• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제17권3호
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• pp.420-427
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• 2007

We investigated the temperature effects on the virulence, development, reproduction, and otility of two Korean isolates of entomopathogenic nematodes, Steinernema glaseri Dongrae strain and S. longicaudum Nonsan strain. In addition, we studied the growth and virulence of their respective symbiotic bacterium, Xenorhabdus poinarii for S. glaseri and Xenorhabdus sp. for S. longicaudum, in an insect host at different temperatures. Insects infected with the nematode-bacterium complex or the symbiotic bacterium was placed at $13^{\circ}C,\;18^{\circ}C,\;24^{\circ}C,\;30^{\circ}C,\;or\;35^{\circ}C$ in the dark and the various parameters were monitored. Both nematode species caused mortality at all temperatures tested, with higher mortalities occurring at temperatures between $24^{\circ}C\;and\;30^{\circ}C$. However, S. longicaudum was better adapted to cold temperatures and caused higher mortality at $18^{\circ}C$ than S. glaseri. Both nematode species developed to adult at all temperatures, but no progeny production occurred at $13^{\circ}C\;or\;35^{\circ}C$. For S. glaseri, nematode progeny production was best at inocula levels above 20 infective juveniles/host at $24^{\circ}C\;and\;30^{\circ}C$, but for S. longicaudum, progeny production was generally better at $24^{\circ}C$. Steinernema glaseri showed the greatest motility at $30^{\circ}C$, whereas S. longicaudum showed good motility at $24^{\circ}C\;and\;30^{\circ}C$. Both bacterial species grew at all tested temperatures, but Xenorhabdus sp. was more virulent at low temperatures $(13^{\circ}C\;and\;18^{\circ}C)$ than X. poinarii.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제19권3호
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• pp.314-322
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• 2009

Four different bacterial colonies were isolated from an old stock of an entomopathogenic nematode, Steinernema monticolum. They all showed entomopathogenicity to final instar larvae of beet armyworm, Spodoptera exigua, by hemocoelic injection. However, they varied in colony form, susceptibility to antibiotics, and postmortem change of the infected host insects. Biolog microbial identification and 16S rDNA sequence analyses indicate that these are four different species classified into different bacterial genera. Owing to high entomopathogenicity and a cadaver color of infected insect host, Serratia sp. was selected as a main symbiotic bacterial species and analyzed for its pathogenicity. Although no virulence of Serratia sp. was detected at oral administration, the bacteria gave significant synergistic pathogenicity to fifth instar S. exigua when it was treated along with a spore-forming entomopathogenic bacterium, Bacillus thuringiensis. The synergistic effect was explained by an immunosuppressive effect of Serratia sp. by its high cytotoxic effect on hemocytes of S. exigua, because Serratia sp. caused septicemia of S. exigua when the bacterial cells were injected into S. exigua hemocoel. The cytotoxic factor(s) was present in the culture medium because the sterilized culture broth possessed high potency in the cytotoxicity, which was specific to granular cells and plasmatocytes, two main immune-associated hemocytes in insects.

• 한국버섯학회지
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• 제2권1호
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• pp.21-27
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• 2004

본시험은 한국에서 채집되어 강원대학교 동충하초은행(EFCC)에서 보관 중인 눈꽃동충하초의 분포와 배양적 특성을 조사하였다. 눈꽃동충하초는 한국의 산이나 계곡에서 어렵지 않게 채집할 수 있으며 골고루 분포한다. 채집시기는 7~9월로 나타났으며 9월말에 가장 많이 채집할 수 있으며 채집된 눈꽃동충하초의 종은 눈꽃동충하초(P. tenuipes)가 가장 높게 채집되었다. 눈꽃동충하초의 균사배양 최적배지는 PDA배지이며 SDAY와 HMA배지에서도 생장은 가능하며 균사생장에 가장 적합한 온도는 $25^{\circ}C$이며 pH는 6.0~7.0으로 나타났다. 적합한 영양원으로는 탄소원은 dextrose이었으며, 질소원은 tryptone가 가장 우수하였고, 무기염으로는 $KH_2PO_4$에서 가장 고른 성장을 보였다. C/N에서는 20 : 1의 비율이 가장 적합한 것으로 조사되었다.

• 한국균학회지
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• 제39권3호
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• pp.256-258
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• 2011

곤충병원성 곰팡이 B. bassiana KK5균의 포자 발아 촉진제를 조사하기 위한 연구가 수행되었다. 탄수화물을 포함한 18 화합물을 B. bassiana 포자와 혼합하여 12시간 동안 water agar에서 배양하였다. 18종의 화합물 중 fructose, mannose 그리고 skim milk와 혼합된 포자의 발아율은 배양 12시간 후 무처리와 비교하여 촉진되는 것으로 조사되었다. 발아 촉진 효과가 확인된 1% fructose, mannose 또는 skim milk와 포자 혼합액을 진딧물에 살포 하였을 때, skim milk와 포자 혼합액의 처리에서 복숭아혹진딧물 3령 약충에 대한 살충증진 효과를 보였다.

• Mycobiology
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• 제41권4호
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• pp.221-224
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• 2013

Aphids are one of the most destructive pests in crop production such as pepper, cucumber, and eggplants. The importance of entomopathogenic fungi as alternative pest control agents is increasing. Conidia of entomopathogenic fungi are influenced by environmental conditions, such as temperature and relative humidity, and cause slow and fluctuating mortality. These factors have prevented wider application and use of biocontrol agents. For investigation of means of mitigation of such problems, we conducted bioassays with 47 fungal culture filtrates in order to evaluate the potential of secondary metabolites produced by entomopathogenic fungi for use in aphid control. Among 47 culture filtrates cultured potato dextrose broth, filtrate of Beauveria bassiana Bb08 showed the highest mortality (78%) against green peach aphid three days after treatments. Filtrate of Bb08 cultured in Adamek's medium showed higher toxicity as 100% to third instar nymphs of the aphid compared with seven other filtrates cultured in different broths amended with colloidal chitin or oil. The culture filtrates and fungal cultures from media amended with colloidal chitin or oil had lower control efficacies than filtrates without these additives in three different media. These results indicate that the fungal culture fluid or culture filtrate of B. bassiana Bb08 cultured in Adamek's medium has potential for development as a mycopesticide for aphid control.

• Applied Biological Chemistry
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• 제40권5호
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• pp.388-394
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• 1997

곤충 병원성 곰팡이 Beauveria bassiana ATC7159의 배양여액으로부터 균체외 protease (basiasin I)를 Ammonium sulfate 침전, DEAE-Sephadex A-50, CM-cellulose 및 Hydroxyapatite column chromatography를 수행하여 완전히 정제하였다. 이 과정으로 41배 정제되었으며 정제수율은 13.6%였다. 정제된 bassiasin I의 분자량은 SDS-PAGE 상에서 약 32,000 Da이며 pI값은 9.5로 확인되었다. $NH_2$ 말단 아미노산 서열은 다른 곤충 병원성 곰팡이가 생산하는 pretense들과 높은 상동성을 보였다. Protease 활성의 최적 pH는 10.5 부근이며, pH 5.0-11.0범위에서 안정하였다. 최대 활성온도는 $60-65^{\circ}C$이며, $60^{\circ}C$에서 120분후에 약 20%의 잔존활성을 보였다. 이 pretense는 phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF) 및 diisopropyl fluorophosphate (DFP)에 의해 저해된다.

• 한국농림기상학회지
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• 제8권2호
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• pp.77-85
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• 2006

Entomopathogenic nematodes (EPNs) have been used as biological control agents for control of various agro-forest insect pests, and are especially effective against soil-dwelling insect pests. Effect of soil moisture on pathogenicity of commercial EPNs for white grub control was evaluated in laboratory, pots, and golf courses. Pathogenicity of EPNs in sand column was variable depending on depth, soil moisture, and EPN species or strain. All tested EPNs (Heterorhabditis sp. GSNUH1, Heterorhabditis sp. GSNUH2, Steinernema carpocapsae GSN1, and S. longicaudum Nonsan strain) showed similar pathogenicity against the bait insect, great wax moth (Galleria mellonella) larva at 2 cm deep at a given soil moisture. However, pathogenicity of the Heterorhabditis sp. GSNUH1 strain was decreased with increasing soil moisture. Pathogenicity of S. carpocapsae GSN1 strain was the lowest in 3% soil moisture (v/w) at 7 cm depth. However, there was no difference in pathogenicity between Heterorhabditis sp. GSNUH2 and S. longicaudum Nonsan strain. Although pathogenicity of Heterorhabditis sp. KCTC 0991BP strain showed no difference against the 2nd instar of Exomala orientalis, that of the S. carpocapsae GSN1 strain was decreased in the laboratory depending on soil moisture. Highly pathogenic strain EPN, Heterorhabditis sp. KCTC 0991BP strain, showed higher pathogenicity at 100 mm irrigation than non-irrigation or 10 mm irrigation. However, poor pathogenic strain EPN, S. carpocapsae GSN1 strain, was not different in pathogenicity from the 2nd instar of Exomala orientalis in creeping bentgrass (Agrostis palustris) depending on irrigation amount in the pot. Pathogenicity of EPNs in field experiment at the tee of Ulsan golf club showed a similar trend to that in the pot experiment.

• 한국응용곤충학회지
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• 제58권2호
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• pp.101-109
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• 2019

곤충병원선충인 Steinernema longicaudum에 공생하는 Xenorhabdus ehlersii KSY 세균은 나방류에 대한 높은 병원력을 발휘한다. 본 연구에서 이 세균의 병원력이 아이코사노이드 생합성을 억제하여 기주 곤충의 면역 저하를 유발한다는 것을 확인하였다. 그러나 이 세균의 병원력은 혈강 주입에 의해 야기된다. 섭식을 통해 이 세균을 혈강으로 전달하기 위해 곤충의 중장벽을 파괴하여 병원력을 발휘하는 Bacillus thuringiensis(Bt)와 혼합하여 처리하였다. 배추좀나방(Plutella xylostella) 유충에 대해서 X. ehlersii 세균 배양액의 혼합 처리는 Bt 살충력을 현격하게 증가시켰다. 이러한 살충효과는 또 다른 나비목 해충인 콩명나방에 대해서도 확인되었다. 제형화를 위해 X. ehlersii 세균 배양액을 동결건조하여 Bt 수화제와 혼합하였다. 이를 기반으로 간이 포장실험을 수행하였다. Bt 단독으로 처리한 결과 약 80%의 방제 효과를 보인 반면 X. ehlersii 혼합제는 95% 이상의 방제효과를 나타냈다. 본 연구는 곤충병원세균 X. ehlersii가 새로운 해충 방제제로 개발될 가능성을 제시하고 있다.

• 농약과학회지
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• 제17권4호
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• pp.454-459
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• 2013

난방제 해충의 하나인 파밤나방의 생물적 방제를 위하여 곤충병원성 곰팡이를 수집, 분리하여 파밤나방에 고병원성인 곰팡이를 선발하는 연구를 수행하였다. 곤충병원성 곰팡이의 수집은 친환경 농업지역인 경기도 양평 지역의 수집된 토양 샘플에 갈색거저리를 넣어 감염된 곤충에서 곰팡이를 분리, 수집하는 insect-bait법을 활용하였다. 분리한 곤충병원성 곰팡이를 파밤나방 3령 유충에 처리한 결과, FT83균주가 파밤나방에 병원성이 높았으며, 현미경을 이용한 형태학적 분석과 18srRNA의 ITS sequencing을 통한 분자생물학적 방법을 이용하여 동정한 결과 Metarhizium anisopliae로 동정되었다. 선발한 M. anisopliae FT83의 온도별 균사생장속도는 $15^{\circ}C$에서 $30^{\circ}C$까지는 온도가 증가할수록 균사의 생장이 촉진되었으나 35에서는 균사가 생장하지 않았다. 선발 균주의 농도별 살충율은 $1{\times}10^6$ conidia/ml에서 $81.6{\pm}9.3%$, $1{\times}10^7$ conidia/ml에서 100%, $1{\times}10^8$conidia/ml에서 100%로 $1{\times}10^7$ conidia/ml 농도가 경제적인 처리농도였다.

• 한국균학회지
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• 제25권4호통권83호
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• pp.239-252
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• 1997

1990년 부터 1996년까지 16개소의 채집지에서 채집되어 분류동정된 동충하초는 12속 33종으로 이중 Cordyceps bifusispora, C. martialis, C. oxycephala, C. paludosa, C. pentatomi, C. rosea, C. ryogamiensis, Shimizuomyces paradoxa, Akanthomyces aculeatus, Polycephalomyces ramosus, Tilachlidiopsis nigra 등 14종은 국내 미기록종이다. 주로 다수 채집된 동충하초인 C. nutans, C. specocephala, Paecilomyces tenuipes 등은 전 채집시기에 걸쳐 고루 분포하였다. C. mizitayis C. kyushuensis, C. pruinosa 등과 같이 자실체의 발생이 환경조건으로서 대기내 습도에 강하게 영향을 받는 종들의 경우는 주로 장마철이 시작되면서 상대습도가 높아지는 7월 중순부터 8월 중순까지 분포하는 것으로 나타났다. 채집된 동충하초중 분리된 종은 C. bifusispora를 포함하여 Cordyceps속 9종, 불완전 균류의 Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, Paecilomyces tenuipes, Verticillium lecanii등 총 13종이며, 분리된 Cordyceps속 동충하초를 이용하여 완전세대와 불완전세대의 관계를 구명한 결과 C. militaris와 C. kyushuensis는 Verticillium속으로, C. pruinosa는 Acremonium속으로, C. sphecocephala는 Hymenostilbe속으로, C. scarabaeicola는 Beauveria속으로 각각 밝혀졌다.