The effects of soy-isoflavones, which are phytoestrogens derived from plants with a flavonoid structure, on cyclooxygenase -2 (COX-2) expression, PGE2 production, and mapkinases expression, were investigated in experimentally-induced atherogenic rats by feeding a high fat-high cholesterol diet. Female Sprague-Dawley rats were bilaterally ovariectomized; sham-operated animals were used as controls. Three weeks later, the animals were randomized to the following treatments for an eight-week experimental period: 17$\beta$-estradiol (200$\mu$ g/kg diet), low concentration of isoflavones (0.8g/kg diet), and high concentration of isoflavones (4.0g/kg diet). In the group supplemented with a high dose of isoflavones, COX-2 expression was down-regulated. This down-regulation was accompanied by a reduced expression of pERK1/2. In the second experiment using 48-week old female Sprague-Dawly rats, the effects of isoflavones and estrogen were compared in the basal estrogen-supplementation at the level of 600$\mu$ g/kg diet. Isoflavones induced the marked down-regulation of COX-2 protein and the decrease in $PGE_2$ production in estrogen supplemented states and this was followed by the down-regulation of p38 among mapkinases. The two different mapkinases are involved in the down-regulation of COX-2 depending on estrogen-deficient and estrogen supplemented states. This kind of COX-2 down-regulation by isoflavones was not observed in the different tissue, mammary glands. Further investigations on the relationship between COX-2 and biological activities such as vasodilation by isoflavonesin the absence or the presence of estrogen ave required in vivo system of female rats.
Objective : Although chronic non-bacterial prostatitis is a common disease, it is very difficult to treat effectively. GLS (Gleditsiae Spina) has traditionally been used in treatment of urinary tract inflammation and voiding disturbance. In this study, we investigated the therapeutic effects and action mechanism of GLS in the rat model of non-bacterial prostatitis induced by castration and testosterone treatment. Method : We observed four experimental objects of normal group, control group, testosterone group, and GLS group. Rats were treated with 17$\beta$-estradiol after castration for induction of experimental non-bacteral prostatitis, which is similar to human chronic prostatitis in histophatological profiles. GLS and testosterone were administered as an experimental specimen and a positive control, respectively. The prostates were evaluated by histopahological parameters including the epithelial score and epithelio-stromal ratio for glandular damage. Also, the prostates were observed by hematological alterations of WBC, RBC, hemoglobin, hematocrit and platelet. Results : While prostates of control rats revealed severe acinar gland atrophy and stromal proliferation, the rats treated with GLS showed a diminished range of tissue damage. Epithelial score was improved in GLS over that of the control. The epithelial-stromal ratio was lower in GLS when compared to that of the control. Conclusion : These findings suggest that GLS may protect the glandular epithelial cells. We concluded that GLS could be a useful remedy agent for treating chronic non-bacterial prostatitis.
Licorice (Glycyrrhiza uralensis) contains several compounds that have been reported to alleviate menopausal symptoms via interacting with estrogen receptors (ERs). The compounds exist mainly in the form of glycosides, which exhibit low bioavailability and function. To bioconvert liquiritin and isoliquiritin, the major estrogenic compounds, to the corresponding deglycosylated liquiritigenin and isoliquiritigenin, respectively, licorice was fermented with Monascus, which has been demonstrated to deglycosylate other substances. The contents of liquiritigenin and isoliquiritigenin in Monascus-fermented licorice increased by 10.46-fold (from 38.03 μM to 379.75 μM) and 12.50-fold (from 5.53 μM to 69.14 μM), respectively, compared with their contents in non-fermented licorice. Monascus-fermented licorice exhibited 82.5% of the ERβ binding activity of that observed in the positive control (17 β-estradiol), whereas the non-fermented licorice exhibited 54.1% of the binding activity in an in vivo ER binding assay. The increase in the ERβ binding activity was associated with increases in liquiritigenin and isoliquiritigenin contents. Liquiritigenin acts as a selective ligand for ERβ, which alleviates menopausal symptoms with fewer side effects, such as heart disease and hypertension, compared with a ligand for ERα. In addition, Monascus-fermented licorice contained 731 mg/kg of monacolin K, one of the metabolites produced by Monascus that reduces serum cholesterol. Therefore, Monascus-fermented licorice is a promising material for the prevention and treatment of menopausal syndrome with fewer side effects.
Park, Yong-Soo;Yang, Jae-Hyuk;Cho, Young-Jae;Oh, Dong-Yep;Cho, Gil-Jae
Journal of Embryo Transfer
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v.32
no.2
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pp.59-64
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2017
Embryo transfer (ET) could be a relevant tool for genetic improvement programs in horses similar to those already underway in other species and produce multiple foals from the same mare in one breeding season. However, there have been no reports describing equine embryo transfer performed in Korea. In the present study, we performed an equine embryo collection and transfer procedure for the first time. We examined the embryo collection and pregnancy, size of embryo during the incubation period after collection, and progesterone (P4) and estradiol-$17{\beta}$ (E2) concentrations in mare's serum at embryo collection and transfer. A total of 16 donors responded to estrus synchronization; estrus was induced in 12 donors and 4 recipients, and artificial insemination was successful in 10 donors and six blastocysts were collected from donors. Of these blastocysts, we monitored the size of blastocysts for 3 day during incubation and transferred 2 blastocysts to a recipient, with 1 successful pregnancy and foal achieved. The dimensions of equine embryo at day 7 to day 9 were $409{\mu}m$, $814{\mu}m$ and $1,200{\mu}m$. The serum P4 and E2 concentrations were $7.91{\pm}0.37ng/{\mu}L$ and $45.45{\pm}12.65ng/{\mu}L$ in the donor mare, and 1$6.06{\pm}3.27ng/{\mu}L$ and $49.13{\pm}10.09ng/{\mu}L$ in the recipient mare.
Bovine oocytes with compact and complete cumulus cells were cultured for up to 24h in TCM199 buffered with 25mmol/l hepes and supplemented with 10% FBS (fetal bovine serum), 1mg/ml $17{\beta}$-estradiol, 20IU/ml hCG(human chorionic gonadotropin). All of the oocytes were divided into at 6 groups depending upon incubation times (control, 0 hour, 6 hours, 12 hours, 16 hours, 18 hours). To all experimental media, $200{\mu}g/ml$ puromycin was added at different incubation times mentioned above. Following these culture times, in vitro insemination was conducted with frozen-thawed bovine spermatozoa in medium BO (Brackett and Oliphant medium for in vitro insemination) with $10{\mu}g/ml$ BSA(bovine serum albumin) and 10 mg/ml heparin added. After 22h culture, the oocytes were fixed with acetic alcohol solution and stained with orcein acetic solution to evaluate sperm nuclear progression. Addition of puromycin after 0, 6 and 12 h of culture resulted in near of oocyte maturation at the M1 stage. Contrariwise, puromycin addition after 12 h of culture led to restoration of nuclear progression to M2 stage. On the one hand, puromycin affected the synthesis of Cyclin B protein that may be involved in the oocyte maturation and sperm capacitation for in vitro fertilization. The present study suggests the participation of protein synthesis, cyclin B, in the oocyte development from M1 to M2 stages in vitro.
The purpose of the present study was to produce live offspring from in vitro fertilized goat embryos. Oocytes were collected from abattoir ovaries and kept in oocyte collection medium. Oocytes were washed 4-5 times with maturation medium containing medium-199 with 5 ${\mu}g/ml$ FSH, 100 ${\mu}g/ml$ LH, 1 ${\mu}g/ml$ estradiol-$17{\beta}$ 50 ${\mu}g/ml$ gentamycin, 10% inactivated estrus goat serum, and 3% BSA (fatty acid free). Oocytes were placed in 100 ${\mu}l$ drops of maturation medium containing granulosa cell monolayer and incubated in a 5% $CO_2$ incubator at $38.5^{\circ}C$ for 27 h. For capacitation of spermatozoa fresh semen was processed and mixed in 3 ml fertilization TALP medium containing 50 ${\mu}g/ml$ heparin and kept in the above incubator for 2 h. The capacitated spermatozoa were coincubated with matured oocytes for fertilization. Cleaved embryos were separated and cultured in embryo development medium with oviductal cells and 494 embryos were produced. Recipient goats were synchronized with two injections of 15 mg $PGF_{{2}{\alpha}}$/goat 10 days apart. Eighty early stage embryos were transferred into the uterotubal junction of 14 surrogate mothers using laparoscopy techniques. One recipient delivered twin kids, whereas another two recipients each.delivered a single kid The parentage of these kids was evaluated using highly polymorphic co-dominant microsatellites markers. From the present study, it was concluded that live goat kids can be produced from in vitro matured and fertilized goat embryos, to the best of our knowledge for the first time in India.
We have a cultured method to grow rat mammary epithelial cells (RMEC) for 1 to 14 days in 1:1 mixture of Dulbecco's Modified Eagle Medium: Nutrient and F-12 (DMEM/F-12) containing 10% fetal bovine serum (FBS), human EGF, insulin, hydrocortisone, human transferrin and $17{\beta}$-estradiol in vitro. We were able to isolate and distinguish two cell types, luminal epithelial cells and myoepithelial cells, from primary clutures of RMEC. Immunocytochemical stains were used to distingusih luminal epithelial cells and myoepithelial cells. Peanut lectin (PNA) was stained in most alveolar epithelail cells and luminal epithelial cells of rats, while Thy-1.1, a maker of potential rat mammary myoepithelial cells, was expressed in myoepithelial cells in the rat. Also, we examined the expression patterns of three types of gap junction proteins, connexin 26 ($C{\times}26$), connexins 32 ($C{\times}32$) and connexin 43 ($C{\times}43$) by immunocytochemistry and western blot analysis. In the cell types, the results show that at the early stage of culture, luminal epithelial cells were increased and these cells were surrounded by myoepithelial cells. At the late stage of culture, luminal epithelial cells were decreased, in contrast myoepithelial cells were increased. In the expression pattern of gap junction, $C{\times}26$ maintained it's expression until day 3, but afterwards gradually decreased in intensity. Expression of $C{\times}32$ remained until day 5, then decreased slightly. $C{\times}43$ gradually increased untill the middle time of culture then decreased in intensity. These results suggest that connexins may be important for the control of growth in rat mammary epithelial cell types.
In this study, as preliminary research for the development of natural estrogen supplement the chemical properties of Iranian black pomegranate juice concentrate and seeds were evaluated. Proximate compositions of pomegranate juice concentrate and seeds were as follows; crude lipid 0.4% and 8.2%, moisture 39.9% and 6.6%, crude protein 0.9% and 12.2%, ash 1.4% and 1.7%, and carbohydrate 42.0% and 84.5% respectively. Major amino acids are glutamic acid (1310.0ppm) and aspartic acid (896.2ppm) in juice concentrate, and glycine (611.1ppm) and arginin (401.6ppm) in seeds. Ascorbic acid has the highest concentration of 20.0mg/l00g in juice concentrate and 0.23mg/l00 in seeds. The compositions of unsaturated fatty acids such as linoleic acid and linolenic acid were higher than those of saturated fatty acids such as stearic palmitic acid. Major minerals were potassium, calcium and sodium, potassium was highest in both juice concentrate and seeds. Vitamins were composed of ascorbic acid (20.0mg/l00g), vitamin B$_1$(0.12mg/100g) and niacin (0.80mg/l00g) in juice concentrate, and only ascorbic acid(0.23mg/l00g) in seeds. Organic acids such as citric and L-malic acid were detected only in pomegranate juice concentrate. The contents of total polyphenols were 4.55g/L in juice concentrate and 3.5mg/l00g in seeds, respectively. Phytoestrogens detected in pomegranate juice concentrate and seeds were daidzein, quercetin, genistein and 17 $\beta$-estradiol.
Background : Although chronic non-bacterial prostatitis is increasing, it is hard to treat effectively. In western medicine, antimicrobials drug, ${\alpha}$-adreno-ceptor antagonists, anti-inflammatory drugs, tricyclic antidepressants and anticholinergic agents are used commonly, but chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndromes is confusing and frustrating for urologist. IDS(Indongsoyeom-bang) is used in treatment of chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndromes. And it is reported that GLS(Gleditsiae spina) and TOF(Toosendan fructus) components of IDS have significant effect on protection of the glandular epithelial cells. Objective : In this study was conducted to investigate the therapeutic effects and action machanism of IDS in the rat model of non-bacterial prostatitis induced by castration and testosterone treatment. Methods : We observed six experimental objects of normal group, control group, testosterone group, and IDS 50 mg/kg, 200mg/kg, 400mg/kg group. Rats were treated with 17 ${\beta}$-estradiol after castration for induction of experimental non-bacterial prostatitis, which is similar to human chronic prostatitis in histophatological profiles. IDS and testosterone were administered as an experimental specimen and a positive control, respectively. The prostates were evaluated by histological parameters including the epithelial score and epithelio-stromal ratio for glandular damage. Also, the prostates were observed by Hematological alterations of WBC, RBC, hemoglobin and platelet. Results : While prostates of control rats revealed severe acinar gland atrophy and stromal proliferation, the rats treated with IDS-50 showed a diminished range of the tissue damage. Epithelial score was improved in IDS than that of the control. The epithelio-stromal ratio was lower in IDS when compared to that of the control. Also, the examination of bloods were not observed hematological change. Conclusion : These finding suggests that IDS may protects the glandular epithelial cells. We concluded that IDS could be a useful remedy agent for treating chronic non-bacterial prostatitis.
Lim, Seul Ki;Kim, Dong Il;Park, Min Jung;Choi, Joo Hee;Kim, Young Kuk;Lee, An Chul;Choi, Mi Young;Park, Soo Hyun
Biomedical Science Letters
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v.20
no.3
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pp.156-161
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2014
It has been reported that safflower seeds have preventive effects against osteoporosis. Recently, safflower buds (SB) were found to have more useful functional ingredients than safflower seeds. In the current study, we evaluated the anti-osteoporosis effects of SB diet in ovariectomized (OVX) rats. The rats were divided into five groups; sham operated group, OVX alone group, OVX plus $17{\beta}$-estradiol ($E^2$$10{\mu}g/kg$, i.p.) and OVX plus SB diet feeding group (0.3% or 1%). Feeding of SB diet (0.3% or 1%) to OVX rats markedly increased bone mineral density (BMD) of femurs, compared to the OVX group. The OVX rats exhibited a marked increase in trabecular separation (Tb.Sp) and this change was inhibited by the feeding of SB diet, similar to that seen with OVX+E2 group. Moreover, feeding of SB diet to OVX rats decreased the markers of bone turnover, including osteocalcin and alkaline phosphatase (ALP). These results suggest that SB extract has a bone sparing effect in OVX-induced trabecular bone loss and prevents deterioration of bone microarchitecture by suppressing the rate of bone turnover. Therefore, SB may be useful for preserving bone mass and structure in estrogen deficient women with a potential role in reducing postmenopausal osteoporosis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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