잠란 난령별 추출액을 항원으로 토끼의 항혈청을 만들고 이들 항원과 항체와의 사이에 생기는 반응에 의하여 항원성을 비교하였다. 그 결과는 아래와 같다. 1) 잠란내 난령별 조성물질은 토끼의 이정맥에 주입하였을 경우에 대부분의 잠란항원 A.B.D.G.H.J는 항체를 형성하였으나 그 일부의 항원 C.E.F.I에서는 항체 형성이 식별되지 않았다. 2) 잠란 잠령별 잠란내 조성물질은 생종인 대조 A구, B구와 대조 B구와 AKT 흑종 48시간구 D, 흑확잠 103과 잠 104에 있어서 G.H와 J는 서로 공통항원을 가지고 있었으나 그 일부 즉 AKT의 E.F 잠 104의 20시간구 I에서는 특이적인 항원항체반응을 인정할 수 없었으며 타 항체, D.E.F와의 사이에서는 비특이적인 항원항체반응을 인정할 수 있었다. 3) 각 난령별 잠란내에는 공통항원성 물질이 존재하는 것으로 사려되며 각 난령에 따른 특수항원성을 보기 위해서 흡습법에 의한 시험을 한 결과 B.D.G.J의 4개의 특이적인 항원을 인정할 수 있었다.
1. ETEC F41 균주로부터 분리한 섬모항원의 분자량은 29.5 kDa으로 나타났으며, western blot을 통하여 섬모항원임을 확인하였다. 2. 분리한 섬모항원의 농도를 50 ${\mu}g$/$m\ell$, 200 ${\mu}g$/$m\ell$, 600 ${\mu}g$/$m\ell$로 조정 후 산란계에 접종하였다. 이 후 ELISA법을 이용하여 난황의 항체역가를 측정한 결과 최고치가 320,000(antigen 50${\mu}g$/$m\ell$), 450,000(antigen 200${\mu}g$/$m\ell$), 320,000(anti- gen 600${\mu}g$/$m\ell$)으로 나타났다. 3. F41난황항체와 K88, K99, 987P 섬모항원과의 교차반응을 ELISA법을 이용하여 조사해본 결과 난황항체를 30,000배 희석 시 교차반응이 없었다. 4. 실험실조건하에서 난황항체의 항원결합능력을 조사한 결과, 동결건조한 WSF을 2${\sim}$4 mg/$m\ell$ 첨가 시 균체의 농도가 $10^9$ CFU/$m\ell$에서 $10^5$ CFU/$m\ell$로 급격하게 감소하였다.
Polyclonal antibodies against human DNA-dependent RNA polymerase II (HPP II) were generated from chicken egg yolk after immunization with RNA polymerase II as an antigen. The antibodies from egg yolk (IgY) were purified and characterized. IgY showed a specificity against DNA-dependent RNA polymerase II, and was a polyclonal antibody against 12 subunits of polymerase II. An amount of 0.35 mg of IgY was obtained freman HPP II-Sepharose affinity column using 10 eggs from a chicken immunized against RNA polymerase II as an antigen. These antibodies can be used for isolating the genes for RNA polymerase II components, and for in vitro transcription assays using HP-RNA polymerase II.
Nagwa S. M. Aly;Hye-Sook Kim;Maysa A. Eraky;Asmaa A. El Kholy;Basma T. Ali;Shin-ichi Miyoshi;Rabab E. Omar
Parasites, Hosts and Diseases
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제61권3호
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pp.251-262
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2023
Schistosomiasis causes significant morbidity and mortality worldwide. This study aimed to assess the effect of schistosomula lung antigen preparation (SLAP) and soluble egg antigen (SEA) on a murine schistosomiasis mansoni model. Ninety laboratory-bred male Swiss albino mice were divided into 6 groups. Two doses of the vaccine were given at 2-week intervals. All mice were subcutaneously infected with 80±10 Schistosoma mansoni cercariae 2 weeks after the last vaccination dose. They were sacrificed 7 weeks post-infection. Parasitological and histopathological studies were conducted to assess the effect of inoculated antigens (single or combined). The results showed that the combination of SLAP and SEA (combination group) led to a significant reduction in worm burden (65.56%), and liver and intestine egg count (59% and 60.59%, respectively). The oogram pattern revealed a reduction in immature and mature eggs (15±0.4 and 10±0.8, respectively) and an increased number of dead eggs in the combination group (P<0.001). In terms of histopathological changes, the combination group showed notably small compact fibrocellular egg granuloma and moderate fibrosis in the liver. A high percentage of destroyed ova was observed in the intestine of the combination group. This study demonstrates for the first time the prophylactic effect of combined SLAP and SEA vaccine. The vaccine induced a significant reduction in the parasitological and pathological impacts of schistosomiasis mansoni in hepatic and intestinal tissues, making it a promising vaccine candidate for controlling schistosomiasis.
만손주혈흠충 충란의 soluble eff antigen (SEA)을 mini-pump를 이용하여 마우스, 복강내에 지속적으로 주입시키면서 말초혈액내의 호산구수 변동, delayed hypersensitivity인 ear swelling test, 간조직병변, 효소 표식면역법을 이용한 혈청내 항체가를 경시적으로 관찰한 결과 다음 성적을 얻었다. 1. 말초혈액 호산구수는 SEA투여후 2~3주후에 최고에 달하였고 그후 서서히 감소하였다. 2. Ear swelling test 실시에서 SEA투여 2주후에 종창이 최고에 달하고 그후 서서히 감소하였다. 3. 간조직병변은 SEA투여후 4주에 육아종형성을 관찰하였고 그후 조직손상이 복귀하였다. 4. 현청에서의 항체가는 SEA투여후 4주후에 양성대조군보다 높았으며 시간이 경과함에 따라 항채가가 증가하였다.
Kim, Mujo;Shinji Higashiguchi;Yoshitomo Iwamoto;Yang, Han-Chul;Cho, hong-Yon;Hsjime Hatta
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제5권2호
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pp.79-83
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2000
A han transfers her serum immunoglobulin G to the agg (IgY) and gives immunity to her offspring. Therefore, The hen agg can be an effective supplier of a large amount of antigen specific antibody that accumulates in the egg yolk. Antigen specific antibody has been widely used for immunological analysis in the field of diagnosis as well as pure scientific research. The production and separation technology of IgY is demonstrated in the present study.
The first purpose of this study was to determine the changes in the allergenicity of milk and egg with heat treatment. The allergenicity of milk and egg is known to have a strong antigen. The second purpose of this study was to observe changes of disestibility of milk and egg after heat treatment. For this study, passive cutaneous anaphylaxis(PCA) inhibition experiment by using guinea pig and nonprotein nitrogen(NPN)experiment were attempted. The result were following: 1. The allergenicity of both milk and egg was reduced by heat treatment. 2. The degree of hydrolysis and PCA inhibition increased with longer heating time. 3. The increse in both the degree of hydrolysis and PCA inhibition of milk was higher than that of egg. 4. Egg contained a greater amount of allergen than milk after heat treatment. 5. The digestibility of both milk and egg was reduced by heat treatment. 6. The digestibility was reduced further by increasing heating time. 7. The digestibility of egg was lower than that of milk after the treatment.
El-Ahwany, Eman;Bauiomy, Ibrahim Rabia;Nagy, Faten;Zalat, Rabab;Mahmoud, Ola;Zada, Suher
Parasites, Hosts and Diseases
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제50권1호
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pp.29-35
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2012
The aim of the study is to characterize the phenotypes of $CD4^+$$CD25^+$ T regulatory cells within the liver granulomas and association with both Foxp-3 gene expression and splenic cytokines. Naive C57BL/6 mice were intravenously injected with multiple doses of the soluble egg antigen (SEA) 7 days before cercarial infection. The immunized and infected control groups were sacrificed 8 and 16 weeks post-infection (PI). Histopathology, parasitological parameters, splenic phenotypes for T regulatory cells, the FOXP-3 expression in hepatic granuloma using real-time PCR, and the associated splenic cytokines were studied. Histopathological examination of the liver revealed remarkable increase in degenerated ova within hepatic granuloma which decreased in diameter at weeks 8 and 16 PI ($P$<0.01). The percentage of T regulatory cells ($CD4^+$$CD25^+$) increased significantly ($P$<0.01) in the immunized group compared to the infected control at weeks 8 and 16 PI. The FOXP-3 expression in hepatic granulomas increased from 10 at week 8 to 30 fold at week 16 PI in the infected control group. However, its expression in the immunized group showed an increase from 30 at week 8 to 70 fold at week 16 PI. The splenic cytokine levels of pro-inflammatory cytokines, IFN-${\gamma}$, IL-4, and TNF-${\alpha}$, showed significant decreases ($P$<0.05) compared to the infected control group. In conclusion, the magnitude and phenotype of the egg-induced effects on T helper responses were found to be controlled by a parallel response within the T regulatory population which provides protection in worm parasite-induced immunopathology.
Roeske, Katarzyna;Stachowiak, Radoslaw;Jagielski, Tomasz;Kaminski, Michal;Bielecki, Jacek
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제28권1호
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pp.122-135
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2018
Listeriolysin O (LLO), one of the most immunogenic proteins of Listeria monocytogenes and its main virulence factor, mediates bacterial escape from the phagosome of the infected cell. Thus, its expression in a nonpathogenic bacterial host may enable effective delivery of heterologous antigens to the host cell cytosol and lead to their processing predominantly through the cytosolic MHC class I presentation pathway. The aim of this project was to characterize the delivery of a model antigen, chicken egg ovalbumin (OVA), to the cytosol of dendritic cells by recombinant Bacillus subtilis vegetative cells expressing LLO. Our work indicated that LLO produced by non-sporulating vegetative bacteria was able to support OVA epitope presentation by MHC I molecules on the surface of antigen presenting cells and consequently influence OVA-specific cytotoxic T cell activation. Additionally, it was proven that the genetic context of the epitope sequence is of great importance, as only the native full-sequence OVA fused to the N-terminal fragment of LLO was sufficient for effective epitope delivery and activation of $CD8^+$ lymphocytes. These results demonstrate the necessity for further verification of the fusion antigen potency of enhancing the MHC I presentation, and they prove that LLO-producing B. subtilis may represent a novel and attractive candidate for a vaccine vector.
An immunological method was developed in this study to quantify reproductive output of the female butter clam, Saxidomus purpuratus. A clam egg-specific polyclonal antibody was developed using the purified butter clam egg as an antigen. An indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) was used in quantitative measurement of the eggs. Size of the butter clam eggs ranged from $70.81{\pm}7.52{\mu}m$ in histology or $88.56{\pm}11.31{\mu}m$ in intact eggs. The predominant egg constituent was protein (37.44%), followed by lipids (11.40%) and carbohydrates (9.68%). The SDS-PAGE showed that the egg proteins are composed of several peptides of molecular weights consisting of 247, 200, 99, 91, 54 and 47 kDa. ELISA indicated that the clams collected from Geoje Island in May 2002 produced 8.2 to 26.8% of their body weight as eggs or 9,307,309 to 31,156,333 with a mean of 16,931,893 eggs per individual clam. The results of this study thus suggest that indirect ELISA using rabbit anti-clam egg IgG as a primary antibody is a rapid, affordable and sensitive method to assess reproductive output of 5. purpuratus and possibly other bivalves using a small amount of eggs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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