Background: Culture filtrate proteins secreted by mycobacteria are thought to play an important role in inducing protective immunity and to develop new methods for diagnosing tuberculosis. Methods: A culture filtrate protein of M. avium that was strongly reactive with goat antiserum against M. intracellulare was constructed. Its homologous protein (TB-14) in M. tuberculosis was cloned, expressed and purified. The inductions of IFN-${\gamma}$ stimulated with $10{\mu}g$ of TB-14 recombinant protein and $10{\mu}g$ PPD were estimated by using whole bloods from seven PPD (-) subjects, seven PPD (+) healthy volunteers and nine tuberculosis patients. Results: M. avium culture filtrate protein was confirmed as a hypothetical protein that was termed contig 116. A novel 14-kDa recombinant protein (TB-14) of M. tuberculosis was composed of 148 amino acids, including 30 amino acids of the signal peptide, and it showed 78% homology with M. avium. In the PPD (+) healthy volunteers, recombinant TB-14 protein strongly induced the secretion of IFN-${\gamma}$ in whole blood cultures. Conclusion: These results suggest that TB-14 recombinant protein might play an important role in inducing cell-mediated immunity against tuberculosis. Furthermore, TB-14 protein antigen and its antiserum will be available for the development of new diagnostic tools for tuberculosis.
Lim, So Hee;Koe, Yang Sim;Jo, Dae Sun;Lee, Sin Jae;Hwang, Pyoung Han;Kilgore, P.;Nyhambat, B.;Kim, Jung Soo
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.46
no.12
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pp.1217-1223
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2003
Purpose : This study was conducted to assess clinical practices related to the evaluation and treatment of patients with acute gastrointestinal infection(AGI) in infants and children. This survey also evaluated the current opinion regarding the use of rotavirus vaccine. Methods : This survey was conducted using a self-administered questionnaire provided to 82 pediatricians in private clinics of Jeonbuk province. From April to June, 2002, 63 of 82 pediatricians(76.8 %) responded to the survey. Results : The annual proportion of patients with AGI was 13%. The highest proportion of patients with diarrhea were reported for the months of October through December. For the treatment of diarrhea, pediatricians preferred to prescribe lactobacillus products, oral rehydration solution, enzyme products, anti-emetics, anti-diarrheal formula, nothing by mouth(NPO) and bowel movement inhibitors in descending order of frequency. Most pediatricians(79.4%) prescribed antibiotics in less than 20% of patients with AGI. Amoxicillin was the most commonly prescribed antibiotics followed by trimethoprim/sulfamethoxazole(TMP/SMX) and amoxicillin/clavulanate. Clinical manifestations that pediatricians considered as important factors in prescribing antibiotics were bloody diarrhea, mucoid diarrhea, high fever, persisting disease and abdominal pain. Diagnostic procedures that pediatricians preferred for AGI patients were stool examination(rotavirus antigen, RBC, WBC), abdominal X-ray, and serum electrolytes. Pediatricians had a strong interest in rotavirus vaccine(71.4%). Conclusion : Acute gastrointestinal illness remains a common problem, especially during the winter months in Korea. AGI manifesting as watery diarrhea is appropriately treated with commonly available agents but pediatricians appear ready to consider additional approaches to decrease the sizable disease burden of AGI among children in Korea.
As a part of epidemiologic investigation of tsutsugamushi disease, the wild rodents which were captured in Gyeongnam area were diagnosed with indirect immunofluorescent antibody assay (IFA) and Polymerase Chain Reaction (PCR) to find if they have an antibody against Orientia tsutsugamushi. The conclusion was drawn as followings. (1) The captured 58 wild rodents showed that the subspecies distribution of Apodemus agrarius was 86.2%, Microtus fortis was 8.6% and Crocidura lasiura was 5.2%. (2) The antibody positive rate of O. tsutsugamushi Gilliam, Karp, Karto and Boryong by IFA method was 32.0% in Apodemus agrarius among 50 wild rodents and 40.0% in Microtus fortis among 5 wild rodents, respectively. It was negative in the case of all the 3 Crocidura lasiura. (3) The antibody titers on Apodemus agrarius, Microtus fortis and Crocidura lasiura against Gilliam, Karp, Karto and Boryong were measured between 1:20 and 1:640. The antibody titer against each antigen was in the order Boryong>Gilliam>Karp. (4) O. tsutsugamushi was detected from the blood, spleen and kidney from the artificially infected mice by IFA and PCR. IFA showed the positive response between 3 and 18 days after inoculation. On the other hand, positive response was found from all the samples by PCR. (5) From PCR of the genomic DNA extracted from the blood, spleen and kidney samples of the captured wild rodents, Boryong-specific amplification product with size of 210 bp, which is particular in Boryong, was detected from spleen and kidney samples, but not detected in the blood. (6) Boryong-specific amplification product was detected from spleen and kidney samples which were obtained at 3, 6, 12, 18 and 24 days after the infection with Boryong. But, it wasn't detected from the uninfected samples. (7) From PCR of spleen and kidney samples of the captured wild rodents, it was found that positive rate of O. tsutsugamushi in Apodemus agrarius and Microtus fortis were 25.0% (4/16) and 20.0% (1/5), respectively. From the above results, it can be concluded that Apodemus agrarius resided in Gyeongnam area carried O. tsutsugamushi and PCR method might be a simple, precise, rapid and useful diagnostic tool than IFA for the diagnosis of O. tsutsugamushi.
Proceedings of the Korea Society of Poultry Science Conference
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2003.07b
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pp.37-54
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2003
It has been recognized that the hen. like its mammalian counterparts. provides young chicks with antibodies as protection against hostile invaders. This system facilitates the transfer of specific antibodies from serum to egg yolk. and provides a supply of antibodies called immunoglobulin Y(IgY) to the developing embryo and the hatched chick. The protection against pathogens that the relatively immuno-incompetent newly hatched chick has. is through transmission of antibodies from the mother via the egg. Egg yolk. therefore. can be loaded with a large amount of IgY against pathogens which can immobilize the existing or invading pathogens during the embryo development or in day-old chicks. Thus. the immunization of laying hens to various pathogens results in production of different antigen-specific IgY in eggs. Egg yolk contains 8~20 mg of immunoglobulins (IgY) per $m\ell$ or 136~340 mg per yolk suggesting that more than 30 g of IgY can be obtained from one immunized hen in a year. By immunizing laying hens with antigens and collecting IgY from egg yolk. low cost antibodies at less than $10 per g compared to more than $20.000 per g of mammalian IgG can be obtained. This IgY technology opens new potential market applications in medicine. public health veterinary medicine and food safety. A broader use of IgY technology could be applied as biological or diagnostic tool. nut-raceutical or functional food development. oral-supplementation for prophylaxis. and as pathogen-specific antimicrobial agents for infectious disease control. This paper has emphasized that when IgY-loaded chicken eggs are produced and consumed. the specific antibody binds. immobilizes and consequently reduces or inhibits the growth or colony forming abilities of microbial pathogens. This concept could serve as an alternative agent to replace the use of antibiotics. since today. more and more antibiotics are less effective in the treatment of infections. due to the emergence of drug-resistant bacteria.
Kang, Young Ae;Yoon, Young Soon;Lee, Sei Won;Choi, Chang Min;Kim, Deog Kyeom;Lee, Hee Seok;Ko, Dong Seok;Yoo, Chul Gyu;Kim, Young Whan;Han, Sung Koo;Shim, Young Soo;Yim, Jae Joon
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.58
no.1
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pp.5-10
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2005
Background : A pleural effusion is a common medical problem. Despite several diagnostic tests, 15-20% of pleural effusions go undiagnosed. The aim of this study was to evaluate the clinical characteristics and prognosis of a lymphocyte dominant exudative pleural effusion with a low adenosine deaminase (ADA), low carcinoembryonic antigen (CEA), negative cytology and negative acid fast bacilli (AFB) smear. Method : From Jan 2000 to Aug 2001, 43 patients with lymphocyte dominant exudative pleural effusions whose AFB smear and cytologic exam were negative, their pleural fluid ADA level was < 40 IU/L, and their CEA level was < 10 ng/mL were enrolled in this study. A retrospective analysis of the patients' medical records was carried out. Result : Among 31 of the 43 cases (72%), probable underlying diseases causing the pleural effusion were identified: 21cases of malignant diseases, 4 cases of liver cirrhosis, 2 cases of pulmonary tuberculosis, 1 case of end stage renal disease, 1 case of a chylothorax, 1 case of a post-CABG (coronary artery bypass graft) state, 1 case of a pulmonary embolism. No clinically suspected etiology was identified in the remaining 12 cases (28%). Of these 12 pleural effusions, 7 cases spontaneously resolved, 2 effusions resolved with antibiotics, and the other 2 cases were persistent. Conclusion : Lymphocyte dominant exudative pleural effusions with a low ADA, low CEA, negative cytological exam, and negative AFB smear, but without a definite cause might have a benign course and clinicians can observe them with attention.
Purpose : To retrospectively evaluate the diagnostic performance of dynamic contrast-enhanced MR imaging (DCE-MRI) in detecting recurrent prostate cancer after HIFU of clinically localized cancer, as compared with T2-weighted imaging (T2WI). Materials and Methods: Twenty-six patients with increased prostate-specific antigen levels after HIFU were included in this study. All MR examinations were performed using T2WI and DCE-MRI, followed by transrectal ultrasound-guided biopsy. MRI and biopsy results were correlated in six prostate sectors. Residual or recurrent cancer after HIFU was defined as local tumor progression if biopsy results showed any cancer foci. Two independent readers interpreted the MR images. Results: Of 156 prostate sectors, 51 (33%) were positive for cancer in 17 patients. For detecting local tumor progression, the sensitivity of DCE-MRI and T2WI was 80% and 57% for reader 1 (P < 0.001) versus 84% and 61% for reader 2 (P < 0.001), respectively. The specificity and overall accuracy between DCE-MRI and T2WI showed no statistical difference in both readers (P > 0.05). Interobserver agreement of DCE-MRI and T2WI was moderate and fair, respectively. Conclusion: For detecting local tumor progression of prostate cancer after HIFU, DCE-MRI was more sensitive than T2WI, with less interobserver variability.
Kim, Ho-Joong;Kim, Young-Whan;Han, Sung-Koo;Shim, Young-Soo;Kim, Keun-Youl;Han, Yong-Chol
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.39
no.6
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pp.517-525
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1992
Background: Since its development by Saiki et al, polymerase chain reaction (PCR) has been very useful in various fields of molecular biology. PCR can be used for the detection of a very small amount of microbial agent, and is especially useful in those patients who are difficult to diagnose microbiologically or serologically. Mycobacterium tuberculosis is a very slowly growing organism and AFB staining frequently shows false negative results, and therefore PCR would be a very rapid, easy, and sensitive diagnostic method for the diagnosis of Mycobacterium tuberculosis. Method: To compare PCR with conventional methods in diagnosing Mycobacterium tuberculosis in sputum, we used sputa of patients who visited or were admitted to Seoul National University Hospital. The amplification targets were 383 base pair DNA, a part of 2520 base pair DNA encoding 65 kD Mycobacterium tuberculosis specific protein (the primers are TB-1, -2), and 123 base pair DNA, a part of IS6110 fragment, which multiple copies are known to exsist PCR one genome (the primers are Sal I-1, -2). We also requested AFB staing and culture to the lab of Seoul National University Hospital with the same sample and compared the results. Results: 1) Using TB-1, -2 primers, PCR was positive in 73.1% (19/26) of culture positive sputa, in 12.5% (1/8) of culture negative. but clinically diagnosed tuberculous sputa, and was negative in all sputa of patients who were clinically diagnosed as non-tuberculous etiology. 2) Using Sal I-I, -2 primers, PCR was positive in 94.1% (32/34) of culture positive sputa, in 23.1% (6/26) of culture negative, but clinically diagnosed tuberculous sputa, and was negative in 87.5% (14/16) of sputa from patients who were clinically diagnosed as non-tuberculous etiology. Conclusion: PCR could be a very rapid, sensitive and specific method for the diagnosis of Mycobacterium tuberculosis in sputa, and further studies should be followed for the development of easier method.
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