These experiments were carried out to determine the effect of pregnancy in bisected embryo. The embryos of ICR mouse were microsurgically bisected at morula and blastocyst stage using microsurgical blade attached a micromanipulator. These bisected embryos without zona pellucida were cultured up to blastocyst stage and cell count and diameter of stained blastomere, and transferred pseudopregnant mice. And the development of these bisected embryos was compared with the results of production of young of the corresponding intact embryos or cell stage. When the bisected mouse embryos were cultured in vitro for 20 to 24 hours in morula stage(77.2%) or 3 to 6 hours in blastocyst stage(84.1%), them were developed to the expanded blastocyst stage. There were no significant(P<0.05) differences in the development rate of bisected embryos between in morula and blastocyst stages. The embryo size of blastocyst developed in vitro from bisected embryo was small(P<0.05)than intact embryo. However, the number of blastomeres with bisected embryo (24.7+1.3and 21.5+1.2 respectively) were significantly(P<0.05) reduced, compared with that of intacted embryos(36.3+1.1 and 41.4+1.2 respectively). When compared with the result of pregnancy rate(63.6%) after surgical transfer of bisected morulae, a similar result(65.4%) was obtained with bisected blastocyst stage(P< 0.05). However, production of youngs (38.8%) after transfer of bisected morula, a similar result (38.1%) was obtained with bisected blastocyst stage (P<0.05).
Freshly harvested American ginseng (Panax quinquefolium L.) seeds were stratified at two locations over each of three years. Seed development and temperature in the stratification boxes were investigated until the seed was removed 12 months later and direct-seeded in the field. During stratification and seeding (14 months) three embryo stages were identified. In Stage I of 250 days (Sept. to mid-May) embryo length increased from about 0.5 to 1.0 mm: in Stage II of 100 days (mid-May to late Aug. when seeded) length increased to 2.0 mm and in Stage III (late Aug. to late Nov.) length increased to 5.3 mm. Excerpt split width could also be placed in three stages. Changes in embryo length correlated with embryo endosperm length ratio. Insertion compression tests showed that the excerpt softened rapidly in late Stage II and throughout Stage III. The stratification box temperatures at all depths (10, 25 and 50 cm) never exceeded -2$^{\circ}C$ even when the air temperatures dropped to -13$^{\circ}C$ and were, therefore not damaging to the seeds.
The effects of seeding method and optimum time for freezing embryos according to the developmental stages on embryo survival rates after rapid freezing were determined using the FDA-test. The summarized results are as follows : 1. In the rapid freezing of embryos, the sucrose added medium together with Co-seeding or non-seeding showed the FDA scores of 4.67 and 4.20, respectively, but, raffinose addition obtained FDA scores of 4.27 and 3.97. 2. The developmental stage of embryos at freezing was most critical on the survival of embryos after thawing. Higher FDA scores were obtained in the order of blastocyst stage(4.94), morula stage(3.82) and ealy stage(2.65) in sucrose added medium. The same trend was observed in the raffinose added medium with an order or 4.91, 4.47 and 2.32. 3. Microscopic study of embryo before freezing and post-thawing indicated that the embryo showed shrinkage within 5 minutes after the embryo was transfer to the freezing medium. When thawed embryo was tranfered to the dilution medium, swelling of the embryo was observed and there after it reshrank indicating the removal of cryoprotectant from the embryo. The size of the embryo recovered to the original state when it was moved into a PBS-solution.
As a result of investigating the change of Ascorbic acid and Lipid which have a relation with metabolism of a silkworm egg in the process of the growth of embryo is silkworm eggs. The following facts have been found 1) Ascorbic acid has gradually increased before the period of the Byong B embryo and it has decreased after period of Byong B embryo. 2) Triglyceride and Total cholesterol has gradually increased before the period of the Byong B embryo and it has decreased after period of the Byong B embryo. 3) Phospholipid has gradually decreased before the period of the Byong A embryo and it increased during the Byong B embryo and decreased again at same stage. It has increased from the head pigment of embryo to hachting. 4) Free Fatty acid decreased during the Byong A embryo stage and increased from the Byong B embryo stage to the Ki A embryo stage and decreased again and increased shortly before the hachting.
A large amount of information is currently available for somatic embryogenesis of plants. However, one common problem related to somatic embryos is that the conversion rate can be low for some species. Apical meristems are responsible for post-embryonic growth of the embryo. The low percentage observed is most likely a result of poor apical meristem development or defects in the meristem organization during somatic embryogenesis. In flowering plants, apical meristems are well developed by the late heart stage of zygotic embryo development. In conifers, such as white spruce, apical meristems are formed at the pre-cotyledon stage. Thus, apical meristem development occurs very early, prior to the maturation stage of embryo development. Once formed, meristems are stably determined. In the somatic embryo, as exemplified by white spruce, since embryo development is not synchronous, tissue differentiation including apical meristem formation occurs throughout the“maturation”stage. Different apical meristem organizations can be found among different individuals within a population. In contrast to their zygotic counterparts, the apical meristems appear not to be stably determined as their organization, as the shoot apical meristem especially, can be easily modified or disrupted. Precocious germination seldom results in functional plantlets. All these observations suggest that the conditions for somatic embryo maturation have not been optimized or are not suitable for meristem formation and development. The following strategies could improve meristem development and hence conversion: 1. Simulate in ouuio conditions to promote meristem development prior to the“maturation”treatment.2. Prevent deterioration of apical meristem organization during somatic embryo maturation.3. Promote further meristem development during embryo germination.
Hong, Yeon Hee;Lee, Jang Mi;Kim, Seul Ki;Youm, Hye Won;Jee, Byung Chul
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.47
no.2
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pp.140-146
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2020
Objective: To investigate whether the degree of post-warming embryo or blastocyst development is associated with clinical pregnancy in vitrified embryo or blastocyst transfer cycles. Methods: Ninety-six vitrified cleavage-stage embryos and 58 vitrified blastocyst transfer cycles were selected. All transfer cycles were performed from February 2011 to March 2019, and all vitrified embryos or blastocysts were warmed from 4 PM to 6 PM and then transferred the next morning from 9 AM to 10 AM. The scores of the cleavage-stage embryos and blastocysts were assessed at warming and at transfer using the modified Steer method and the Gardner method, respectively. The mean embryo or blastocyst score, score of the single top-quality embryo or blastocyst, and the difference in the score between warming and transfer were compared between nonpregnant and pregnant women. Results: In the cleavage-stage embryo transfer cycles, both the top-quality embryo score at transfer and the difference in the score between warming and transfer were significantly associated with clinical pregnancy. A top-quality embryo score at transfer of ≥ 60.0 (area under the curve [AUC], 0.673; 95% confidence interval [CI], 0.531-0.815) and a difference in the score between warming and transfer of ≥ 23.0 (AUC, 0.675; 95% CI, 0.514-0.835) were significant predictors of clinical pregnancy. In blastocyst transfer cycles, the top-quality blastocyst score at transfer was the only significant factor associated with clinical pregnancy. A top-quality blastocyst score at transfer of ≥ 38.3 was a significant predictor of clinical pregnancy (AUC, 0.666; 95% CI, 0.525-0.807). Conclusion: The top-quality embryo score at transfer and the degree of post-warming embryo development were associated with clinical pregnancy in vitrified cleavage-stage embryo transfer cycles. In vitrified blastocyst transfer cycles, the top-quality blastocyst score at transfer was the only significant factor affecting clinical pregnancy.
This study was carried out to investigate the inte actions between recipients and embryos to compare pregnancy rates in bovine embryo transfer, such as synchrony and stage of embryos, synchrony and quality of embryos, synchrony and side of uterine horn, and preservation time and stage of embryos. Fifty-two embryos were transferred by surgically to 42 Holstein heifers, 3 Holstein cows and 7 Korean native heifers from Feb., 1985 to June, 1986. The results were as follows: 1. In the trial of interactions between synchrony and embryo stage, recipients synchronired from- hours to + 12 hours in synchrony and embryos from morulac stage to advanced blastoctyst stages showed reason able pregnancy rate. 2. Excellant (A) and good (B) grade embryos showed good pregnancy rate, 81.8% and 73.3% respectively, but fair (C) grade embryos showed poor, 25% only at the same boundary of recipient synchrony. 3. More recipients had corpus luteum on the right ovary than the left, and also had better pregnancy rate (26/32 vs 13/20,81.3% vs 65%). 4. A good pregnancy rates (over 60%) were obtained with the embryo transferred 17hrs after flush at room temperature or field condition in culture medium.
In vitro fertilization(IVF) derived morula and blastocyst embryos were bisected by a simple method and cultured in vitro without zona pellucida And also bisected embryos were frozen-thawed and cultured in vitro) to evaluate the survival rate. The results obtained were as follows : The average number of grade I or II immature follicular oocytes recovered by slicing method per ovary was 11.9 from 142 ovaries. Following in vitro fertilization, the rates of cleavage and in vitro development to morula and blatocyst were 61.7 and 32.2% respectively. The successful bisection rate of IVE embryos was 67.51%, and the embryos of blastocyst stage were bisected successfully at significantly(P
Dynamic parameters of physiology including embryo ratio (ER), embryo length to endosperm length, dry weight ratio between embryo and endosperm (DWR) and respiration rate (RR) in American send (Panax quinquefolium L.) seed were investigated. According to the changes of ER during seed stratification, the duration of embryo afterripening could be divided into three stages as \circled1 embryo slow growth stage (ESGS), ER increased from 7.31% to 20.48% (0.16% day-1): \circled2 embryo rapid growth stage (ERGS), ER increased to 80.98% (0.61% day-1) (75G5+ ERGS=morphological afterripening stage (MP,5)) and \circled3pysiological afterripening stage (PAS), ER Increased to 88.50% (0.094 day-1) only. DWR Increased slowly from 0.20% to 2.76clp (0.016% day-1) in MAS and rapidly to 8.81% (0.061% day-1) in PAS. The RR correlated significantly with ER as well (r=0.8934 > rot, 0.6610). The steep increment of both DWR and RR in PAS indicated that the PAS was not a static stage although the ER was not changed too much. All of these may provide some information for understanding the dormancy mechanisms of American sting seed.
Jihyun Park;Wonyou Lee;Islam M. Saadeldin;Seonggyu Bang;Sanghoon Lee;Junkoo Yi;Jongki Cho
Journal of Animal Science and Technology
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v.65
no.4
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pp.779-791
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2023
This study aimed to assess the effects of embryonic developmental stage, quality grade, and fresh or frozen/thawed conditions on the pregnancy rate and sex ratio of live offspring in Hanwoo (Bos taurus coreanae) cows. The quality and developmental stage of in vivo-derived (IVD) transferred embryos were evaluated using the standard criteria of the International Embryo Technology Society. The recipient cows were synchronized using conventional (estradiol benzoate and progesterone) protocols before embryo transfer. Embryos were transferred to 297 cows, and pregnancy was monitored for 60-70 days after embryo transfer. The pregnancy rates of fresh and frozen/thawed embryos were 56.90% and 52.49%, respectively. Pregnancy rates varied according to embryo quality (56.18% for grade 1 vs. 36.67% for grade 2). Pregnancy rates also varied by developmental stage and cryopreservation (67.86% vs. 63.49% for stage 4-1, 64.00% vs. 54.72% for 5-1, and 50.00% vs. 47.83% for 6-1, in fresh embryos vs. frozen/thawed embryos, respectively). For stage 7-1, the pregnancy rates were 72.73% for fresh embryos and 20.00% for frozen/thawed embryos. In 66 fresh embryos, the sex ratio of live offspring was 5:5, whereas it was 4(female):6(male) for frozen/thawed embryos among the 95 frozen/thawed embryos. The miscarriage rate was approximately 3% higher for frozen/thawed embryos than for fresh embryos (18.1% for fresh vs. 21.1% for frozen). Seasonal fertility rates were 33.3% in spring, 55.67% in summer, 52.8% in autumn, 60.0% in winter. The following male-to-female ratios were observed in different seasons: 6.7:3.3 in spring, 4.0:6.0 in summer, 5.5:4.5 in autumn, and 3.3:6.7 in winter. The current data revealed no significant differences in pregnancy rates between fresh and frozen/thawed IVD embryos. However, there was a lower pregnancy rate with advanced-stage frozen/thawed embryos (stage 7-1). The current study provides comprehensive results for the better optimization of embryo transfer in Hanwoo cattle to obtain the desired fertility rate, pregnancy rate, and sex ratio of calves. These results provide important insights into the factors that influence the viability and success of IVD embryo transfer in Hanwoo cows and may have practical applications for improving breeding programs and reducing production costs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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