reduction in lethal effect and positive reproductive effect but not showing correlation. Unknown estrogenic compounds could be a reason causing the increase of brood size. This study suggests that pharmaceutical residues and nanoparticles in STP effluents are one of the major micropollutants and underline as one of estrogenic effect factors.
The in vitro effect of bisphenol A (BPA) on ovarian steroidogenesis of the longchin goby (Chasmichthys dolichognathus) was investigated. Oocytes taken during the maturing phase (vitellogenic, fully vitellogenic or germinal vesicle breakdown stage) were incubated with BPA (100 ng/mL) in the presence of exogenous precursor $^{3}H-17\alpha\;hydroxyprogesterone\;(^{3}H-17\alphaOHP).$ Steroids were extracted from the media and the isolated oocytes, and the extracts were separated and identified by thin layer chromatography and gas chromatography-mass spectrometry. The identities of the major metabolites were progestogens $[17{\alpha}-hydroxy,20{\alpha}-dihydroprogesterone\;(17{\alpha}20{\alpha}OHP)\;and\;17{\alpha}-hydrxy,20{\beta}-dihydroprogesterone\;(17{\alpha}20{\beta}OHP),$ androgens [androstenedione (A4) and testosterone (T)] and estrogens [estrone $(E_1)\;and\;estradiol-17{\beta}(E_2)].$ BPA treatment inhibited production of estrogens in all the maturing phases and progestogens in the germinal vesicle migrating stage. Percentage yield of estrogens was decreased with increased yield of androgens. In conclusion, BPA had an inhibitory effect on the conversion of $^3H-17\alphaOHP$ to estrogens and progestogens. These results demonstrate that BPA can act either estrogenic or anti-estrogenic effects.
Synthetic pyrethroids are analysis of a natural chemical moiety, pyrethrin derived from the pyrethrum plant Chrysanthemum. The natural pyrethrin structure has been modified to be highly lipophilic and photostable, creating an effective pesticide and resulting in an increased presence in the environment. Worldwide, they are commonly used insecticides against ticks, mites, mosquitoes, and as treatment for human head lice and scabies. Therefore, human exposure to their compounds in extensive. Several studies on the effects of pyrethroids on thyroid hormone regulation, estrogen and androgen function have been reported and yet little has been done try assess their potential hormonal activities. Among humans, a pyrethroid compound was suggested to be the causal agent for gynecomastia in a group of Haitian men. The reports suggest that some pyrethroid compounds are capable of disrupting endocrine function. Therefore, we examined estrogenic/antiestrogenic potential of three pyrethroid insecticides, that is permethrin, allethrin and fenvalerate in human breast cancer cell and action mechanism mediated by the estrogen receptor. Fenvalerate showed weak estrogenic activity but aallethrin and permethrin showed no effect. In combination with high levels (10$^{-10}$ M, 10$^{-11}$ M) of 17$\beta$-estradiol and three synthetic pyrethroids inhibited cert proliferations in MCF7-BUS cell by 17$\beta$-estradiol. Whereas, fenvalerate increased cell proliferative activity at lower level of estradiol (10$^{-12}$ M, 10$^{-13}$ M). The relative affinities to the estrogen receptor were observed by allethrin and permethrin treatment, but not by fenvalerate. These results indicated that some of pyrethroid insecticides may modulate estrogen functions in human breast cancer cell. The action mechanisms of estrogen receptor mediated antiestrogenicity by allethrin and permethrin were postulated.
Park, Chang-Beom;Kim, Byung-Ho;Na, Oh-Soo;Choi, Young-Chan;Lee, Young-Don;Baek, Hae-Ja;Kim, Hyung-Bae;Akihiro Takemura
Animal cells and systems
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제7권3호
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pp.227-235
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2003
Bisphenol A (BPA), nonylphenol (NP), and 4-tert-octylphenol (OP) are known endocrine disrupting chemicals (EDCs) with estrogenic activity in fish. This study compared the effects of BPA, NP and OP on in vitro vitellogenin (VTG) synthesis in primary cultures of hepatocytes of the Chinese minnow Phoxinus oxycephalus. The VTG secreted into the culture medium was measured using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), which we developed in this study using an antibody prepared from homogenates of Chinese minnow egg. VTG synthesis was induced by estradiol-17$\beta$ ($E_2$) and phenols (BPA, NP and OP) treatment. $E_2$ at concentrations of 10$^{-6}$ M or higher increased VTG levels significantly (P < 0.05). Exposure to 10^5\;M\;BPA\;or\;10^-4$M NP and OPinduced in vitro VTG synthesis (P < 0.01). However, $10^-3$ M BPA, NP or OP did not induce VTG synthesis. These results suggest that SPA has the highest estrogenic potential in Chinese minnow hepatocytes. Tamoxifen, an anti-estrogen, drastically blocked the production of VTG by phenols (BPA, NP and OP) suggesting that phenols (BPA, NP and OP) may act via binding to estrogen receptor (ER) in Chinese minnow hepatocytes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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