• 제목/요약/키워드: dismutase

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Streptomyces subrutilus P5의 천연 Fe superoxide dismutase와 N-말단 6xHis-태그가 결합된 Fe superoxide dismutase의 활성비교 (Comparison of enzyme activities of the native and N-terminal 6xHis-tagged Fe supreoxide dismutase from Streptomyces subrutilus P5)

  • 박중호;김재헌
    • 미생물학회지
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    • 제52권2호
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    • pp.230-235
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    • 2016
  • 본 연구는 Streptomyces subrutilus P5의 천연 Fe superoxide dismutase (FeSOD)와 유전자 재조합 기술로 생산된 6xHis-태그가 결합된 Fe superoxide dismutase (6xHis- FeSOD)의 활성을 비교하여 6xHis-태그의 효소에 대한 영향을 알아보기 위하여 수행되었다. 두 효소 모두 최적 pH는 7로 동일하였으나 6xHis-태그에 의해서 pH 범위는 축소되었다. 천연 효소는 pH 4-9의 범위에서 안정성을 보인 반면 6xHis-FeSOD는 pH 9에서 안정성이 상실되었다. 두 효소의 최적 온도는 차이가 없으나 열 안정성에 있어서는 천연 효소는 $40^{\circ}C$ 이하에서 720분까지 안정성을 유지하였으나 6xHis-FeSOD는 $20^{\circ}C$에서도 360분 이내에 활성을 잃는 것으로 나타났다. $H_2O_2$의 6xHis-FeSOD에 대한 저해는 0.5 mM에서 나타났다. 따라서 6xHis-FeSOD는 효소활성은 유지되더라도 열 안정성이 크게 감소되는 결과를 얻었다. 이것은 6xHis-태그가 활성부위 보다는 단백질 전체 구조에 더 많은 영향을 미친 결과라고 생각되었다.

Tricarboxylic acid회로를 차단한 흰쥐의 조직에서 Superoxide Dismutase에 관한 연구 (A Study on Superoxide Dismutase from various Tissue of the Tricarboxylic acid cycle blocked Rat)

  • 김일
    • 미생물학회지
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    • 제23권1호
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    • pp.69-76
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    • 1985
  • $\beta$-fluoroethylacetate를 흰쥐의 복강에 투여하여 krebs cycle이 blocking된 것을 확인하고 이보 인해 각 조직 에서 생성되는 superoxide radical과 SOD의 할성도 변화를 관찰하였다. $\beta$-fluoroethylacetate을 투여한지 1- 3 시간 사이에 모든 장기에서 citrate의 축적농도가 가장 높았으며, 특히 heart외 spleen에서 12배 빛 20배로 가장 높았고, aconltase의 환성도는 한시간 후에 30-35%까지 억제되었고 시간의 경과에 따라 큰 변화는 없었다. 그리고 혈중 glucose의 함량은 계속증가되어 5 시간 후에 612mg/dl로 정상에 비해 1.6배 증가되었다. $\beta$-fluoroe thylacetate을 투여하고 1-2시간 후에 모든 장기에서 superoxide radical이 생성되었고 heart에서는 O. 26$\mu$mole/g호 가장 높았고, SOD의 총활성도는 1-3시간후에 활성이 가장 높았으며, heart에 있는 이 효소가 한 시간후 에 약 4 배로 가장 많이 증가되었다. Mn-SOD는 한시간 후에 모든 조직 에서 증가되였고 Kidney 가 가장 높은 활성도의 변화를 보였다. 이상의 결과로 흰쥐에서 Krebs cycle 이 차단되면 거의 모든 장기에서 superoxide radioal이 생성되며 Cu, Zn 및 Mn- SOD의 활성도가 모두 증가되고 특히 heart에시 가장 큰 변화를 보임을 알 수 있었다.

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농약(제초제)(農藥(除草劑)) Paraquat에 대한 저항성(抵抗性) 식물체(植物體) 선발육성(選拔育成)- 제1보(第1報) Paraquat에 대한 식물(植物)의 내성기작(耐性機作) (Development of Herbicide(Paraquat) Tolerant Plant Through Tissue Culture- 1. Mechanism of Plant Tolerance to Paraquat)

  • 김길웅;김원웅;권순태
    • 한국잡초학회지
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    • 제6권2호
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    • pp.191-200
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    • 1986
  • 1. Paraquat에 대(對)한 식물체(植物體)의 반응(反應)은 상이(相異)하며 감수성(感受性) 정도(程度)에 큰 차(差)가 인정(認定)되었다. injury, discooration, leaf area 및 leaf dry weight 등(等)으로 보아 Kwanggyo, Milyang 등의 콩 품종(品種)은 Hood나 $D_4$에 비(比)하여 내성(耐性)을 보였다. Paraquat에 대(對)한 옥수수품종간(品種間)의 반응폭(反應幅)은 아주 좁았다. 2. 밭에 우점잡초(優占雜草)인 바랭이, 쇠비름, 강아지풀은 paraquat에 감수성(感受性)인데 비(比)하여 마디풀, 명아주, 반하 등(等)은 저항성(抵抗性)을 나타내어 저항성원(抵抗性源)을 제공(提供)하였다. 3. Paraquat의 무독화(無毒化)에 관련하는 peroxidase의 활성(活性)은 Kwanggyo에서 높았으나 무처리(無處理)와 차이(差異)가 작았다. Peroxidase의 동위효소(同位酵素)는 Kwanggyo에 6개(個), Hood에 4개(個)였으며 paraquat을 처리(處理)해도 Kwanggyo의 pattern의 거의 변화(變化)가 없으니 Hood에는 다소(多少) 변화(變化)가 인정(認定)되었다. 4. paraquat에 대(對)한 식물체(植物體) 저항성(抵抗性) mechanism인 superoxide dismutase의 활성(活性)은 paraquat 100ppm 처리후(處理後) 48시간(時間)째 Kwanggyo는 48.6 units/$m\ell$, Hood는 34.2 units/$m\ell$이고 무처리(無處理)는 Kwanggyork 33.0 units/$m\ell$, Hoodsms 34.5 units/$m\ell$로서 SOD의 활성차(活性差)가 감수성(感受性)의 차(差)를 발현(發現)시켰다고 사료(思料)된다. 5. paraquat의 농도(濃度)가 증가(增加)할수록 카루스의 증식(增殖)이 크게 억제(抑制)되었으며 100ppm 처리(處理)에서 Kwanggyo 69.4%, Hood는 92.4%의 억제(抑制)를 보여 Hood가 Kwanggyo보다 약(約) 1.5(培) 감수성(感受性)을 나타내어 superoxide dismutase와 더불어 콩 품종간차(品種間差)를 잘 설명(說明)해 주고 있다.

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Isolation and Characterization of the sod2$^{2+}$ Gene Encoding a Putative Mitochondrial Manganese Superoxide Dismutase in Schizosaccharomyces bombe

  • Jeong, Jae-Hoon;Kwon, Eun-Soo;Roe, Jung-Hye
    • Journal of Microbiology
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    • 제39권1호
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    • pp.37-41
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    • 2001
  • The fission yeast Schizosaccharomyces pombe contains two distinct superoxide dismutase (SOD) activities, one in the cytosol encoded by the $sod2^{+}$ gene and the other in mitochondria. The $sod2^{+}$ gene encoding putative mitochondrial manganese superoxide dismutase (MnSOD) was isolated from the S. pombe genomic library using a PCR fragment as the probe. The nucleotide sequence of the $sod2^{+}$ gene and its flanking region (4051 bp HindIII fragment) was determined. An intron of 123 nt in size was predicted and confirmed by sequencing the cDNA following reverse transcription PCR. The predicted Sod2p consists of 218 amino acid residues with a molecular mass of 24,346 Da. The deduced amino acid sequence showed a high degree of homology with other MnSODs, especially in the metal binding residues at the active site and their relative positions. The transcriptional start site was mapped by primer extension at 231 at upstream from the ATG codon. A putative TATA box(TATAAAA) was located 58 nt upstream from the transcriptional start site and putative polyadenylation sites were located at 1000, 1062, and 1074 nt downstream from the ATG start codon.

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표고버섯 영양요구성 변이주의 전기영동법에 의한 Isozyme 비교 (Electrophoretic Patterns of Isozymes from the Mycelia of the Auxotrophs of Lentinula edodes)

  • 김채균;김병각
    • 한국균학회지
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    • 제25권2호통권81호
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    • pp.85-90
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    • 1997
  • 표고버섯(Lentinula edodes)의 동위효소 양상을 표고 연구의 기초 연구의 일환으로 실시하였다. 균사체의 Tris-HCl 완충액에 용해되는 세포내 효소를 nondenaturing polyacrylamide gel 전기영동 법으로 분리후, peroxidase, esterase, superoxide dismutase, acid phosphatase, alkaline phosphatase, alcohol dehydrogenase, ${\alpha}-amylase$ 효소 활성을 측정하였다. 표고는 peroxidase, esterase, superoxide dismutase, acid phosphatase 활성이 검출되었으며, 본 연구에서 사용한 방법으로 alkaline phosphatase, alcohol dehydrogenase, ${\alpha}-amylase$ 효소 활성은 검출되지 않았다. 표고버섯의 peroxidase, esterase band는 배양 기간에 따라 큰 차이가 없이 안정하였으며, 동위효소는 표고의 유전적 연구 및 원형질체 융합 후 융합체의 특성 연구에 중요하다.

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Molecular Cloning and Expression of Sequence Variants of Manganese Superoxide Dismutase Genes from Wheat

  • Baek, Kwang-Hyun;Skinner, Daniel Z.
    • 한국환경농학회지
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    • 제29권1호
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    • pp.77-85
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    • 2010
  • Reactive oxygen species (ROS) are very harmful to living organisms due to the potential oxidation of membrane lipids, DNA, proteins, and carbohydrates. transformed E.coli strain QC 871, superoxide dismutase (SOD) double-mutant, with three sequence variant MnSOD1, MnSOD2, and MnSOD3 manganese superoxide dismutase (MnSOD) gene isolated from wheat. Although all QC 871 transformants grown at $37^{\circ}C$ expressed mRNA of MnSOD variants, only MnSOD2 transformant had functional SOD activity. MnSOD3 expressed active protein when grown at $22^{\circ}C$, however, MnSOD1 did not express functional protein at any growing and induction conditions. The sequence comparison of the wheat MnSOD variants revealed that the only amino acid difference between the sequence MnSOD2 and sequences MnSOD1 and 3 is phenylalanine/serine at position 58 amino acid. We made MnSOD2S58F gene, which was made by altering the phenylalaine to serine at position 58 in MnSOD2. The expressed MnSOD2S58F protein had functional SOD activity, even at higher levels than the original MnSOD2 at all observed temperatures. These data suggest that amino acid variation can result in highly active forms of MnSOD and the MnSOD2S58F gene can be an ideal target used for transforming crops to increase tolerance to environmental stresses.

Iron Superoxide Dismutase( Fe-SOD)를 생산하는 미생물의 선발 및 배양 (Selection and Cultivation of Microorganism Producing Iron Superoxide Dismutase(Fe-SOD))

  • 이태호;정숙현
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제23권6호
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    • pp.1020-1026
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    • 1994
  • 비교적 연구가 미비한 Fe-SOD의 효소화학적 특성 및 그 생리적 기능을 검토하기 위해 여러 종의 세균을 대상으로하여 Fe-SOD의 고생산균주를 screening하였다. 그 결과 Fe-SOD를 대량 세포내에 생성하는 Pseudomonas polycolor를 선발하여, 이 균주의 효소생산 최적 배양조건을 설정하였다. 본 균주가 생산하는 효소는 특이적인 저해제의 작용양식에 의해 Fe을 cofactor로 요구하는 Fe-SOD임이 밝혀졌다. SOD 생성을 위한 최적배지조성은 glycerin 3%, polypeptone 1%, meat extract 0.5%, KCI 0.2%이었고, 최적 초발 pH는 9.0이었으며, 이 조건에서 500ml용 shaking flask에 배지 100ml를 넣어 15시간 전 후 배양했을 경우가 효소생산량은 최대가 되었다.

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녹차가 전자파 조사 흰쥐 간조직의 Superoxide Dismutase 및 Glutathione Peroxidase 유전자 발현에 미치는 영향 (Effect of Green Tea on Gene Expression of Superoxide Dismutase and Glutathione Peroxidase in Rat Liver Exposed to Microwaves)

  • 최정화
    • Journal of Nutrition and Health
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    • 제33권7호
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    • pp.733-738
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    • 2000
  • The purpose of this study was to investigate the effects of green tea on gene expression of superoxide dismutase(SOD) and glutathione peroxidase(GSH-Px) in rat liver exposed to microwave. Sprague-Dawley male rats with 200$\pm$10g body weight were assigned to normal and microwave exposed groups : microwave exposed groups ; microwave exposed groups were divided two groups : microwave(MW) group which was administrated the distilled water and green tea(GT) group which was administrated the green tea extracts. The rats were irradiated with microwave at frequence of 2.45 GHz for 15 min and then the gene expression in the damaged tissue were investigated at 0.1, 3, 4,6 and 8 days after the microwave irradition to compared with the normal group. The level of SOD gene expression in MW group was lower than the normal group within 6 days but that of GT group as higher than MW group. These results may imply that green tea stimulates SOD expression and there by protecting tissues from free radicals. The GSH-Px gene was expressed a little bit lower than the normal group but that of GT group was expressed to higher lever than MW group from 4 days after irradiation. These results suggest that the administration of green tea extract may activate antioxidative gene expressions such as SOD and GSH-Px in rat and that may help to recover liver tissues from microwave damage by removing hazardous free radicals and oxidized by products from cells.

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Geraniol이 L1210 세포와 ICR 생쥐 대식세포의 증식,Superoxide Dismutase(SOD)와 Inducible Nitric Oxide Synthase(iNOS) 효소활성에 미치는 영향 (Effect of Geraniol on the Proliferation of L1210 Cells and ICR Mouse Macrophages, and the Activities of Superoxide Dismutase (SOD) and Inducible Nitric Oxide Synthase ( iNOS) Activities)

  • 김지연;박시원
    • 약학회지
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    • 제48권6호
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    • pp.309-316
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    • 2004
  • The present investigation was undertaken to find out the anticancer activity of monoterpene compounds. Monoterpenes showed generally the inhibitory effect on the proliferation o f L1210 cancer cells (cytotoxicity). Geraniol was found to exibit the most potent cytotoxic effect on L1210 cells with an IC50 values of $0.67{\mu}g/ml$. On the other hand, geraniol proved to be capable of stimulating the macrophage proliferation (135% of control). When the life prolonging activity of geraniol by daily oral administration of 0.1~10${\mu}g/10{\mu}l/20$ g body weight to Sarcoma 180 bearing ICR mouse was examined, there was also a significant elevation of survival (best result of 134% of control). The contradictory effects of geraniol on the proliferation of L1210 cells and macrophages proved to be accompanied by the coincident alterations of RNS (reactive nitrogen species) related enzymes activities such as inducible nitric oxide synthase (Inos) in macrophages and ROS (reactive oxygen species) related enzymes activities such as superoxide dismutase (SOD) in L1210 cells, respectively.