Polyphenol oxidase was purified from acetone powder extract of the root of Ixeris sonchifolia. The enzyme obtained by ammonium sulfate fractionation and sephadex G-200 gelfiltration gave 51-fold purification over the crude extract. The purified enzyme showed activity toward chlorogenic acid, caffeic acid and pyrocatechol. The kinetics of thermal inactivation of the enzyme followed first-order reaction. Potassium cyanide and cysteine were potent inhibitors.
Exodextranase from Aspergillus ustus was purified by chromatography and characterized by various conditions. The optimal pH of the purified dextranase was 6.5 and this enzyme was maximally activated at $40^{\circ}C$. The enzyme was stable at the temperature below $50^{\circ}C$. The enzyme was markedly inactivated by $Hg^{2+},\;Cu^{2+},\;KCN\;and\;Co^{2+},\;but\;Ba^{2+},\;Fe^{2+},$ cysteine, EDTA, and ascorbic acid enhanced the activity of the enzyme. The main products from the hydrolysis of dextran incubated with the dextranase were glucose, isomaltotriose and oligosaccharide. When dextran was incubated with the mixture of pullulanase and ${\alpha}-amylase$, it was hydrolyzed into glucose, isomaltose and oligosaccharide. Polysaccharides in the decade teeth powder were hydrolyzed by the dextranase into glucose, isomaltotriose and oligosaccharides. In the hydrolysis of the teeth powder with the mixture of dextranase, pullulanase and ${\alpha}-amylase$, were proved to be similar to the dextran hydrolysates.
This study was designed to investigate the effect of silkworm (Bombyx mori L.) powder on lipofuscin, acetylcholine (ACh) and its related enzyme activities in brain of rats. Sprague-Dawley (SD) male rats ($160{\pm}10g$) were fed basic diet (control group), and experimental diets (SWP-200 and SWP-400 groups) added 200 and 400 mg/kg BW/day for 6 weeks. In case of liver membranes, lipofuscin (LF) levels resulted in a slight decreases (4.6% and 11.5%, respectively) in SWP-200 and SWP-400 groups compared with control group. But in case of barin as the most sensitive organ, LF levels were remarkably inhibited about 16.7% and 20.0% in SWP-200 and SWP-400 groups compared with control group. There were no significant differences in acetylcholine (ACh) syntheses as a very important neurotransmitter, and choline acetyltransferase (ChAT) activities as a synthesis enzyme of ACh, and acetylcholinesterase (AChE) activities as a hydrolysis enzyme, which were concerned in transmission of neuron through synapses in brain of SWP-200 and SWP-400 groups compared with control group. Monoamine oxidase-B (MAO-B) activities were significantly inhibited (about 10.2%) in brain of SWP-400 groups compared with control group. These results suggest that inhibiting effects of LF accumulation and MAO-B activity of silkworm powder (SWP) may play a pivotal role in attenuating a various age-related changes for improvement of brain function.
This experiment was carried out to investigate the effects of red pepper powder on its enzyme production and growth of Aspergillus oryzae. In this report, Aspergillus oryzae A and G strains were cultured to the wheat bran and Czap다 Dox liquid media containing red pepper powder. And their enzyme activity. dry mycelial weight, pH and acidity were determined respectively. The results obtained were as follows. 1. In the case of protease reaction on the substrate without salt, the addition of red pepper powder ranging from 0.05 to 30 per cent to the wheat bran medium showed the increased neutral and alkali protease production in comparison with the control. However, the acid protease production were decreased by the addition of red pepper powder in the case of Aspergillus oryzae G strain. 2. In the case of protease reaction on the substrate with 10 per cent of salt, wheat bran medium containing 0.05 to 10per cent of red pepper powder showed the high protease production in comparison with the control. 5. As the amount of red pepper added to the Czapek-Dox lipuid culture was increased, the dry mycelial weight produced by Aspergillus oryzae A and G strains were also increased. And the dry mycelial weight produced by Aspergillus oryzae A strain was much more than that of Aspergillus oryzae G strain. 6. The addition of red pepper powder brought the fall of pH in Czapek-Dox liquid medium. 7. By the increase of red pepper powder concentration, the acidity in Czapek-Dox liquid culture were increased. And the increase ratio in the case of Aspergillus oryzae G strain was more remarkable than that of Aspergillus oryzae A strain.
In this paper, two statistical methods were applied to optimize medium components to improve the production of the milk-clotting enzyme by Bacillus amyloliquefaciens D4. First, wheat bran juice, skim milk powder, and $Na_2HPO_4$ were shown to have significant effects on D4 enzyme production using the Plackett-Burman experimental design. Subsequently, an optimal medium was obtained using the Box-Behnken method, which consisted of 3.31 g/l of skim milk powder, 5.0 g/l of sucrose, 0.1 g/l of $FeSO_4{\cdot}7H_2O$, 0.1 g/l of $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, 0.1 g/l of $MnSO_4{\cdot}2H_2O$, 0.1 g/l of $ZnSO_4{\cdot}7H_2O$, 1.52 g/l of $Na_2HPO_4$, and 172.45 g/l of wheat bran juice. With this optimal medium, the milk-clotting enzyme production was remarkably enhanced. The milk-clotting enzyme activity reached 3,326.7 SU/ml after incubation of 48 h, which was 1.76-fold higher than that of the basic medium, showing that the Plackett-Burman design and Box-Behnken response surface method are effective to optimize medium components, and B. amyloliquefaciens D4 possessed a high rennet-producing capacity in the optimal medium.
Acetone powder was prepared from raw arrowroots and the polyphenol oxidases of crude enzyme prepared from acetone powder were identified 5 isoenzymes by staining with catechol containing 0.05% phenylene diamine. The crude enzyme was passed through the columns of ion exchangers and gel permeation to fractionate the polyphenol oxidases. The main fraction of polyphenol oxidase appeared to be purified by 94-fold, with the activity yield of 45.4%, and its molecular weight was determined as 38,500 by poly acrylamide gel electrophoresis. The optimal pH and temperature for the enzyme activity were pH 7.5 and $50^{\circ}C$, respectively. The purified enzyme showed a high affinity for catechol and pyrogallol. The Michaelis constant for catechol was calculated to be 16.67mM according to the Lineweaver-Burk method. The enzyme activity was strongly inhibited by L-ascorbic acid, sodium bisulfite, EDTA and KCN, and totally inhibited, by $Fe^{3+}$ at a concentration of 1mM. However the enzyme was activated by $Zn^{2+}$ approximately 1.7 times at the same concentration.
The characteristics and quality of Yakju with addition of ginseng powder originated in Choongchungdo were evaluated. At result, pH was decreased at the beginning stage of two stages fermentation and then slowly increased. Total acidity were increased in the cases of all (A), (B) and (C) during the fermentation. (A) group used Nuruk, crude enzyme and powder yeast showed the highest pH of 7.08 and total acidity of 0.84 at the 4th day of fermentation. The alcohol contents of B(21.0%) and C(20.4%) used cultured yeast were higher than A(19.0%) used powder yeast at the 4th day of fermentation. Also, inhibition against alcohol fermentation by ginseng powder wasn't showed and amino nitrogen contents were higher in (A) and (C) with addition of crude enzyme. Free sugar were the highest in (A) used both Nuruk and crude enzyme such as glucose of 599.16, maltose of 129.11mg%. Free amino acids were much more in A(580.02mg%) than in B(527.48mg%) and C(538.74mg%). from the sensory evaluation, desirable color and flavor qulity for 40 ages was (A) and (B) which was used Nuruk, and that for 20 ages was (C) which was used crude enzyme. However the best taste and overall preference was (B) for 20 and 40 ages of all. Therefore to produce high quality Yauju and commercialize, studies of fermentation process in Yakju should proceed later.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1998.11a
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pp.187-187
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1998
The objective was to verify biological activities of fruit and stem of prickly pear(Opuntia ficus indica L. var, saboten Makino). We have determined inhibitory activities on enzymes, such as dopamine ${\beta}$-hydroxylase(DBH), monoamme oxidase A and B(MAO-A, B), and antioxidant activity, in vitro. We purchased dried stem powder and lyophilized fruit powder of prickly pear from CheJu Island, and prepared the extracts with 80% of methanol. The fruit extract showed stronger inhibitory effects on MAO-A and -B and antioxidant activity compared. to the stem extract, on fractionation with hexane, ethyl acetate, butanol and water. Both the stem and the fruit extracts with ethyl acetate showed stronger enzyme inhibitory and antioxidant activities than other extracts. Now we are isolating active principles from both ethyl acetate extracts.
Drink and tea-bag were processed with safflower seed powder. Drinks were processed with 90$^{\circ}$C hot water extraction. Yield, soluble solid, pH and centrifugation residue of drinks were ranged in 79.2~89.3%, 0.6~0.99%, 5.98~6.40 and 1.00~1.18, respectively. Sensory score of overall acceptance in drinks were highest at that of enzyme treated drink. Tea-bag was processed with roasted safflower seed powder, alone(1.2g) and the mixtured tea-bags were consisted of persimmon leaves, pine needle and angelica gigas powder in same amount, respectively. Teas were prepared with extraction at 80$^{\circ}$C water for 2 min. Soluble solid and sensory evaluation score of teas were the highest when the tea was processed with safflower seed alone.
The mucilage production and tyrosine content in soy milk cake (SMC) fermented by Bacillus firmus NA-1, Bacillus subtilis GT-D, and B. subtilis KU-A was improved by fortification with 10% defatted soybean flour. The fibrinolytic activity and consistency of the SMC were drastically increased by solid-state fermentation for 1 day. However, the consistency of the fermented SMC gradually decreased during fermentation for 3 days. Furthermore, the tyrosine content of the freeze-dried powder of SMC fermented by three Bacillus sp. was 9 times higher than that of unfermented SMC. The soybean proteins, including the 7S and 11S subunits, were partially digested during alkaline fermentation, producing lower molecular-weight peptides. The fibrinolytic enzyme produced in SMC fermented by B. firmus NA-l and B. subtilis KU-A exhibited higher thermal stability than that of B. subtilis GT-D fermentation. The powder obtained from B. subtilis GT-D fermentation had an ${\alpha}$-amylase activity and lower consistency compared to those of B. firmus NA-1 and B. subtilis KU-A. In addition, this powder contained 6.3% moisture content, 27% crude protein content and 9 units of fibrinolytic activity and proteolytic activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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