This experiment was conducted to evaluate the effect of supplementing enzyme cocktail on growth performance, digestibility of nutrients, and monosaccharide concentration in ileum and ceca of broiler chickens fed wheat-based diets. A total of 600 male broilers (42.26 ± 1.76 g, 0 day old) were used for 35 days of feeding trial consisting of 2 phases (starter phase from d 0 to 21 and finisher phase from d 21 to 35). Four dietary treatments were prepared based on wheat diets containing four levels of enzyme cocktail supplementation at 0, 0.2, 0.3, and 20 g/kg. Overall, dietary enzyme cocktail supplementation decreased feed conversion ratio (linear p = 0.007; quadratic p = 0.013) and improved (linear p < 0.05) the apparent ileal digestibility of dry matter (DM), crude protein, and soluble and insoluble non-starch polysaccharides. The apparent total tract digestibility of DM and gross energy were increased (linear p < 0.01) with increasing supplementation levels of the dietary enzyme cocktail. The concentrations of arabinose, xylose, mannose, and glucose in ileal digesta were linearly increased (p < 0.01) with increasing enzyme cocktail supplementation levels. In addition, the quadratic effect was observed (quadratic p = 0.046) in mannose concentration of ileal digesta. The concentration of arabinose, xylose, mannose, and galactose in cecal digesta was increased (linear p < 0.05) with increasing dietary enzyme cocktail supplementation levels. The supplementation of enzyme cocktail efficiently increased the utilization of nutrients in broiler and there was no adverse effects of high dosage supplementation level.
Weaning is the most stressful event for nursery pigs because they are moved from familiar to unfamiliar environments. In addition, weaned pigs have immature digestive and immune systems. This situation makes weaned pigs susceptible to diseases and makes the absorption of nutrients from diets difficult. A feed approach, such as dietary enzyme supplementation, can be considered a solution. This study investigated the effects of dietary enzyme cocktail on diarrhea and immune responses of weaned pigs. A total 36 weaned pigs ($5.92{\pm}0.48kg\;BW$; 28 d old) were randomly allotted to 2 dietary treatments (3 pigs/pen, 6 replicates/treatment) in a randomized complete block design. The dietary treatments were a typical diet based on corn and soybean meal (CON) and CON with 0.05% enzyme cocktail (Cocktail; combination of xylanase, ${\alpha}-amylase$, protease, ${\beta}-glucanase$, and pectinase). Pigs were fed their respective diets for 6 wk. Incidence of diarrhea, packed cell volume (PCV), white blood cells (WBC) count, and immunoglobulin content were measured. A significantly lower incidence of diarrhea (p < 0.05) was observed in the Cocktail group as compared with the CON group. The Cocktail group also showed a decreased PCV (p < 0.1) on d 3 after weaning than the CON group. However, no differences were observed for number of WBC and contents of immunoglobulin G, M, and A between the Cocktail and CON groups. Consequently, inclusion of an enzyme cocktail in diets for weaned pigs had a positive influence on gut health by reducing the incidence of diarrhea in the present study.
Soybean, one of most widely used swine feed component in the world, contains non-starch polysaccharides (NSP). The digestive system of weaned pigs is not yet fully developed, and thus weaned pigs cannot easily digest diets based on corn and soybean meal. Dietary exogenous enzymes supplementation has been intensively investigated to assist digestion of anti-nutritional factors, such as NSP. This experiment was conducted to investigate the effects of dietary enzyme cocktail on growth performance, intestinal morphology, and nutrient digestibility of weaned pigs. A total 36 weaned pigs ($5.92{\pm}0.48kg\;BW$; 28 d old) were randomly allotted to 2 dietary treatments (3 pigs/pen, 6 replicates/treatment) in a randomized complete block design. The dietary treatments were a typical diet based on corn and soybean meal (CON) and CON with 0.05% enzyme cocktail (Cocktail; mixture of xylanase, ${\alpha}-amylase$, protease, ${\beta}-glucanase$, and pectinase). Pigs were fed their respective diets for 6 wk. Growth performance, morphology of ileum, apparent ileal digestibility (AID) and apparent total tract digestibility (ATTD) of dry matter, crude protein, and energy of weaned pigs were measured. No significant differences (p > 0.05) were observed for growth performance for the duration of the experimental period, and morphology of ileum, and nutrient digestibility between CON and Cocktail treatment groups. Therefore, the results from the current study indicated that enzyme cocktail supplementation in diets had no influence on growth performance, intestinal morphology, and nutrient digestibility of weaned pigs.
Food allergy represents a severe problem for many societies, including sensitive populations, academies, health authorities, and the food industry. Peanut allergy occupies a special place in the food allergy spectrum. To prevent consumption by consumers suffering from a peanut allergy, a rapid and sensitive detection method is essential to identify unintended peanut adulteration in processed foods. In this study, we produced four monoclonal antibodies (MAbs; RO 3A1-12, PB 4C12-10, PB 5F9-23, and PB 6G4-30) specific to thermo-stable and soluble proteins (TSSPs) of peanut and developed an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) based on the MAbs. Among them, PB 5F9-23 MAb was firmly bound to Ara h 1, and other MAbs strongly reacted to Ara h 3 in the Western blot analysis. An antibody cocktail solution of the MAbs was used to enhance the sensitivity of an indirect ELISA, and the limit of detection of the indirect ELISA based on the antibody cocktail solution was 1 ng/ml and improved compared to the indirect ELISA based on the single MAb (11 ng/ml). The cross-reaction analysis revealed the high specificity of developed MAbs to peanut TSSPs without cross-reaction to other food allergens, including nuts. Subsequently, analyzing processed foods by indirect ELISA, all foods labeled as containing peanuts in the product description were confirmed to be positive. The results indicate that the developed antibodies exhibit high specificity and sensitivity to peanuts and can be used as bio-receptors in immunoassays or biosensors to detect intentional or unintentional adulteration of peanuts in processed foods, particularly heat-processed foods.
The complex enzyme pool secreted by the phytopathogenic fungus Fusarium graminearum in response to glucose or hop cell wall material as sole carbon sources was analyzed. The biochemical characterization of the enzymes present in the supernatant of fungal cultures in the glucose medium revealed only 5 different glycosyl hydrolase activities; by contrast, when analyzing cultures in the cell wall medium, 17 different activities were detected. This dramatic increase reflects the adaptation of the fungus by the synthesis of enzymes targeting all layers of the cell wall. When the enzymes secreted in the presence of plant cell wall were used to hydrolyze pretreated crude plant material, high levels of monosaccharides were measured with yields approaching 50% of total sugars released by an acid hydrolysis process. This report is the first biochemical characterization of numerous cellulases, hemicellulases, and pectinases secreted by F. graminearum and demonstrates the usefulness of the described protein cocktail for efficient enzymatic degradation of plant cell wall.
In this study, the performance of a gold biosensor combined with light microscope imaging system (GB-LMIS) was comparatively evaluated against enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detecting Salmonella under simulated chilling condition. The optimum concentration of antiSalmonella polyclonal antibodies (pAbs) was determined to be 12.5 and 100 ㎍/ml for ELISA and GBLMIS, respectively. GB-LMIS exhibited a sufficient and competitive specificity toward three tested Salmonella among only. To mimic a real-world situation, chicken was inoculated with Salmonella cocktail and stored under chilling condition for 48 h. The overall growth of Salmonella under chilling condition was significantly lower than that under non-exposure to the chilling condition (p < 0.05). No significant differences in bacterial growth were observed between brain heart infusion and brilliant green broth during the enrichment period (p > 0.05). Finally, both GB-LMIS and ELISA were employed to detect Salmonella at every 2-h interval. GB-LMIS detected Salmonella with a competitive specificity by the direct observation of bacteria on the sensor using a charge-coupled device camera within a detection time of ~2.5 h. GB-LMIS is a feasible, novel, and rapid method for detecting Salmonella in poultry facilities.
Cho, Jun-Ho;Bhattarai, Saurabh;Oh, Tae-Jin;Jang, Jong Hwa
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.41
no.2
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pp.236-241
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2013
Pilocarpine is an imidazole alkaloid, found exclusively in the Pilocarpus genus, with huge pharmaceutical importance. In order to extract pilocarpine from Pilocarpus jaborandi, environmentally friendly enzyme-assisted extraction was applied. Viscozyme$^{(R)}$ L, a commercially available enzyme cocktail, was used for the study. The conditions for extraction were optimized on the basis of substrates, enzymes, temperatures and pHs. Optimum conditions for extraction with the highest yield were 30 h reaction of 100 mg substance at $45^{\circ}C$ in 40 ml of 50 mM acetic acid, pH 4. A 10% enzyme concentration was found to be the best for extraction. Total pilocarpine content after extraction was analyzed by HPLC. The total pilocarpine content ($1.14{\mu}g/mg$) obtained from Viscozyme$^{(R)}$ L treatment was 3.08-fold greater than those of the control treatment ($0.37{\mu}g/mg$).
Moon, H.K.;Hanz, In K.;Gentry, J.L.;Parmentier, H.K.;Schrama, J.W.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.12
no.2
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pp.180-185
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1999
Effects of host immunization on bacterial translocation and growth performance in weanling piglets were studied. Twenty four barrows were assigned to one of two immunization treatments: Control group (CON: immunized with placebo) or Immunization group [IMMU: immunized with Antigen cocktail; Keyhole limpet hemocyanin (KLH), Ovalbumin (OA), and Tetanus toxoid (TT)]. On d0, piglets were weaned and intramuscularly immunized with 2 ml of placebo or Antigen cocktail, respectively. Antigen-specific Ig titers were determined by ELISA (Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay). Ig titers to E. coli-derived lipopolysaccharides (LPS) were measured as the indicator of bacterial translocation. Ig titers to LPS were higher (p<0.10, 0.05 or 0.01) in CON group before immunization (d0), but the difference disappeared with time and IgA titers to LPS became higher (p<0.05) in IMMU group on d39. In IMMU group, IgG titers to LPS from d28 onwards showed positive correlations (p<0.10, 0.05, 0.01 or 0.001) with IgG titers to KLH from d11 onwards and with IgM titers to KLH from d7 onwards. Generally, growth performance was negatively related to IgG titers to LPS. Average daily gain for d28 to d35 showed negative correlations (p<0.10, 0.05, or 0.01) with IgG titers to LPS on d28 onwards in immunization group. These results reveal some evidences that host immunization might facilitate bacterial translocation and high humoral immune responses to LPS are negatively related with the growth performance.
Liers, Christiane;Ullrich, Rene;Kellner, Harald;Chi, Do Huu;Quynh, Dang Thu;Luyen, Nguyen Dinh;Huong, Le Mai;Hofrichter, Martin;Nghi, Do Huu
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.31
no.10
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pp.1438-1445
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2021
A bifunctional glycoside hydrolase GH78 from the ascomycete Xylaria polymorpha (XpoGH78) possesses catalytic versatility towards both glycosides and esters, which may be advantageous for the efficient degradation of the plant cell-wall complex that contains both diverse sugar residues and esterified structures. The contribution of XpoGH78 to the conversion of lignocellulosic materials without any chemical pretreatment to release the water-soluble aromatic fragments, carbohydrates, and methanol was studied. The disintegrating effect of enzymatic lignocellulose treatment can be significantly improved by using different kinds of hydrolases and phenoloxidases. The considerable changes in low (3 kDa), medium (30 kDa), and high (> 200 kDa) aromatic fragments were observed after the treatment with XpoGH78 alone or with this potent cocktail. Synergistic conversion of rape straw also resulted in a release of 17.3 mg of total carbohydrates (e.g., arabinose, galactose, glucose, mannose, xylose) per gram of substrate after incubating for 72 h. Moreover, the treatment of rape straw with XpoGH78 led to a marginal methanol release of approximately 17 ㎍/g and improved to 270 ㎍/g by cooperation with the above accessory enzymes. In the case of beech wood conversion, the combined catalysis by XpoGH78 and laccase caused an effect comparable with that of fungal strain X. polymorpha in woody cultures concerning the liberation of aromatic lignocellulose fragments.
To investigate the effects of hydrocortisone on new-born rat cardiac endothelial cells in culture, the endothelial cells were isolated by means of enzyme-cocktail method. The cells were cultivated in Lees modified Dulbeco\ulcorner medium and 10[M or 10[M of hydrocortisone was added to the medium. The cells were harvested or coverglass and processed for thiamin pyrophosphatase reaction and Feulgen reaction. The enzymatic activities of Golgi complex, number of cells and number of large nucleated[more than tetraploid] cells were counted and discussed for their significance. The results were summarized as follows; 1. Hydrocortisone seemed to accelerate the rate of recovery of cardiac endothelial cells from isolation damage. 2. Endothelial cells treated with hydrocortisone revealed strong positive reaction to thiamine pyrophosphatase in early culture and 10 M group had stronger reaction than that of 10 AM group 3. Hydrocortisone had inhibiting effects on endothelial proliferation and the higher the concentration of the reagent was the stronger effects. 4. Hydrocortisone inhibited the appearance of large nucleate cells in endothelial cell population. 5. Hydrocortisone seemed to suppress the nuclear DNA synthesis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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