Effective micropropagation system via somatic embryognesis was established for a Phytophthora resistant Aralia elata cultivar. Different kinds of growth regulators were needed to induce embryogenic callus with different explant sources. When leaf explants were used, a combination of 2,4-D, TDZ and L-glutamine was needed, whereas when petiole and root explants needed only 1.0 mg/L 2,4-D. Embryogenic callus induction rate under the optimum culture condition was 75.0%, 67.0% and 83.0% from leaf, petiole and root segment, respectively. Somatic embryo germination and plantlet conversion rate appeared to be influenced greatly by various osmoticums. More than 90% of embryos germinated when treated with sucrose, glucose and maltose. However, the highest conversion rate (72%) was recorded on medium with 2% sucrose only. The converted plantlets grew normally on 1/2MS basal medium, were acclimatized on artificial soil mixture and survived more than 95% in the greenhouse condition. The results suggest that the species can be clonally propagated through in vitro culture system via somatic embryogenesis.
This experiment was carried out to determine the effects of genotyes (cultivars) and kinds of cytokinins and concentrations on shoot multiplication of roses (Rosa hybrida) by nodal culture. The results from this study were summarized as follows. Shoot multiplication was significantly affected by genotypes. Most shoots were produced from 'Carl Red 'rather than two other cultivars, 'Golden Emblem' and 'Tineke'. Among 3 cytokinins, BA was more significantly effective for multiplication than two other cytokinins, 2iP and kinetin. However subsequent shoot growth after multiplication was more enhanced by 2iP and kinetin rather than BA. An optimal concentration of cytokinin for shoot multiplication was 1 mg/L in this study but BA at 1-5 mg/L was considered optimal for multiplication ratio itself. Subsequent shoot growth was significantly inhibited by increases in cytokinin concentrations, regardless of kinds of cytokinin.
Spathiphyllum floribundum cv. Cupid was micropropagated on LS medium containing various growth regulators. Shoot tips were cultured on media with different concentrations of thidiazuron (TDZ) or banzyladenine (BA). The medium containing 2.0 mg/L BA was most effective on the shoot multiplication and the formation of adventitious multi-shoot cluster from shoot tips among the different concentrations of TDZ and BA. The combined treatments of BA and paclobutrazol (PBZ) were stimulated the shoot multiplication and the formation of adventitious mu]ti-shoot clusters from shoot tips compared to the ones of BA alone. The adventitious multi-shoot clusters were culled with 5∼7 mm in size and cultured on media with BA or thidiazuron (TDZ). Shoot multiplication and shoot cluster proliferation from the shoot clusters were very favorable on media supplemented with 2.0∼3.0 mg/L BA. The shoots grew and rooted out vigorously on media with 2.0∼3.0 mg/L IBA. The rooted plantlets were acclimatized in the soil mixed with a rate of vermiculite 1 and perlite 1, and survived more than 95% in greenhouse.
You Kyoung Kim;Sug Youn Mo;Su Bin Choi;Han Yong Park
Journal of Plant Biotechnology
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v.50
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pp.155-162
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2023
Radish (Raphanus sativus L.), a root vegetable grown worldwide, is consumed in several ways. In the cross between parental lines to produce F1 seeds of radish, the problem of low purity may arise because of pollen contamination. Therefore, we aimed to establish conditions for callus induction and regeneration so that in vitro cultured plants could be used for the propagation of stock seeds. The most effective hormone combination containing various concentrations of 2,4-D, TDZ, and kinetin was selected for callus induction using radish hypocotyl, and the induced calli were transferred to two types of hormone media to investigate the optimal conditions for shoot regeneration of the callus. The combination of 1 mg/L 2,4-D + 0.05 mg/L kin was the most effective for callus induction of RA2 and RA10, 1 mg/L 2,4-D + 0.1 mg/L kin + 0.025 mg/L TDZ of RA4, and 1 mg/L 2,4-D + 0.2 mg/L kin of RA30. Shoot regeneration of the RA4 callus occurred in both shoot regeneration media, but the frequency was much higher in the 5H+1B medium (1 mg/L NAA + 0.1 mg/L 2,4-D + 1 mg/L IPA + 0.02 mg/L GA3 + 2 mg/L zeatin + 1 mg/L BA). For the in vitro micropropagation of radish, the conditions selected in this study can assist in the propagation and maintenance of stock seeds to produce F1 seeds.
Guzmania was propagated through in vitro culture of lateral shoots. When new shoots grown in greenhouse were cut and cultured in vitro, contamination rate was very high at about 80% in the first stage of in vitro culture. Among cytokinin treatments for agar medium, 2.0 mg/L BA was most effective for shoot multiplication, and those with 0.5 mg/L kinetin and 0.5~1.0 mg/L BA were favorable for shoot multiplication. BA was more effective for shoot multiplication than kinetin, and shoot multiplication was more enhanced when 2.0 mg/L BA was combined with 0.1~0.5 mg/L IAA than 2.0 mg/L BA alone. The medium with 2.0 mg/L BA and 0.1 mg/L IAA showed the highest rate of shoot multiplication with about 8.7 in shoot number, and those with 2.0 mg/L BA and 0.5~1.0 mg/L IAA also resulted in high multiplication of shoots. Shoots were multiplicated more in liquid rotation culture(80 rpm) with the medium containing 0.5 mg/L BA and 0.1 mg/L IAA than liquid stagnating and solid cultures. Regenerated shoots formed roots very favorably in the medium supplemented with 2.0 mg/L IBA.
Kim, Hwa Young;Kang, Sun Pil;Hong, Sae Jin;Eum, Hyang Lan
Journal of Bio-Environment Control
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v.24
no.3
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pp.167-172
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2015
The aim of this study was to develop an effective production system of blueberry plants by using tissue culture technique. Murashige and skoog medium (MS) and woody plant medium (WPM) were compared for shoot formation of highbush blueberries. Also medium supplemented with zeatin/2-isopentenyl adenine (2iP)/benzyl aminopurine (BA) (1, 2/10, 15/4, $6mg{\cdot}L^{-1}$)and zeatin/2iP/BA (0.5/10, 15/$0.05mg{\cdot}L^{-1}$) as plant growth regulators to determine the effect of shoot formation and shoot proliferation, respectively. The shoot explants cultured on WPM showed higher shoot formation rates, more number of nodes, and longer root length than those on MS medium during the primary culture. Shoots were not formed when the explants were cultured on the medium without plant growth regulators or on only BA. The shoot explants cultured on the medium supplemented with 2iP showed low rates of shoot formation. On the other hand, zeatin was the most effective for shoot formation and growth of the explants. Also influence of different cytokinins (zeatin, 2iP) on the shoot proliferation of subcultured shoot explants was studied. There was no significant difference among the different concentrations of zeatin in the rate of shoot formation and number of shoots. However at higher concentration of zeatin, number of nodes was increased, and shoot length was shorted. The proper concentrations of zeatin for shoot propagation in subculture were found to be $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ and $1mg{\cdot}L^{-1}$.
The effects of MS salt strength, sucrose, and cultural conditions on bulblet formation and growth were investigated to optimize the conditions for micropropagating bulblets from in vitro bulb scales of Lilium Oriental Hybrid 'Casa Blanca'. There was no difference on bulblet formation in the range of 1/2~2 $\times$ strength of MS salt, but it was inhibited remarkably in 3 $\times$ strength of MS salt. The growth of regenerated bulblets was most stimulated on MS basal medium. Favorable bulblet formation and its growth from bulb scales were achieved when grown on the media with 1 : 2 or 1 : 3 in the ratio of NH$_4$^+ : NO$_3$^- , as well as on MS basal medium (NH$_4$^+ : NO$_3$^- = about l : 2). Therefore, MS basal medium was very suitable for bulblet formation and growth from bulb scales. Bulblet formation was inhibited but its growth was stimulated with increase sucrose concentration in the medium. The growth of regenerated bulblets was very effective on the media with 9~12% sucrose. Addition of activated charcoal (AC) to the medium inhibited bulblet formation from bulb scales, but enhanced the growth of regenerated bulblets. Especially, the medium containing 1 g/L AC was most effective on the growth of bulblets. No difference was found on bulblet formation and growth from bulb scales under light and dark conditions. In vitro micropropagation of L. Oriental Hybrid 'Casa Blanca' was supposed very reasonable to enhance the growth of the bulblets after forming of bulblets from in vitro bulb scales, and then, subculture the bulb scales from the grown bulblets on MS medium with 9% sucrose and 1 g/L AC.
The axillary buds of 15-year-old Tilia amurensis were cultured on Saito and Ide (IS), Murashige and Skoog (MS) media and woody plant medium (WPM) to establish an effective micropropagation method. Five levels of 6-benzylaminopurine (BAP) were tested. On IS medium and WPM addition of 1.0/l BAP enhanced shoot development and shoot elongation, whereas addition of 0.5/l BAP was effective on MS medium. A better results were obtained from WPM with 1.0/l BAP and MS with 0.1/l BAP. Developed shoots were subcultured on each basal media but with 0.2/l BAP, Multiple shoots were almost doubled in a month. Root formation could be enhanced at higher concentration of indole-3-butyric acid (IBA). Better rooting rate (83.3%) was achieved on a half-strength MS medium with 3.0 /l IBA. Regenerated plantlets were successfully transferred to soil. To investigate the clonal variation in shoot development and shoot elongation by axillary bud culturing, seven plus tree clones were tested, Clonal variation in tissue culturability among plus trees was recognized by the Duncan's multiple range test at the 5% level. Kang Won No. 12 showed the best response on WPM with 1.0/l BAP.
These investigations were conducted to standardize several chemical and physical environments affecting in vitro propagation of gametophytes of Climacium japonicum. Propagation of this moss species was established on basal medium containing Knop macro salts and Nitsch and Nitsch trace elements. Primary cultures were initiated from apical shoots of gametophytes. Gametophyte production was accessed using chopped gametophytes, apical shoots and basal shoots. Seven ty pes of culture media and four concentrations of total nitrogen and five strengths of sucrose were tested for in vitro gametophyte production. Light and temperature factors were also evaluated. Apical shoots were the greatest among three types explants used for gametophyte propagation. Medium containing Knop macro salts and Nitsch and Nitsch trace elements was more effective than other types of media. Higher sucrose concentrations showed a positive effect on the elongation and multiplication of gametophytes. Both nitrogen deficiency and excessiveness inhibited gametophyte growth. Light intensity variation showed highly significant changes in numbers, length and fresh weight of gametophytes. Optimum light intensity for gametophyte growth seemed to be around 3000-4000 lx. Both lower and higher temperature had a negative effect on gametophyte propagation and production. This study will provide large scale and high quality propagules, and effective moss propagation system.
Cho, Kang Hee;Han, Bong Hee;Han, Jeom Hwa;Park, Seo Jun;Kim, Se Hee;Lee, Han Chan;Kim, Mi Young;Kim, Myung-Su
Journal of Plant Biotechnology
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v.45
no.4
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pp.382-391
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2018
The objective of this study was to determine the most effective medium condition of shoot proliferation and root formation for the efficient in vitro micropropagation of M.26 (Malus pumila Mill). Simple sequence repeat (SSR) markers were used to analyze the genetic diversity of micro-propagated and greenhouse grown M.26. Shoot proliferation was carried out in MS (Murashige and Skoog) containing benzyladenin (BA, $0.5{\sim}5.0mg{\cdot}L^{-1}$) and thidiazuron (TDZ, $0.01{\sim}0.1mg{\cdot}L^{-1}$). The highest number of shoots (10.67 shoots per explant) was induced by adding BA at a concentration $1.0mg{\cdot}L^{-1}$. TDZ treatments caused higher hyperhydricity rate in cultured explants than in BA treatments. There was no significant effect of both BA and auxin on shoot proliferation, and the optimum proliferation medium for M.26 was MS medium containing $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ BA. To find a suitable medium composition for shoot rooting, we tested different concentrations indole-3-butyric acid (IBA) and ${\alpha}$-naphthaleneacetic acid ($0.5{\sim}5.0mg{\cdot}L^{-1}$), MS medium (1/4-1), sucrose ($0{\sim}30g{\cdot}L^{-1}$). The shoots showed good rooting on half-strength MS medium containing $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ IBA and $15-20g{\cdot}L^{-1}$ sucrose. The rooting rate (100%), number of roots (10.45 ~ 13.60 roots per explant), root length (7.41 ~ 8.33 cm), and shoot length (4.93 ~ 5.38 cm) were good on this medium. Fifteen SSR primers were detected in a total of 30 alleles in 20 micro-propagated plantlets, all SSR profiles from micro-propagated plantlets were monomorphic and similar to greenhouse grown control plantlet M.26 plant. The results indicated that M.26 micro-propagated plantlets were genetically stable.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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