Bacteria belonging to the genus Paenibacillus are facultatively anaerobic endospore formers and are attracting growing ecological and agricultural interest, yet their genome information is very limited. The present study surveyed the genomic features of P. polymyxa ATCC $842^T$ using pulse-field gel electrophoresis of restriction fragments and sample genome sequencing of 1,747 reads (approximately 17.5% coverage of the genome). Putative functions were assigned to more than 60% of the sequences. Functional classification of the sequences showed a similar pattern to that of B. subtilis. Sequence analysis suggests nitrogen fixation and antibiotic production by P. polymyxa ATCC $842^T$, which may explain its plant growth-promoting effects.
The new microsporidia S80 isolated from, Bombyx mori L. in Korea showed ovoid in the morphology of the spores and the size were measured $2.9{\pm}0.28{\mu}$ in length and $1.7{\pm}0.29{\mu}$ width. No other microsporidian spore like this has not been so far isolated from Silkworm. The length of the polar filament extruded in hydrogen peroxide ($H_2O_2$) at $30^{\circ}C$ was $26{\mu}$ of a round cytoplasm on the top. The spores were partly stained with Giemsa, Safranin-O and Gram as the same staining properties as Nosema bombycis, Microsporidia K 79 and other microsporidian spores. The fine structures were observed under scanning eleceron microscope through ultrathin sectioning. The spore wall was composed of three layers ; the thin exospore of an electron dense rippled layer, the thick electron lucent endospore which was thinning considerably at the polar filament insertion point, and the inner limiting membrane. Polar cap present at the sporeapex, with a long polar filament of 12-13 coils, subtending angle of $60^{\circ}$ to spore axis, which is tubular made up of a multilayered and are a benes core, light ring structure enclosing the dance core, the dark ring structure enclosing the inner light ring structure and the other than and light ring structure bounded from cytoplasm. Lamellate polaroplast occupied the anterior part of the spore, and the two neclei with dense nucleoplasm bounded by a double nuclear envelope were cited in the slight downer middle portion of spore. From the characteristics of the shape, size and fine structures, it is certain to reason the Microsporidia S80 belong to the phylum Microspora, class Microspora, order Microsporida, order Microsporida. The shape of two nuclei cited seems to be genus Nosema, but in the classification for the suborder it should be defined wheather pansporoblasts be formed or not and for the genis especial attempts have been made to define the characters which distinguish the disporous genera in the life cycle. Survey through the infection of the bad cocoons during 1980 to 1982 in South Korea the areas contaminated with new microsporidia were revealed 5 provinces of Kyung-Gi, Kang-Won, Chung-Nam and Chun-Nam. Pathological effects inoculated per os at second instar larvae of silkworm, the LD 50 was $7.1{\times}10^7/ml$ as lower pathogenecity than that of Nosema bombycis Naegeli of $1.2{\times}10_7/ml$. While on the other hand the inoculation of the microsporidia at fourth instar larvae lowerd the whole cocoon weight and cocoon shell weight and significant at 1% level. The microsporidia S80 defined it can not be transmitted transovarially from the result of predictive and collective examination of 21 egg batches from the infected female moth.
A highly cyclodextrin glucanotransferase producing strain of Bacillus sp. was isolated from soil, and basic studies on the characteristics of the strain and its enzyme, conditions for the enzyme production, and the enzyme utilization were carried out. The isolated strain was aerobic, motile, endospore-forming and rod-shaped bacterium. Optimum pH and temperature for the enzyme action were 6.0 and 45$^{\circ}C$, and the enzyme was stable within 5$0^{\circ}C$, and between pH 6.0 and 10.0. The highest yield of the enzyme was obtained using the medium containing 2% corn starch as a carbon source, and 5% corn steep liquor, 0.1% urea and 0.25% ammonium sulfate as nitrogen sources. The fermentation conditions for the enzyme production in a jar fermentor were cetermined to be 3$0^{\circ}C$, 200rpm, 0.6vvm and 60hr cultural period. Stevioside transglycosylation catalyzed by this enzyme was identified by high performance liquid chromatography.
A Gram-positive and endospore-forming strain, $JH8^T$, was isolated from deep-sea sediment and identified as a member of the genus Paenibacillus on the basis of 16S rRNA gene sequence and phenotypic analyses. According to a phylogenetic analysis, the most closely related species was Paenibacillus wynnii LMG $22176^T$ (96.9%). Strain $JH8^T$ was also facultatively anaerobic and grew optimally at $20-25^{\circ}C$. The major cellular fatty acid was anteiso-$C_{15:0}$, and the DNA G+C content was 53.1mol%. The DNA-DNA relatedness between the isolate and Paenibacillus wynnii LMG $22176^T$ was 7.6%, indicating that strain $JH8^T$ and P. wynnii belong to different species. Based on the phylogenetic, phenotypic, and chemotaxonomic characteristics, strain $JH8^T$ would appear to belong to a novel species, for which the name Paenibacillus donghaensis sp. novo is proposed (type strain=KCTC $13049^T=LMG\;237S0^T$).
An endospore-forming, rod-shaped bacterium was isolated from forest soil samples collected at the Taebaek mountain of Gangwon province, Korea, and taxonomically characterized by physiological, biochemical and phylogenetic methods. Its 16S rRNA sequences showed the maximum similarity of 97% with B. amyloliquefaciens. In addition, the isolate BCNU 2002 was determined to have the ability to produce enzymes such as amylase, protease, gelatinase and catalase. The in vitro antifungal activity of Bacillus sp. BCNU 2002 was also examined against human pathogenic fungi such as Aspergillus niger, Candida albicans, Epidermophyton floccosum, Saccharomyces cerevisiae, Trichophyton mentagrophytes and Trichophyton rubrum. A maximum production level of antifungal substances of Bacillus sp. BCNU 2002 was achieved under aerobic incubation at $28^{\circ}C$ for 7 days in LB broth. BCNU 2002 showed strong antifungal activities against T. mentagrophytes and T. rubrum with the range of percentage inhibition from 56.25 to 63.23%. It was also confirmed that ethylacetate extract of cultured broth showed a strong antifungal activity against A. niger, C. albicans, S. cerevisiae and T. rubrum by agar diffusion method. The peptide fraction also exhibited broad antifungal spectrum against various pathogenic fungi. The minimum inhibitory concentration values for active extracts ranged between 125 ${\mu}g$/mL and 1000 ${\mu}g$/mL.
Park, Hee-myung;Oh, Tae-ho;Kim, Hyun-uk;Youn, Sin-keun;Lee, Sang-rok;Yoo, Jae-chun;Yoon, Hwa-young;Han, Hong-ryul
Korean Journal of Veterinary Research
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v.39
no.4
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pp.819-824
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1999
Suspected infections of Campylobacter spp and Clostridium spp were observed in three dogs. The diagnosis was based on fecal cytology, Gram's stain, clinical signs and serum chemistry. The rectal swabs of diarrheic dogs were performed to confirm the enteropathogens. Suspected Campylobacter spp were a sea-gull shape and Clostridium spp had a large, clear endospore in rectal cytology. Treatment with appropriate antibiotics resulted in a complete resolution of all clinical abnormalities in three cases. The source of Campylobacter spp and Clostridium spp could not be found clearly in three cases, but gastrointestinal origin was most likely. When detecting the enteropathogens in feces, fecal smear with Wright's and Gram's stain should be made at first and also, if the patients have canine parvoviral enteritis, attention should be paid to confirm the Campylobacter spp and Clostridium spp. In addition, since Campylobacter spp and Clostridium spp as normal bacterial flora exists in canine intestines, it is thought that microbiological isolation should be performed to confirm the suspected Campylobacter spp and Clostridium spp as primary enteropathogens in subsequent study.
The results that the effect of 6 detergents on the structural changes and biochemical composition of bacterial membrane of Escherichia coli and Bacillus cereus are as follows ; 1. Population growth of the bacteria was increased in case of the treatment with palmitoyl carnitine and sodium deoxy cholate but was increased in case of the treatment with palmitoyl carnitine and sodium deoxy cholate but was decreased by sodium dodecyl sulfate and palmitoyl choline, in E.coli and was decreased by palmitoyl carnitine and palmitoyl choline at the low concentration, in B. cereus. 2. The electron micrograph showed that cell wall lysis or cell collapse were observed in the treatment of sodium dodecyl sulfate and palmitoyl choline, and also cell wall was condensed by triton X-100 and sodium deoxy cholate, in E.coli. And in B. cereus, endospore formation of the bacteria was stimulated by palmitoyl choline, and cell lysis or structural changes of the membrane were observed in the treatment of sodium dodecyl sulfate, sodium cholate, and triton X-100, respectively. 3. As to the effect of detergent on the biochemical composition of biomembrane, the content of carnitine, in E.coli, and B.cereus, the content of structural protein and phospholipid were decreased by treatment of sodium dodecyl sulfate and structural protein was denatured by palmitoyl choline. 4. The profile of membrane protein revealed that the bacterial membrane were composed of various proteins. By dint of this result, some of membrane proteins were solubilized or changed to small molecules by the treatment of sodium dodecyl sulfate and palmitoyl choline, in E.coli and membrane protein of the biomembrane by treatment of sodium dodecyl sulfate, sodium deoxy cholate, palmitoyl choline, and palmitoyl carnitine were confirmed to be different profile as compared with those of the control, in B. cereus. Therefore, it is suggested that sodium dfodecyl sulfate and palmitoyl choline soulbilized biomembranes or inhibited membrane transport and that palmitoyl carnitine and sodium deoxy cholate were used as an energy source or stimulating the membrane transport, in E.coli. And, it is suggested that all of detergents were inhibited biomembrane synthesis, expet saponin, in B.cereus.
Bacterial endospores, especially those of Bacillus and Clostridium genera, are the target of sterilization in various foods. We used Bacillus subtilis ATCC 6633 spores to screen novel antimicrobial substances against spores from medicinal plants. We collected 79 types of plant samples, comprising 42 types of herbs and spices and 37 types of medicinal plants used in traditional medicine in Korea and China. At a concentration of 1%(w/v), only 14 of the ethanol extracts exhibited antimicrobial activity against B. subtilis spores of at least 90%. Crude extracts of Torilis japonica, Gardenia jasminoides, Plantago asiatica, Fritllaria, and Arctium lappa showed particularly high sporicidal activities, reducing the spore count by about 99%. Consideration of several factors, including antimicrobial activity, extraction yields, and costs of raw materials, resulted in the selection of T. japonica, G. jasminoides, A. lappa, and Coriandrum sativum for the final screening of novel antimicrobial substances. Verification tests repeated 10 times over a 4-month period showed that the ethanol extract of T. japonica fruit reduced aerobic plate counts of B. subtilis spores the most, from $10^7$ to $10^4\;CFU/mL$ (99.9%) and with a standard deviation of 0.21%, indicating that this fruit is the most suitable for developing a novel antimicrobial substance for inactivating B. subtilis spores.
To confirm the antimicobial mechanism of Torilis japonica, antimicrobial profile was observed on various spore conditions by combining 0.1% (3 mM) torilin with antimicrobial activity and 0.27% water fraction with germinants. A 75% ethanol extract of T. japonica fruit reduced Bacillus subtilis ATCC 6633 spore counts by 3 log cycles and reduced the vegetative cells to undetectable level (by about 6 log cycles) (both in terms of CFU/mL). Further fractionating the ethanol extract into n-hexane and water fractions revealed that the former reduced the spore count by 1 log cycle whereas the latter had no effect. The antimicrobial active compound was isolated and purified from the hexane layer, and identified as torilin ($C_{22}H_{32}O_5$). The water fraction of the ethanol layer did not show antimicrobial activity, whereas the antimicrobial effect of 0.1% (3 mM) torilin was significantly enhanced in the presence of the water fraction (0.27%). This result can be explained by synergistic effects of the water fraction containing considerable amounts of germinants such as L-alanine and K+ ions that triggered germination.
Kim, Young Soo;Kotnala, Balaraju;Kim, Young Ho;Jeon, Yongho
Journal of Ginseng Research
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v.40
no.4
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pp.453-461
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2016
Background: This study aims to describe the characterization of Paenibacillus polymyxa GBR-1 (GBR-1) with respect to its positive and negative effects on plants. Methods: The morphological characteristics of GBR-1 were identified with microscopy, and subjected to Biolog analysis for identification. Bacterial population and media optimization were determined by a growth curve. The potential for GBR-1 as a growth promoting agent, to have antagonistic activity, and to have hydrolytic activity at different temperatures was assessed. The coinoculation of GBR-1 with other microorganisms and its pathogenicity on various stored plants, including ginseng, were assessed. Results: Colony morphology, endospore-bearing cells, and cell division of GBR-1 were identified by microscopy; identification was performed by utilizing the Biolog system, gas chromatography of fatty acid methyl esters (GC-FAME). GBR-1 showed the strongest antagonistic activity against fungal and bacterial pathogens. GBR-1 cell numbers were relatively higher when the cells were cultured in brain heart infusion (BHI) medium when compared with other media. Furthermore, the starch-hydrolytic activity was influenced by GBR-1 at higher temperature compared to low temperatures. GBR-1 was pathogenic to some of the storage plants. Coinoculation of GBR-1 with other pathogens causes differences in rotting on ginseng roots. A significant growth promotion was observed in tobacco seedlings treated with GBR-1 suspensions under in vitro conditions, suggesting that its volatile organic compounds (VOCs) might play a role in growth promotion. Conclusion: The results of this study indicate that GBR-1 has both positive and negative effects on ginseng root and other stored plants as a potential biocontrol agent and eliciting in vitro growth promotion.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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