괄루근으로부터 분리된 다당류에 대하여 continuous gel electrophoresis, SDS-Polyacrylamide gel eletrophoresis, ion exchange column chromatography, Hydroxyapatite column chromatography 및 Gel filtration등의 방법을 이용하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1) 황산암모늄 분별침전법에 의한 렉틴의 정제도는 초추출물의 4.85배이며 DEAE Sephadex A-50 column chromatography법에 의한 정제도는 24.17배로 나타났고, 마지막 정제단계인 Sephacryl S-200 gel filtration에 의한 정제도는 47.34배로 나타났다. 2) 정제된 렉틴의 분자량은 60,000da1ton으로 나타났다. 3) 사람의 혈액형에 따른 응집효과는 90-100%로 특이성은 없었다.
The purpose of this experiment was to investigate the protein profiles in the placenta of Korean native cows(KNC) transferred cloned embryos and KNC artificially inseminated placental tissues were collected from the cows after cesarean section around parturition, and placental proteins were analyzed. Using two dimensional polyacrylamide gel eletrophoresis and matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry. (omitted)
Kim, Seong-Han;Kim, Jun-Young;Kang, Yeon-Ho;Park, Yong-Keun;Lee, Bok-Kwon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권11호
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pp.1814-1818
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2006
Vibrio cholerae O1 El Tor isolates (n=242), collected in Korea between 1991 and 2002, were classified by NotI-digested pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). The major types were Al before 1998 and B after 1999, among both domestic and imported cases. The prevalent PFGE types among domestic cases were consistent with the prevalent types among imported cases in the same year. These results suggest a close relationship between the domestic and imported cases of cholera in Korea.
We isolated Rice dwarf virus (RDV) from infected plants in rice fields (Korea, Japan, China, the Philippines and Nepal) and analyzed their genomic dsRNAs by polyacrylamide gel eletrophoresis. The genomic dsRNAs of the isolates showed distinct electrophoretic mobility profiles. The S12 coding to nonstructural protein of Korean isolate (RDV-Kr) was further analyzed by sequencing. The S12 of RDV-Kr was 1,066bp long and coded for a protein composed of 312 amino acids including three open reading frames of P12, P120Pa and P120Pb. The sequence identities were 96% and 98.6% with Japanese isolates (H, AN), 94.7% with Nepalese isolate (NEL), 94% with Chinese isolate (CK) and the Philippines isolate (P).
Generally, plants defend themselves against pathogens by structural and biochemical reactions. Defense structures act as physical barriers and inhibit the pathogen from gaining entrance and spreading through the plant. Xanthomonas axonopodis pv glycines, the causal pathogen of bacterial pustule of soybean, causes hypersensitive response (HR). When pepper fruits were inoculated with X. axonopodis pv. glycines, in situ, time-series defense-related structural changes occurred in the inoculated sites. Early responses were programmed cell death (PCD), characterized by condensation and vacuolization of the cytoplasm, condensation of nuclear materials, and fragmentation of the nuclear DNA, which were observed by transmission electron microscopy. Nuclear fragmentation was proven by TUNEL method under confocal laser scanning microscopy and DNA laddering through eletrophoresis. At later stages, plant responses were cell elongation and cell division, forming a periderm-like boundary layer that demarcated healthy tissues from the inoculation sites. Using several stains such as toluidine blue, sudan IV, annexin V, and phloroglucinol-HCl, defense-related materials and structural changes were also examined.
Objectives : This study was focused to investigate the toxicity of Saussurea lappa (SL) extracts in HL-60 cells and human lymphocytes. We also examined the differentiation effect of SL against leukemia cells. Methods : For examining the toxicity of SL, cytokinesis-block micronucleus (CBMN) assay and single cell gel eletrophoresis (SCGE) assay were used in present study. The cell differentiation effect of SL was evaluated by nitroblue tetrazolium (NBT) reduction assay. Results : The inhibition of cell growth in HL-60 cells was observed in a dose-dependant manner after SL treatment for 24 h. According to SCGE assay, HL-60 cells treated with SL increased DNA damage at $10{\mu}g/m{\ell}$, while DNA damage was induced by 0.1, 1, $10{\mu}g/m{\ell}$ concentration of SL in human lymphocytes. Our results indicated that SL have no genotoxic effect in HL-60 cells and human lymphocytes. Additionally, the differentiation effect was induced in $1{\mu}g/m{\ell}$ SL-treated HL-60 cells. Conclusions : From above results it is suggested that SL could be beneficial for the preparation of the useful agent for treating leukemia.
Ginkgo biliba has been used for bronchitis and asthma in oriental countries and its leaf extract(GBE) contains 24% ginkgoflavone glycoside and 6% terpenoid. Flavonoids and terpenoids are known to have various antioxidant effects such as scavenging of free radicals and chelation of transtional metals. Antioxidant effect of GBE against 1,2,4-benzenetriol(BT), one of toxic metabolites of benzene, was demonstrated throughbsister chromatid exchange(SCE) analysis, single cell gel electrophoresis(SCGE) analysis, DNA cleavage assay and lipid peroxidation production analysis. The means of SCE frequencies at 10, 25 and 50$\mu$M concentration of BT were 7.72, 8.02, 9.22 respectively. In addition of GBE with concentration of 50, 200 and 500$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, SCE frequencies were decreased significantly.(p<0.05) According to SCGE analysis, BT induced DNA damage in a dose-dependent manner at concentration of 10 and 50 $\mu$m and the DNA damage induced by BT was significantly protected by GBE(p<0.001). No genotoxicity was observed by GBE treatment alone on DNA cleavage. The effect of BT on lipid peroxidation product, Malondiadehyde(MDA), was increased with concentration of BT(10 and 50 $\mu$M) and reduction in MDA was noted when GBE was added. From above results it is suggested that GBE could protect the cell and DNA from pro-oxidant effect by reactive oxigen species induced by BT.
The cellulase from internal organs of edible snails was purified by fractionation with ammonium sulfate, DEAE-Sephadex chromatography and gel filtration on Sephacryl S-200 and Superose 12 HR 10/30. The specific activity of the purified cellulase was 85.1 units/mg protein with 24.3 purification fold from crude extract. Molecular weight of the enzyme was estimated to be approximately 74,000 dalton by gel filtration chromatography and SDS-PAGE eletrophoresis. T7e isoelectric point of the enzyme was determined to be pH 4.6. The optimum temperature and pH of the enzyme were 5$0^{\circ}C$ and pH 6.0, respectively. The enzyme was stable at 30~5$0^{\circ}C$ and pH 6.0~10.0. It was activates by Mn$^{2+}$, but inhibited by Li$^{2+}$, Zn$^{2+}$, Ag$^{2+}$ and Hg$^{2+}$./TEX> 2+/.
Forty strains of Staphylococcus aureus were isolated from mastitic milk. As a result of antimicrobial susceptibility test, the strains of S aureus revealed 47.5% were resistant to ampicillin and penicillin, and 7.5% to gentamicin. But 45% of isolates were sensitive to antimicrobial agents tested. In case of enterotoxin production, 56.3% of 16 strains produced enterotoxin D. Two strain of enterotoxin D producers produced both enterotoxin B and D. According to isolation date, 15 representative strains were selected. As a results of pulsed field gel eletrophoresis analysis of the 15 representative strains, 14 strains were identical. Therefore we consider the identical strains of S aureus have caused continuously bovine mastitis in this dairy farm. If autogenous vaccine can be made by the strains, it will work well for the prevention of bovine mastitis caused by S aureus.
Yang, Hong Yan;Wang, Xiao Fen;Gao, Li Juan;Haruta, Shin;Ishii, Masaharu;Igarashi, Yasuo;Cui, Zong Jun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제18권4호
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pp.711-717
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2008
To speed up the conversion of rice straw into feeds in a low-temperature region, a start culture used for ensiling rice straw at low temperature was selected by continuous enrichment cultivation. During the selection, the microbial source for enrichment was rice straw and soil from two places in Northeast China. Lab-scale rice straw fermentation at $10^{\circ}C$ verified, compared with the commercial inoculant, that the selected start culture lowered the pH of the fermented rice straw more rapidly and produced more lactic acid. The results from denatured gradient gel eletrophoresis showed that the selected start culture could colonize into the rice straw fermentation system. To analyze the composition of the culture, a 16S rRNA gene clone library was constructed. Sequencing results showed that the culture mainly consisted of two bacterial species. One (A) belonged to Lactobacillus and another (B) belonged to Leuconostoc. To make clear the roles of composition microbes in the fermented system, quantitative PCR was used. For species A, the DNA mass increased continuously until sixteen days of the fermentation, which occupied 65%. For species B, the DNA mass amounted to 5.5% at six days of the fermentation, which was the maximum relative value during the fermentation. To the authors' best knowledge, this is the first report on ensiling rice straw with a selected starter at low temperature and investigation of the fermented characteristics.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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