Cho, Ji-Ho;Kim, Su-Gwan;Park, Byung-Sun;Go, Dae-San;Park, Joo-Cheol;Kim, Do Kyung
International Journal of Oral Biology
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v.40
no.4
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pp.197-204
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2015
MicroRNA (miRNA, miR) is essential in regulating cell differentiation either by inhibiting mRNA translation or by inducing its degradation. However, the role of miRNA in odontoblastic cell differentiation is still unclear. In this study, we examined the molecular mechanism of miR-27-mediated regulation of odontoblast differentiation in MDPC-23 mouse odontoblastic cells derived from mouse dental papilla cells. The results of the present study demonstrated that the miR-27 expression increases significantly during MDPC-23 odontoblastic cell differentiation. Furthermore, miR-27 up-regulation promotes the differentiation of MDPC-23 cells and accelerates mineralization without cell proliferation. The over-expression of miR-27 significantly increased the expression levels of Wnt1 mRNA and protein. In addition, the results of target gene prediction revealed that Wnt1 mRNA has an miR-27 binding site in its 3'UTR, and is increased by miR-27. These results suggested that miR-27 promotes MDPC-23 odontoblastic cell differentiation by targeting Wnt1 signaling. Therefore, miR-27 is a critical odontoblastic differentiation molecular target for the development of miRNA based therapeutic agents in dental medicine.
Embryonic stem (ES) cells are known to have an infinite proliferation and pluripotency that are associated with complex processes. The objective of this study was to examine expression of genes differentially regulated during differentiation of human ES cells by suppression subtractive hybridization (SSH). Human ES cells were induced to differentiate into neural precursor cells via embryoid body. Neural precursor cells were isolated physically based on morphological criteria. Immunocytochemical analysis showed expression of pax6 in neural precursor cells, confirming that the isolated cells were neural precursor cells. Undifferentiated human ES cells and neural precursor cells were subject to the SSH. TPX2 (Targeting Protein for Xklp2 (Xenopus centrosomal kinesin-like protein 2)) was identified, cloned and analyzed during differentiation of human ES cells into neural lineages. Expression of TPX2 was gradually down-regulated in embryoid bodies and neural precursor cells relative to undifferentiated ES cells. Targeting Protein for Xklp2 has been shown to be involved in cell division by interaction with microtubule development in cancer cells. Taken together, result of this study suggests that TPX2 may be involved in proliferation and differentiation of human ES cells.
Kim, Hyun Kyu;Kim, Jung-Hyun;Baek, Hea Ja;Kwon, Joon Yeong
Development and Reproduction
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v.20
no.4
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pp.367-377
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2016
Red spotted grouper, Epinephelus akaara, is a popular aquaculture species and a protogynous hermaphrodite. Induction of artificial sex change at the time of primary sex differentiation is of interest but has not been successful due to the lack of necessary basic information. To find out the potential neuroendocrine influence on the primary sex differentiation, the expression of key genes in the brain was investigated during the formation of ovarian cavity. Expression of cyp19a1b, esr1, gnrhr1, fsh, lh and cga in the brain was positively associated with the formation of ovarian cavity, showing gradual increase as the formation proceeds. However, the expression of gnrh1 was suppressed during the early part of the ovarian cavity formation, signifying potential hypothalamic influence on the primary sex differentiation in this species.
Although it has been reported that lysyl oxidase (LOX) is involved in odontoblastic differentiation, the role of LOX on odontoblastic differentiation by hydrogen peroxide ($H_2O_2$) have not been clarified. In the present study, we investigated whether $H_2O_2$, reactive oxygen species (ROS), is modulated the messenger RNA (mRNA) expression and activity of LOX during odontoblastic differentiation of human dental pulp (HDP) cells. The mRNA expression was quantified by reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis, and LOX enzyme activity was measured by high sensitive fluorescent assay. Expression of the odontoblastic differentiation marker genes were assessed in the presence and absence of specific small interfering RNAs (siRNAs) of the LOX and LOXL. The $H_2O_2$-induced mRNA expression of LOX family was significant reduction of LOX, LOXL, and LOXL3 mRNA levels in HDP cells. LOX enzyme activity was increased at $H_2O_2$ 0.3 mM for 24 hours. The mRNA expression of alkaline phosphatase (ALP), osteopontin (OPN), and osteocalcin (OCN) was inhibited by LOX- and LOXL-specific siRNAs whereas the mRNA expression of dentin matrix protein1 (DMP1), and dentin sialophosphoprotein (DSPP) was inhibited by LOX-specific siRNA. In LOX enzyme activity, siRNA-induced knockdown of both LOX and LOXL inhibited the total amine oxidase activity in HDP cells, as in the case of mRNA expression. In conclusion, the essential role of $H_2O_2$ on odontoblastic differentiation suggests that its regulation by LOX may have pharmacologic importance in HDP cells.
The purpose of this study is to develop basic data for the design of the housing space for unit that factors in the sentiment of the residents by using aesthetic elements and expression method to search for the ways to design housing space for differentiated unit. The results are as follows: First, aesthetic elements in the aesthetic element in the unit housing space for unit can be classified into basic elements and detailed elements. Second, it is possible to classify into distortion, mixing, superposition and juxtaposition methods. Third, use of the 'material' for 'wall' is recommended when designing differentiated housing space by using basic elements. At this time, expression using the method of 'mixing' is effective for inducing differentiation. In particular, elements that can perceive the difference in time are mixed, to add on slight differentiation. Fourth, 'illumination' and 'material' are used when designing differentiated housing space by using detailed elements. Fifth, preference degree of the expression method is manifested differently depending on the selected elements. Lastly, this study conducted a study on the preference level of the aesthetic elements and expression method targeting the experts alone to differentiate the design of the residential space for unit.
The orexin 2 receptor plays a central role in maintaining sleep and wakefulness. Recently, it has been shown that sleep and wakefulness orchestrate the proliferation and differentiation of oligodendrocytes. Here, we explored the role of a selective orexin 2 receptor antagonist (JNJ-10397049) in proliferation and differentiation of neural progenitor cells (NPCs). We evaluated the proliferation potential of NPCs after exposure to different concentrations of JNJ-10397049 by using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5 diphenyl tetrazolium bromide and neurosphere assays. Moreover, the expression of differentiation markers was assessed by immunocytochemistry and real-time polymerase chain reaction. JNJ-10397049 significantly increased the proliferation of NPCs at lower concentrations. In addition, orexin 2 receptor antagonist facilitated progression of differentiation of NPCs towards oligodendroglial lineage by considerable expression of Olig2 and 2',3'-cyclicnucleotide 3'-phosphodiesterase as well as decreased expression of nestin marker. The results open a new avenue for future investigations in which the production of more oligodendrocytes from NPCs is needed.
Park, Jeong-A;Kim, Young-Eun;Seok, Hyun-Jeong;Park, Woo-Youn;Kwon, Hyung-Joo;Lee, Young-Hee
BMB Reports
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v.44
no.3
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pp.176-181
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2011
Inhibiting histone deacetylase (HDAC) activity modulates the epigenetic status of cells, resulting in an alteration of gene expression and cellular function. Here, we investigated the effects of HDAC inhibitors on mouse embryonic stem (ES) cells. The HDAC inhibitors trichostatin A, suberoylanilide hydroxamic acid, sodium butyrate, and valproic acid induced early differentiation of mouse ES cells and triggered induction of heat-shock protein (HSP)70. In contrast, class III HDAC inhibitors failed to induce differentiation or HSP70 expression. Transcriptional upregulation of HSP70 was confirmed by mRNA expression analysis, an inhibitor study, and chromatin immunoprecipitation. HSP70 induction was dependent on the SAPK/JNK, p38, and PI3K/Akt pathways. Differentiation and induction of HSP70 by a subset of HDAC inhibitors was also examined in human ES cells, which suggests that the phenomenon generally occurs in ES cells. A better understanding of the effects of HDAC inhibitors may give more insight into their application in stem cell biology.
The purpose of this research was to investigate effects of baicalin on the differentiation of preadipocytes, 3T3-L1, and to characterize the action of baicalin that affect the responses of 3T3-L1 cells during differentiation. In various culture conditions, effects of baicalin and adrenoreceptor agonists such as phenylephrine(PE) and isoproterenol(IPR) on cell differentiation were examined. Also, effects of the drugs on differentiation, triglyceride(TG) contents, expression of insulin receptor, cAMP contents, the cytosolic $Ca^{2+}$ levels, and amount of calmodulin(CaM) were examined. The results suggest that baicalin has adrenergic receptor blocking activity during the process of differentiation of 3T3-L1 cells and that in the early stage of the adipose conversion, the effect of baicalin on the adipocyte differentiation is mediated by the regulation of insulin receptor expression, but by alterations of the cAMP and the calcium metabolism in the late stage. These results also suggest that the action of baicalin may be significant in the lipid metabolism, lipogenic and lipolytic pathways, of adipose cells.
This study evaluated polymanuronates on the differentiation of 3T3-L1 adipocytes. Polymannuronates increased glucose utilization and reduced the accumulation of triglycerides in the cells. The differentiation showed the same results as Oil red O staining. Also, the polymannuronates inhibited GPDH activity as a result of the restrained adipogenesis promotion process in 3T3-L1 adipocytes. The addition of the differentiation promotion factor to 3T3-L1 promoted the differentiation of adipocytes and increased the expression of the leptin level. However the addition of polymannuronates inhibited differentiation of adipocytes and the leptin secretion level in cells by checking the leptin protein level in the culture media. As well as this, it also inhibited the transcriptional mechanism and leptin mRNA expression. These results suggest that the addition of polymannuronates improves the physiological function of 3T3-L1 cells by reducing the accumulation of triglyceride and GPDH activity, and the repressing expression of leptin at a molecular level.
Human bone marrow-derived mesenchymal stem cells (hBMMSCs) must differentiate into osteogenic cells to allow for successful bone regeneration. In this study, we investigated the effects of different combinations of three soluble osteogenic differentiation-inducing factors [L-ascorbic acid (AC), ${\beta}$-glycerophosphate (${\beta}G$), and bone morphogenic protein-2 (BMP-2)] and the presence of a hydroxyapatite (HA) substrate on hBMMSC osteogenic differentiation in vitro. hBMMSCs were cultured in medium containing various combinations of the soluble factors on culture plates with or without HA coating. After 7 days of culture, alkaline phosphatase (ALP) activity, calcium deposition, and osteoprotegerin (OPG) and osteopontin (OPN) expression were measured. The effects of individual and combined factors were evaluated using a factorial analysis method. BMP-2 predominantly affected expression of early markers of osteogenic differentiation (ALP and OPG). HA had the highest positive effect on OPN expression and calcium deposition. The interaction between AC, ${\beta}G$, and HA had the second highest positive effect on ALP activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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