인삼갈변기작을 연구하기에 앞서 인삼갈변에 따른 갈색도 및 성분변화에 대해 조사한 결과는 다음과 같다. $100^{\circ}C$에서 120시간까지 열처리하여도 갈색화반응은 계속 지속되었으며 갈변에 대한 활성화에너지는 약 16kcal/mole, $Q_{10}$값은 평균치가 $70{\sim}80^{\circ}C$에서는 1.90, $80{\sim}90^{\circ}C$에서는 1.67, $90{\sim}100^{\circ}C$에서는 1.46이었다. 반응액의 pH는 $90^{\circ}C$와 $100^{\circ}C$의 경우 약간씩 증가하는 경향이었다. 인삼사포닌 중에는 ginsenoside-Re가 열에 불안정하였으며 diol계 사포닌은 비교적 열에 안정하였다. 항산화능과 DNA 양성물질량은 온도가 높을수록, 반응시간이 경과할수록 증가하였으며, folin 양성물질량은 반응초기에 단백질의 침전과 함께 감소했다가 서서히 증가하였다.
우리나라 난 재배 농가에서 많이 재배하고 있는 호접란 대만 수입묘의 바이러스 감염 정도를 검정하기 위하여 플라스크묘 상태의 실생 번식 식물체를 공시하여 역전사 중합효소 연쇄반응(RT-PCR) 기술에 의해 CymMV와 ORSV의 감염 여부를 검정하였다. 호접란 식물체의 잎에서 조즙액을 추출하여 RT-PCR을 위한 total RNA로 사용하였다. $42^{\circ}C$에서 45분간 반응시켜 cDNA를 합성하였으며, $96^{\circ}C$에서 2분간 template를 예비 변성시킨 후, $96^{\circ}C$에서 30초간 template 변성, $60^{\circ}C$에서 30초간 primer 부착 및 $72^{\circ}C$에서 1분간 DNA 합성을 1cycle로 하여 총 36cycle을 반응시키고, $72^{\circ}C$에서 10분간 안정화하는 조건으로 one-step RT-PCR을 수행하였다. 바이러스 검정 결과 정도의 차이는 있으나, 40개 시료 모두 CymMV에 감염되어 있었으며, ORSV에 감염된 식물체는 없었다.
조직병리학에서 현미경을 이용한 삼차원적 접근법은, 이차원 단면의 조직 슬라이드에서 박절 과정 중 부차적으로 발생하는 공간정보의 손실로 인하여 확인하기 어려웠던, 조직 내부 분자들의 공간적 배열, 상호결합, 구조적인 형태와 이들의 통합적인 공간적 정보체로서, 조직 내에 복잡하게 얽혀진 다양한 정보를 풀어내는데 있어서 복합적인 데이터를 제시하여 준다. 이광자 현미경(two-photon microscope)과 자동화된 보정환(correction collar)이 탑재된 고성능 대물렌즈의 개발과 같은 광학장비 영역의 발전은 조직투명화 과정을 거치지 않은 두꺼운 시료의 이미징에 있어서 광학적인 이론과 실체 사이에 존재하는 격차를 줄이는데 기여하였다고 할 수 있다. 하지만, 대물렌즈의 길어진 작동범위(working distance)와 최적화된 고강도 레이저의 사용으로 얻게 되는 이점들은 세포 내 각 구성요소의 굴절률(refractive index) 차이로 인하여 증가되는 빛의 분산(light scattering) 현상으로 인해 자연스럽게 감소하게 된다. 조직투명화 기술이 처음 등장하였던 초창기 시도되던 간단한 굴절률 일치화(RI matching) 기법에서부터 현대의 최첨단 통합 조직 투명화 기술에 이르기 까지를 관찰하여 볼 때, 형태학적인 변화없이 조직의 투명도를 높이는 것과, 내재적으로 또는 고정과정 중에 유래되어 혼합된 자가형광 노이즈를 효과적으로 제거하는것이 선명한 이미지를 얻기 위한 주요한 고려대상이라고 할 수 있다. CLARITY는 장비에 기반한 조직투명화 기법으로서 임상 조직병리 실험실에서 처리되는 동결절편과 포르말린에 고정된 검체 모두의 투명화를 위한 실험실 작업흐름(workflow) 통합 및 일상적인 실험절차와 호환이 가능할 것으로 보여진다.
이 연구의 목적은 대장균 분자 샤페론 GroEL의 시험관 내 단백질 접힘에 있어서 반응온도의 영향과 보조샤페론의 필요 여부를 자발적 재접힘이 가능한 온도와 그렇지 않은 온도조건에서 조사하는 것이다. 여러 조건하에서 GroEL에 의한 두 가지 기질 단백질의 재접힘을 반응속도론적으로 조사하기 위하여 GroEL에 의한 단백질 침전생성억제와 변성된 단백질의 재접힘을 광범위하게 조사하였다. 자발적 재접힘이 가능하지 않은 $37^{\circ}C$에서는 ATP와 완전한 GroEL 시스템이 변성된 폴리펩티드의 재접힘을 위하여 필요하다는 것을 확인하였다. 하지만, 자발적 재접힘이 가능한 낮은 온도에서는 자발적 재접힘과 샤페론 의존적 단백질 재접힘이 서로 경쟁하는 것을 알 수 있었다. 따라서 GroEL은 변성된 폴리펩티드의 자발적 접힘 경로를 더 효율적인 단백질 재접힘 경로인 샤페론 의존적 단백질 재접힘 경로로 유도하는 것으로 보인다.
Objectives : The purpose of this study was to investigate the effects of Yanghyuljanggeungunbo-tang(Yangxuezhuangjinjianbu-tang, YGKT) and electrical acupuncture treatment in spinal cord injury(SCI)-induced rats. Methods : The subjects were divided into 5 groups ; Normal, Control-no treatment after SCI, Experimental I(Exp. I)-taken with YGKT 500 mg/kg $0.5m{\ell}$ daily after SCI. Experimental II(Exp. II)-taken with electrical acupuncture after SCI and Experimental III(Exp. III)-taken with YGKT 500 mg/kg $0.5m{\ell}$ and electrical acupuncture after SCI. After each operation, the present author observed cytological changes, the motor behavior recovery and nerve regeneration by analysis of the motor behavior tests, EMG, hematological(AST, ALT, WBC), histological and immunological changes. Rats were tested by Motor behavior test at 1st, 3rd, 7th, 14th and 21st day. Results : 1. All the experimental groups were improved compared with control group in the motor behavior tests including Tarlov test, Basso-Beattle-Bresnahan locomotor rating scale, modified inclined plane test, open field test, grid walk test and narrow beam test. Especially Exp. III was significantly improved among other groups. 2. In EMG test, H and M wave were significantly increased in Exp. III. 3. All the experimental groups were significantly decreased compared with control group in AST, ALT and WBC. 4. NGF, BDNF and Trk B of spinal cord gray matter in all the experimental groups were increased compared with control group. Especially, Exp. III was more effective. 5. In histological observations, muscle contraction and denaturation of gastrocnemius muscle of all the experimental groups were inhibited. Especially, those of Exp. III was more effective. On the observations of liver and kidney, cell atrophy and apoptosis of all the experimental groups were decreased compared with control group. Especially, those of Exp. III was more effective. Conclusions : It can be suggested that YGKT and electrical acupuncture may improve motor behavior, EMG, hematological, histological and immunological findings in SCI-induced rats. Especially, combination of these two treatments will be somewhat better in spinal nerve recovery and motor function improvement.
Objectives : The purpose of this study was to investigate the effects of Yanghyuljanggeungunbo-tang(Yangxuezhuangjinjianbu-tang) and Cervi Cornu Parvum pharmaco-acupuncture in Spinal Cord Injury(SCI)-induced rats. Methods : The subjects were divided into 5 groups ; Normal, Control no treatment after SCI, Experimental I taken with Yanghyuljanggeungunbo-tang (Yangxuezhuangjinjianbu-tang) 500 mg/kg $0.5m{\ell}$ daily after inducing SCI. Experimental II taken with Cervi Cornu Parvum pharmaco-acupuncture at Taegye(KI3) and $Yangnungch{\acute{o}}n$(GB34) after inducing SCI and Experimental III taken with Yanghyuljanggeungunbo-tang(Yangxuezhuangjinjianbu-tang) 500 mg/kg $0.5m{\ell}$ and Cervi Cornu Parvum pharmaco-acupuncture at KI3 and GB34 to SCI-induced rats. After each operation, the present author observed the motor behavior recovery and nerve regeneration by analysis of the motor behavior tests, EMG, hematological(AST, ALT, WBC), histological and immunological changes. Rats were tested at modified Tarlov test at the 1st, 2nd, 3rd, 4th day, and Motor behavior test at 1st, 3rd, 7th, 14th, 21st day. Results : Results are as follows. 1. All the experimental groups were improved compared with control group in the motor behavior tests including Tarlov test, Basso-Beattle-Bresnahan locomotor rating scale, modified inclined plane test, open field test, grid walk test and narrow beam test. Especially Experimental III was improved significantly among other groups. 2. In EMG test, H wave appeared weak only in Experimental III. And M wave was increased significantly in Experimental III. 3. All the experimental groups were significantly decreased compared with control group in serum AST, serum ALT and serum WBC tests. 4. significantly decreased in Tumor Necrosis Factor-${\alpha}$ test compared with the first day of SCI. 5. Muscle contraction and denaturation of all the experimental groups were inhibited in histological observations of gastrocnemius muscle. Especially, those of experimental III was more effective. 6. NGF and BDNF of spinal cord gray matter in all the experimental groups were increased compared with control group. Especially, those of experimental III was more effective. Conclusions : As above, it can be suggested that Yanghyuljanggeungunbo-tang(Yangxuezhuangjinjianbu-tang) and Cervi Cornu Parvum pharmaco-acupuncture may improve motor behavior, EMG, hematological, histological and immunological findings in Spinal Cord Injury(SCI)-induced rats. Especially, effects will be somewhat better in combination of these two treatments.
Heat shock protein 70 (HSP70)은 다양한 질병상태와 치명적인 열 손상에서 세포 및 조직을 보호하는데 중요한 역할을 하며, 또한 외부의 stress로부터 세포내 단백질의 파괴와 변화를 감소시키는 단백질로 알려져 있다. 본 연구에서는 오랜 기간 동안 조혈기관의 치료제로 콩팥에서도 세포보호효과가 있는 것으로 알려진 Erythropoietin(EPO)을 투여하여 콩팥내의 HSP70의 발현변화를 세포수준에서 관찰하고자 하였다. Sprague-Dawley계 흰쥐를 사용하여 전자현미경적 면역조직화학법으로 rHuEPO투여군과 대조군에서 HSP70의 발현변화를 관찰하였다. 대조군에서 HSP70은 콩팥의 바깥수질과 속수질에서 관찰되었으며, 특히 속수질에서 강하게 발현되었고 그 부위는 속수질집합관세포와 헨레고리의 내림가는 부분이었다. EPO 투여군에서는 속수질과 바깥수질의 내림가는 부분에서는 발현변화가 관찰되지 않았으나, 바깥수질의 집합관 세포에서 발현이 급격히 증가함을 관찰되었다. 특히 대조군에서의 핵주변부위뿐 아니라 세포내 핵상부분을 비롯한 세포막주변부위에도 강한 면역 염색성을 나타내었다. 이러한 결과는 콩팥의 바깥수질에서 stress성 단백질인 HSP70의 조절기전이 EPO에 의해 매개됨을 보여주면, 세포 stress및 질병상태에서도 이러한 기전이 작용할 것으로 생각된다.
N-아세틸-ㅣ-페닐 알라닐-ㅣ-페닐 알라닌 메틸 에스테르(APhPhMe)와 N-아세틸-ㅣ-페닐 알라닌메틸에스테르(APhMe) 그리고 N-아세틸-ㅣ- 페닐알라닐-l-알라닌메틸에스테르(APhAlMe)를 모델화합물로 사용하여 단백질 변성을 연구하였다. APhPhMe는 압력이 증가하면 물에서의 용해도가 증가하였고 APhMe는 반대로 크게 감소하였지만 APhAlMe는 측정한 온도에서 거의 변화가 없었다. APhPhMe의 부피 변화는 20, 30, 40, 50$^{\circ}C$에서 각각 -0.9, -1.47, -1.09, -1.52 ml/mole이었고 APhMe는 20, 30, 40$^{\circ}C$에서 +6.0, +7.0, +7.5 ml/mole이었지만 APhAlMe는 세 온도 모두 0에 가까왔다. 이러한 결과를 소수성 상호작용과 펩티드 결합에 의한 수소결합으로 설명하였다. 즉 펩티드 결합만 존재하거나, 비교적 큰 소수성 작용기 1개와 펩티드 결합 1개가 동시에 있을 경우에는 펩티드 결합만 존재하거나, 비교적 큰 소수성 작용기 1개와 펩티드 결합 1개가 동시에 있을 경우에는 펩티드 결합사이의 수소결합이 소수성 상호 작용보다 우세하였고, 펩티드 결합과 소수성 작용기가 동시에 1개씩 증가할때는 소수성 상호작용이 우세한 것 같다.
주입법을 이용하여 AOT 역미셀 용액에 가용화된 BSA를 과잉 수용액으로 역추출할 때 효율에 영향을 미치는 요인들 에 대하여 조사하였다. 특히 수용액의 pH, 수용액에 가한 염 의 종류와 농도, 알코올의 종류에 따른 영향을 검토하였다. 더하여, 역추출된 BSA의 CD 스펙트럼을 원래의 BSA의 CD 스펙트럼과 비교하여 추출공정 중에 발생하는 구조적 변화를 결정하였다. KCI이나 NaCI과 같은 1: 1염을 수용액에 첨가하 면 BSA의 등전점 이상의 pH에서는 거의 100% 역추출 효율을 보였다. 이것은 첨가된 염에 의하여 유발되는 역미셀과 단백질 간의 전기적 상호작용의 변화에 기인한 것으로 추측 된다 $CaCl_2$ 과 $MgCl_2$, 와 같은 1:2염의 경우에는 20% 이하의 역추출 효율을 보였다. 1가 염과 2가 염의 경우 각각 pH=7 과 pH=8에서 최고의 효율을 보였다 표면활성시약으로써 알 코올을 침가하는 경우에는 역추출 효율이 향상됨을 보였다. 과잉 수용액으로 추출된 BSA의 CD 스펙트럼으로부터 추출 공정 중에는 특이할 만한 구조적 변성은 관찰되지 않았으며, 특정된 추출조건에서는 원래의 단백질 보다 높은 활성을 보이기도 하였다.
Lee, Ting Hun;Chua, Lee Suan;Tan, Eddie Ti Tjih;Yeong, Christina;Lim, Chew Ching;Ooi, Siew Yin;Aziz, Ramlan bin Abdul;Aziz, Azila binti;Sarmidi, Mohd Roji bin
Food Science and Biotechnology
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제18권3호
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pp.661-666
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2009
The heat tolerance and the inactivation kinetics of peroxidase (POD) and polyphenol oxidase (PPO) in pineapples (Ananas comosus) were studied in the temperature range $45-95^{\circ}C$. The kinetic parameters, such as deactivation rate constant (k), activation energy ($E_a$), and decimal reduction rate (D) of the thermal inactivation process, were determined. POD in pineapples showed biphasic inactivation behavior at temperatures range $45-75^{\circ}C$ but was monophasic at $85-95^{\circ}C$. This indicate that POD has 2 isozymes, namely heat labile and heat resistant, with $E_a$ of 68.79 and 93.23 kJ/mol, respectively. On the other hand, the heat denaturation of pineapple PPO could be described as simple monophasic first-order behavior with $E_a$ of 80.15 kJ/mol. Thus, the results of this study is useful in blanching technology where it shows a shortened time with higher temperature can be applied. The determination of the heat tolerance and inactivation POD and PPO, at different temperature range as done in the present work, was very important to improve the blanching process. This also will help to optimize the pineapple canning process which is one of the most important food industries in many tropical regions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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