야생 능이버섯에 함유되어 있는 생리 기능성 물질들을 탐색, 분리하여 이들을 고부가가치의 건강식품 소재로 활용하고자 덕유산 일대에서 채집한 능이버섯의 물 추출물은 제조하여 몇 가지 생리 기능성을 측정하였다. 능이버섯 자실체의 물 추출물은 항고혈압성 엔지오텐신 전환효소(ACE) 저해 활성과 항통풍성 xanthine 산화효소(XOD) 저해활성이 각각 74.3%와 59.6%로 우수하였다. 그러나 tyrosinase 저해 활성과 항산화 활성, SOD 유사활성 등은 매우 낮거나 없었다. 능이버섯 자실체중의 ACE 저해활성은 자실체 분말의 물현탁액을 $30^{\circ}C$에서 24시간, XOD 저해물질은 $50^{\circ}C$에서 24시간 진탕 시켰을 때 가장 높았다. 이들 두 가지 생리활성 물질을 함유한 능이버섯 물 추출물은 앞으로 건강식품이나 대체 의약 소재 개발에 매우 유용하게 활용 할 것으로 사료된다.
참치 가수분해물을 항산화제인 BHT 0.02% 첨가구와 rosemary 0.01% 및 0.02%를 첨가한 제품을 대조구와 함께 $30^{\circ}C에서$ 저장하면서 검사한 결과 색도에서 대조구 및 항산화제 처리한 4제품 모두 명도는 감소하는 반면에 적색도는 증가하는 경향이었다. 그리고 수용성 갈변물질이 지용성 갈변물질 보다 함량이 많았으며 저장 중 증가폭도 컸다. 지방산화 억제능에서는 0.02% BHT 첨가구 보다 0.02% rosemary 첨가구에서 효과가 있었고, ACE 저해능에서는 생시료에서 3% 미만의 낮은 효율을 보인 반면에 가수분해물에서는 72.2%를 나타내었으며, $IC_{50}$/은 1.124mg이었다.
Kim, Joong-Kil;Shim, Ha-Na;Lee, Seung-Hee;Yoo, Kwan-Suk;Song, Bong-Keun
대한한의학회지
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제27권4호
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pp.74-83
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2006
Ssanghwatang (SHT) has been known to prove effective in the treatment for erectile dysfunction (ED), and its modified formula is widely used in clinical practice. However, its fundamental mechanism of action is not clearly known. It is well known that endothelial cells can achieve the relaxation of vascular smooth muscles by the release of nitric oxide (NO). NO is synthesized by the enzyme NO synthase (NOS) from L-arginine and oxygen. It is widely accepted that NO plays an important role in the relaxation of corpus cavernous smooth muscle and vasculature. In addition, in terms of the penile erection, the NO/cGMP pathway is more potent than the PCE1/cAMP pathway. The main purpose of the present study was to investigate the mechanism of the erectile effects of SHT by focusing on its direct effects on corpus cavernous smooth muscle cells. We investigated the NOS activity, nitrite concentration and cGMP levels in rat corpus cavernous smooth muscle cell lines activated by SHT extracts. Furthermore, we evaluated the effect of SHT extracts on penile smooth muscle relaxation following oral administration of SHT extract powder to rats by the dosage of 1 g/kg over fifteen days. As a result, we found that SHT stimulated NO release. NOS activity and cGMP levels were increased by SHT respectively. Furthermore, SHT relaxed the corpus cavernous smooth muscle. These results are consistent with the concept that penile erection by SHT is carried out through the NO/cGMP pathway. In conclusion, the present study shows that SHT increases the NOS activity, synthesizes NO and augments the cGMP, which mediates penile erection. Further determination of the SHT mechanism related with the NO/cGMP pathway strongly indicates that SHT can be used as a remedy for erectile impotence.
This investigation was aimed at developing a ready-to-reconstitute beverage by utilizing probiotics and whey protein hydrolysates carrying bioactive peptides. Cheddar cheese whey was ultrafiltered. The 18% protein retentate was subjected to protein hydrolysis using Neutrase. The hydrolyzed retentate was further condensed to 35% total solids and spray-dried at $75^{\circ}C$ outlet air temperature. Different levels of sugar, citric acid and stabilizer were blended for spray-dried hydrolysates. Spray-dried hydrolysate was further inoculated with different levels of probiotics grown in a whey medium and dried in fluidized-bed drier at $40^{\circ}C$ to obtain a ready-to-reconstitute beverage. Hydrolysis was greatest at an enzyme:substrate ratio of 1:25 for 3 h. Spray-dried hydrolysate reconstituted to 1% protein and blended with 15% sugar, 0.2% citric acid and 0.15% xantham gum resulted in a superior product with no sedimentation. Accordingly, sugar, citric acid and xanthum gum were dry-blended with spray-dried hydrolysates. Bifidobacterium bifidum and Lactobacillus acidophilus that was grown separately in a whey medium, blended to produce 2% spray-dried hydrolysate and dried as described above resulted in a readyto-reconstitute beverage mix. The fluidized dried product typically exhibited a probiotic count of $10^8$colony forming units (CFU)/g. However, blending of probiotic to the retentate and direct spray-drying precipitously reduced the probiotic count to $10^4$ CFU/g of powder.
Objective: The objective of this study was to look for optimal preparation of hydrolysates of desalted duck egg white powder (DDEWP) by the three different proteases and to investigate their antioxidant and antimicrobial properties. Methods: DDEWP was hydrolyzed by three proteases, including pepsin (PEP), Bacillus spp. (BA) and natokinase (NAT) with three different enzyme concentrations (0.1%, 0.3%, and 0.5%), individually. The important key hydrolysis parameters such as hydrolysis degree, yield, antioxidant and antimicrobial activity were evaluated in this experiment. Results: The results showed that the degree of hydrolysis (DH) of all treatments increased with increasing hydrolysis time and protease concentrations. The antioxidant and antimicrobial activities of the hydrolysates were affected by type and concentration of protease as well as hydrolysis time. Hydrolysis of PEP significantly (p<0.05) obtained the highest yield of hydrolysates, however, both of BA and NAT showed substantially lower DH values and still did not exceed 5% by the end of hydrolysis. Among the different hydrolysates, PEP exhibited significantly higher 2, 2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity than BA and NAT. All DDEWP hydrolysates from PEP had low ferrous ion chelating activity (<37%) that was significantly lower than that of NAT (>37% to 92%) and BA (30% to 79%). Besides, DDEWP hydrolysates of PEP presented significantly higher reducing power than BA and NAT. In antimicrobial activities, Escherichia coli, Salmonella typhimurium, and Pseudomonas aeruginosa were not effectively inhibited by any DDEWP hydrolysates of PEP except for Staphylococcus aureus. Especially, the excellent antibacterial activity against S. aureus only was displayed in DDEWP hydrolysates of PEP 0.1%. Conclusion: DDEWP hydrolysates from PEP demonstrated significantly better DH, yield, DPPH radical scavenging activity and reducing power, furthermore, had excellent inhibitory on S. aureus due to large clear zone and moderated inhibitory in bactericidal inhibition.
This study was performed to investigate the effects of Korean native plant diets on lipid and cadmium (Cd) metabolisms and also antioxidative enzyme activities in rats. Seventy male Sprague-Dawley rats weighing 210.3$\pm$2.7g were blocked into ten groups according to body weight. Rats were raised for four weeks with diets containing 0 or 0.04%(w/w) cadmium chloride and 5%(w/w) plant powder-Ssook(Artemisia princeps var. orientalis HARA), Chamchwi(Aster scaber THUNB), Gomchwi(Lingularia fischeri TUBCZ). or Solbeerum (Portulaca oleracea LINNE). Food intake, weight gain, food efficiency ratio, and weights of liver, kidney, spleen and epididymal fat were significantly lower in Cd-exposed groups, food efficiency ratio, and weights of liver, kidney, spleen and epididymal fat were significanlty lower in Cd-exposed groups. Plasma total lipid level, liver total lipid, cholesterol and triglycerde concentrations, and fecal total lipid, cholesterol and triglyceride excretions were decreased by Cd administration. Total lipid and triglyceride concentration in plasma and liver were lower in Chamchwi groups together with increased fecal total lipid and triglyceride excretions. Cholesterol concentration in plasma and liver were lower in Gomchwi groups with increased fecal cholesterol excretions. Activities of red-blood-cell superoxide dismutase(SOD), and liver catalase, SOD and glutathione peroxidase (GSH-px) were decreased significantly by Cd administration. Thiobarbituric acid reactive substance(TBARS) concentrations of plasma and liver were increased by Cd administration. Thiobarbituric acid reactive substance(TBARS) concentration of plasma and liver were increased by Cd administration. Administration of plant diets decreased plasma and liver catalase, SOD and GSH-px activities in Cd-free diet groups and increased them in Cd-administered groups. Plasma and liver TBARS concentrations were decreased in animals fed plant diets, with Chamchwi showing the most effective antioxidative capacity. The concentration of Cd accumulated in blood and tissue decreased in Cd-exposed groups fed plant diets. Liver Cd concentration were lower in the Chamchwi and Gomchwi groups, and kidney Cd levels were lower in the Ssook and Chamchwi groups. Among them, Chamchwi was the most effective in Cd detoxification. In conclusion, Chamchwi and Gomchwi were effective in lowering tissue lipid levels, with Chamchwi having the greatest antioxidative and detoxifying effects.
Ferritin is known to regulate iron metabolism and maintain iron in a variety of the eukaryotic organisms. The region encoding the mature ferritin (0.47 kb, H-type) of Periserrula leucophryna was amplified using the designed primers including restriction enzyme site and termination codon and subcloned in frame to the pRBAS secretion vector containing the signal sequence, RBS, and promoter of amylase gene (E. coli-Bacillus shuttle vector), resulting in recombinant pRBAS-PLF vector. Recombinant ferritin (18 kDa) was correctly processed and secreted from Bacillus subtilis LKS strain harboring the pRBAS-PLF vector and quantitatively analyzed by SDS-PAGE and western blot, respectively. Secretion of the ferritin was optimized by culture conditions (host, medium, temperature, nitrogen source) in 3 L batch culture and 5 L jar fermenter. Finally. the ferritin was largely produced using 50 L fermenter as the following conditions; at $30^{\circ}C$, 150 rpm, 1 vvm in Bacillus subtilis LKS using PY medium. The secreted ferritin was maximally measured (approximately 177.6 ug/ml) when the cell density reached to 14.4 at $OD_{600}$ (20 h incubation). The iron binding activity was confirmed by Perls' staining in 7.5% non-denaturing gel, indicating that the multimeric ferritin (composed of 24 subunits) was formed in the culture broth after secretion. Biologically, the culture broth and powder type containing ferritin were tested for possibility as feed additive in chicken broiler. As a result, the ferritin stimulated the growth of chick broil and improved feed efficiency and production index.
This study was designed to investigate the effects of silk fibroin(Mw 500) powder (SFP) on oxygen radicals and the scavenger enzymes in brain membranes of rats. Spragu-Dawley(SD) male rats(160${\pm}$10g) were fed basic diet(control group), and experimental diets(SFP-2.5 and SFP-5.0 groups) added 2.5 and 5.0g/kg BW/day for 6 weeks. Hydroxyl radical($.$OH) levels resulted in a decreases(6.6% and 9.7%, 2.8% and 11.9%, respectively) in brain mitochondria and microsomes of SFP-2.5 and SFP-5.0 groups compared with control group, but were significantly decreased in these membrances of SFP-5.0 group only. Superoxide radical (O2) levels were a slightly decreased (2.0% and 9.1%, respectively) in brain cytosol of SFP-2.5 and SFP-5.0 groups compared with control group. Lipid peroxide(LPO) levels were significantly decreased (12.9% and 21.9%, 13.2% and 22.5%, respectively) in brain mitochondria and microsomes of SFP-2.5 and SFP-5.0 groups compared with control group. Oxidized protein (OP) levels were significantly decreased (16.7% and 15.7%, respectively) in brain microsomes of SFP-2.5 and SFP-5.0 group compared with control group, but significantly difference between in brain mitochondria of these two groups could not be obtained. Mn-SOD activities were remarkably increased (11.2% and 24.2%, respectively) in mitochodria of SFP-2.5 and SFP-5.0 groups. CuZn-SOD activities were effectively increased (7.7% and 19.6%, respectively) in brain cytosol of SFP-2.5 and SFP-5.0 groups, but significant difference between control and SFP-2.5 groups could be not obtained. GSHPx activities were considerably increased (5.3% and 11.7%, respectively) in brain cytosol of SFP-2.0 and SFP-5.0 groups compared with control group. There results suggest that anti-aging effect of silk fibroin may play an effective learning and memory role in a attenuating a oxidative stress and increasing a scavenger enzyme activity in brain membranes.
무화과 PE를 추출하여 ammonium sulfate로 분획 투석한 후 Q-Sepharose column 및 CM-cation exchanger column을 이용한 chromatography와 HPLC에 의해 1개의 음이온성 PE와 2개의 양이온성 PE로 분리되었으며, 이들은 모두 전기영동상에 분자량 27,000정도의 밀접한 두 개의 band로 나타난 부분 정제된 단백질이었다. 이 효소 단백질들은 보관 중에 활성을 급격히 상실되므로 현실적인 이용성을 고려하여 분말화한 시료 현탁액을 이용한 in situ PE의 특성을 조사하였다. 그 결과 분말 시료는 냉동 저장뿐 만 아니라 $5^{\circ}C$에서도 장기간 저장할 수 있었으며, 최적 pH는 8.5, 최적온도는 $50^{\circ}C$이였고, 활성화 에너지는 7,671 cal $mol^{-1}\;K^{-1}$ 이었으며 $55^{\circ}C$까지는 열 안정성을 유지하였다. 또한 $0.2{\sim}0.4$ M NaCl에서 활성이 촉진되었으며 PE의 용출은 0.8 M 이상의 NaCl 에서 효과적이였고 $0{\sim}1.0$ M NaCl까지의 범위에서는 특별히 안정성에 영향을 미치지 않았다.
Kim, Hee-Jin;Shin, Chan-Young;Noh, Min-Su;Ko, Kwang-Ho
한국응용약물학회:학술대회논문집
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한국응용약물학회 1995년도 춘계학술대회
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pp.86-86
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1995
The analysis of membrane receptors for hormones and neurotransmitters has progressed considerably by pharmacological and biochemical means and more recently by the use of specific anti-receptor antibodies. A 14-mer peptide (from Phe102 to Leu115 of ${\beta}$2-adrenergic receptor) was synthesized and this peptide was coupled to carrier protein Keyhole Limpet Hemocyanin(KLH) by glutaraldehyde method. A 0.5mg of KLH-coupled peptide was emulsified with equal volume of complete Freund's adjuvant and injected via popliteal lymph node to each of the three Newzealnd White rabbits. Booster injections were repeated at 4 weeks interval for three times with incomplete Freund's adjuvants. One week after the final injection, serum was prepared from ear artery. Nonspecific immunoglobulins were removed by passing the serum through KLH-Sepharose 6B affinity matrix and further by incubation with bovine lung aceton powder. The titer of the antibody for synthetic peptide which was determined by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA) was about l/l,000. The antibody produced in this study revealed 67kDa protein band in the western blot of partially purified guinea pig lung ${\beta}$-adrenergic receptor preparation. The antibody inhibited ${\beta}$-adrenergic antaginist [3H] Dihydroalprenolol binding to soluble ${\beta}$-adrenergic receptor by 25% while control sera did not show any inhibitory effects, The result of this study suggests that the peptide sequence selected in this study may play some important roles in adrenergic receptor-ligand interaction.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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