본 연구는 병풀의 초음파 추출 시 용매에 따른 면역활성 증진 효과를 탐색하고자 수행되었다, 각 추출공정의 수율 비교에서 초음파 공정을 병행한 $60^{\circ}C$ 에탄올 추출이 일반 $100^{\circ}C$ 물 추출에 비해 15% 높은 수율을 나타냈으며, 에탄올을 용매로 한 추출이 동일한 조건의 물 추출에 비해 모두 높은 수율을 나타냈다. 이는 용매의 극성과 용출되는 병풀 내 성분의 극성에 기인하는 것으로 사료된다. 인간 정상 섬유아세포인 CCD-986sk를 이용한 세포독성 측정을 통해 모든 병풀 추출물이 32% 이하의 세포독성을 나타냈다. 인간 면역 B, T세포의 생육도 측정에서 초음파를 병행한 $60^{\circ}C$ 에탄올 추출물이 무첨가 대조구에 비해 10%의 증진 효과를 나타내었으며, 면역세포의 cytokine 분비량 측정에서도 IL-6, TNF-$\alpha$의 분비를 각각 $4.86\;{\times}\;10^{-4}\;pg/cell$과 $5.73\;{\times}\;10^{-4}\;pg/cell$로 나타내 증진 효과를 나타냈다. 또한, 초음파 병행 에탄올 시료를 첨가한 면역 T세포의 분비물에 의한 NK 세포 활성에서도 10%의 생육증진효과를 나타내었다. 이를 통해 병풀의 에탄올 추출물이 면역 활성을 가지고 있으며 초음파 공정을 통해 활성의 증진이 나타날 수 있음을 확인하였다. 이는 에탄올 용매를 통해 병풀 유용성분의 용출이 증진되고, 초음파 공정을 통해 병풀 유용 성분의 수율 향상 및 유용성분의 변화, 신규물질 용출 등이 일어나기 때문인 것으로 사료된다.
Purpose: According to the recent studies, it is shown that the polymorphism of Interleukin $1\beta$ gene is associated with the incidence of gastric cancer caused by the Helicobacter pylori infection. Interleukin $1\beta$ is a cytokine markedly inhibiting gastric acid secretion. Interleukin $1\beta$ production associated with Helicobacter pylori gastric infection may exacerbate mucosal damage including chronic gastritis and atrophic gastritis, may induce eventual neoplasia. Among these Interleukin $1\beta$ gene polymorphisms, polymorphisms at -31 portion and -511 portion may associated with these processes, eventually increase the risk of gastric cancer. We investigated the risk of gastric cancer according to the Helicobacter pylori infection and genetic polymorphism of Interleukin $1\beta$ in gastric cancer patients. Materials and Methods: 176 individuals with gastric cancer and 40 healthy controls were analyzed. Each group was divided into two groups whether they infected with Helicobacter pylori or not. DNA was extracted from the peripheral blood in all groups. The PCR-RFLP method was used for investigating the distribution of genotype of C/C, C/T, T/T at -31 portion and -511 portion. Results: T/T genotype at -511 portion was $19.3\%$ in gastric cancer cases and $10\%$ in controls, which was statistically significant. (P=0.0432) The risk of gastric cancer was increased 4.86 ($1.26\∼18.77$) in group which had T/T genotype. In gastric cancer cases, C/C genotype at 31 portion was $27.6\%$ in group with Helicobacter pylori infection and $12.8\%$ in group without infection, which was statistically significant. (P=0.0047) The risk of gastric cancer was increased 4.82 ($1.81\~12.81$) in group which had C/C genotype. Conclusion: T genotype at -511 portion among the Interleukin $1\beta$ genetic polymorphisms may be the risk factor of gastric cancer. And, with Helicobacter pylori infection, C genotype at -31 portion may be the risk factor of gastric cancer.
본 연구는 구중구포법 과정의 흑삼 1~9포를 대상으로 열수 및 70% 에탄올 추출물의 ginsenosides을 분석한 결과 생리 활성이 높다고 판단한 흑삼 5포와 9포 열수 및 에탄올 추출물을 각각 3T3-L1 지방세포, RAW264.7 대식세포, 지방유래 줄기세포에 처치하여 세포독성, 지질축적(adipogenesis) 및 염증인자 변화를 관찰하였다. 본 연구에서는 열수 추출물보다 에탄올 추출물 흑삼에서 효율적으로 ginsenosides가 추출되었다. 또한 흑삼 에탄올 추출물이 $PPAR{\gamma}$ 및 C/$EBP{\alpha}$ 감소, AMPK의 인산화 증가 등 adipogenesis 관련인자를 억제하였으며, 아울러 염증성 사이토카인의 분비를 억제하였다. 따라서 비만 및 대사성 질환의 예방에도 잠정적으로 이용될 수 있을 것으로 기대되지만 ginsenosides와 비만과의 조절기전 연구 및 항염증성 기전 등에 대한 정확한 기전 규명이 필요하다. 현재 인삼에 함유된 ginsenosides를 이용하여 체지방 감소 등의 기능성식품으로 많이 개발되고 있는 현실을 감안해 볼 때 홍삼 및 흑삼의 제조 기술인 구증구포법의 효율적인 표준화 공정기술, 유효 생리활성 성분의 대량 생산 및 안전성 기술 등이 개발된다면 항비만에 대한 고부가 가치 상품개발이 가능할 것으로 기대된다.
Lonicerae Flos containing formulation, Geumeumyoungji-tang (GYT), is an herbal prescription prepared using 5 different herbal drugs, namely, Lonicerae Flos, Ganoderma, Lactucae Herba, Xanthii Fructus, and Smilacis Rhizoma. This study was focused on the investigation of the pharmacological effects of GYT on allergic reactions. As the first step of the study, GYT was administered BALB/c mice which were sensitized by 2,4-dinitrofluorobenzene (DNFB). As the result GYT ameliorated dermatitis provoked by DNFB. The serum IgE level of the DNFB sensitized-mouse was significantly decreased when GYT was administered. In order to confirm the moderating effect of this prescription on allergic reaction, GYT was pretreated to human mast cells (HMC-1) before they were stimulated by phorbol-12-myristate 13-acetate plus calcium ionophore A23187 (PMACI). GYT suppressed secretion of inflammatory cytokines, interleukin (IL)-6 and IL-8, from HMC-1. Additionally, pretreatment of GYT showed regulating effect on COX-2 expression. Collectively, these findings provide insights into the pharmacological actions of GYT as a potential agent for treatment of allergic dermatitis.
Bamboo salt has been used for the purpose of prevention and treatment of various diseases in Korea. Present study was carried out to ascertain the effects of purple bamboo salt upon anti-allergic effect, anti-inflammatory activity and immune-enhance effect as well. Purple bamboo salt significantly inhibited the ear swelling response and histamine release induced by compound 48/80 in mice and rat peritoneal mast cells. Purple bamboo salt (0.01 ∼ lg/kg) also dose-dependently inhibited the passive cutaneous anaphylaxis by oral administration. Purple bamboo salt (1 mg/mL) in hibited phorbol 12-myristate 13-acetate plus calcium ionophore A23187-stimulated tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, interleukin (IL)-1${\beta}$ and IL-6 secretion, by 67.04${\pm}$0.08%, 68.01${\pm}$1.85%, 69.48${\pm}$0.54%, respectively. In addition, purple bamboo salt inhibited the expression of TNF-${\alpha}$ mRNA in HMC-1 cells. Finally, we investigated the effect of purple bamboo salt in the forced swimming test (FST) and the change of purple bamboo salt-mediated cytokine production from MOLT-4 cells. At the 7th, immobility time was significantly decreased in the purple bamboo salt-administration group (35.4 ${\pm}$5.9 s for 1 g/kg) in comparison with the control group (93.2 ${\pm}$ 15.45). After FST, the content of glucose in the blood serum was increased and the levels of blood urea nitrogen, lactic dehydrogenase was decreased in purple bamboo salt-administration group. However, it had no effect on the elevation of CK and TP level. Purple bamboo salt (1 mg/mL) significantly increased the interferon (IFN)-${\gamma}$ and IL-2 level compared with media control (about 3.7-fold for IFN-${\gamma}$, about 3.5-fold for IL-2, p〈0.05) but did not affect the IL-4.
This study was conducted to determine the effects of dietary supplementation of either 100 mg/kg chito-oligosaccharide (COS) or chlortetracycline (CTC) with corn-soybean-fish meal on immunity in broiler chickens. A total of 147 one-day old male broiler chicks were randomly allocated to 3 treatments with 7 replicate pens per treatment and 7 birds per pen. The experimental diets consisted of a control diet based on corn, soybean and fish meal without COS and any antibiotic supplement and similar diets supplemented with either CTC (80 mg/kg from d 1 to 21 and 50 mg/kg from d 22 to 42) or COS (100 mg/kg from d 1 to 42). During the entire experimental period, all birds had ad libitum access to diets and water. The main immune organ indices, T-lymphocyte proliferation, serum cytokine concentrations, serum NO level and serum iNOS activity were measured on d 21 and d 42. On d 21, broilers fed 100 mg/kg COS had improved (p<0.01) indices of spleen, thymus, and bursa of Fabricius compared with the control and CTC birds. Birds receiving 100 mg/kg COS had higher (p<0.05) serum concentrations of $IL-1{\beta}$, IL-6, IgM, NO and iNOS than birds on the control treatment. Serum $Ca^{2+}$ level of birds fed 100 mg/kg COS tended to be higher (p = 0.049) than in birds fed CTC. On d 42, the birds fed 100 mg/kg COS had higher (p<0.05) concentrations of TNF-${\alpha}$ and IgM in serum than birds in both the CTC and control treatments. Birds fed 100 mg/kg COS had a higher concentration of IFN-$\gamma$ than the control group. In conclusion, dietary supplementation of COS appeared to improve the immunity of broilers by promoting the weight of the main immune organs, increasing IgM secretion, stimulating microphages to release $TNF-{\alpha}$, $IL-1{\beta}$, IL-6 and IFN-$\gamma$, and activating iNOS to induce NO.
고혈당으로 유도된 염증반응 모델에서 유황양파즙(onion juice)의 항염증 효능을 평가하였다. 고혈당(HG, 25 mM glucose) 조건하에서 48시간 배양된 THP-1 세포들은 정상혈당(NG, 5.5mM glucose) 조건의 세포들에 비해 유의적으로 낮은 세포 생존율을 보였으나, $50-150{\mu}L$ 유황양파즙을 함께 처리하자 NG군 수준으로 회복되었다. 이는, 유황양파즙이 고농도 당에 의한 세포독성을 완화시켜 주었음을 시사한다. 고혈당으로 유도된 HG군에서 염증성 사이토카인 TNF-${\alpha}$는 NG군의 290% 수준까지 분비되어 유의적으로 증가하였으나, $50{\mu}L$ 유황양파즙 처리로 TNF-${\alpha}$의 분비 수준이 전반적으로 저해되었으며, TNF-${\alpha}$의 발현 수준 역시 낮아져, 유황양파즙이 고혈당에 의한 염증반응을 저해하였음을 시사해 주었다. 이는 유황양파즙에서 보고된 높은 수준의 플라보노이드에 의한 효과로 일부 해석되었다. 본 연구는 식품 섭취를 통한 당뇨 및 당뇨합병증 예방의 가능성을 보여줌으로써, 식이인자의 항염증 효능에 관한 향후 연구들의 기초적 근거 자료로 활용될 수 있다.
본 연구에서는 까마귀쪽나무열매추출물(LJF-HE)의 흰쥐모델에서 인도메타신으로 유발되어지는 위염에 대한 억제효과를 확인하고자 하였다. 까마귀쪽나무열매추출물 투여그룹(LJF-HE-L, LJF-HE-M, LJF-HE-H)에서 염증길이와 위액량이 control 그룹에 비하여 통계적으로 유의하게 감소한 결과를 얻었다. 또한 위액량의 유의적인 감소효과로 위산분비가 억제되어 공격인자 작용이 약해지는 원인과 펩신의 활성도를 낮추는 원인으로 인하여 위염발생을 억제하는 것으로 판단되어진다. 까마귀쪽나무열매추출물(LJF-HE)의 위산 분비 억제 기능은 gastrin 및 histamine에 의해 발현되는 CCK-2r와 H2r 유전자의 발현을 억제하여, gastrin 및 histamine에 의한 위산 생성 단계를 조절하여, proton pump인 H+/K+ ATPase 유전자 발현을 억제시키며, 그 결과로 인하여 위산 분비를 억제하는 것으로 판단되어진다. 그리고 까마귀쪽나무열매추출물은 점액을 증가시켜 위 점막을 보호하는 PGE2의 함량을 높여, 위 점막 보호 기능을 나타내고 있으며, 더불어 염증성 cytokine인 TNF-${\alpha}$와 IL-$1{\beta}$의 생성을 낮춰주어 염증 매개반응을 저해하는 것으로 판단되어진다. 이와 같은 결과를 종합하면 까마귀쪽나무열매추출물(LJF-HE)이 인도메타신으로 유발되어지는 위염에 대한 억제효과가 있는 것으로 판단되었다.
Purpose : This study was carried out to investigate the effects of Gagamdokhwalgisang-Tang on the morphometric changes of femur, and on the hormones and cytokines associated with bone metabolism in overiectomized rats. Methods : Twenty-four female Sprague-Dawley rats were divided into sham operated group(normal) ovariectomized group(control), and treated with extract of GD group(treated). Each group was evaluated the changes of body weight at 0, 3, 6, 8 weeks after ovariectomy. Morphometric analysis(femur weight, femur/body weight ratio, femur ash weight femur ash/body weight ratio cross sectional area of compact bone and concellous bone of femur) and histopathological examination were performed at 8 weeks after ovariectomy. Estrogen, Alkaline Phosphatase(ALP) and cytokine(Tumor necrosis $factor-{\alpha}$, $Interleukin-l{\beta}$, Inerleukin-6) assay were performed at 8 weeks after ovariectomy. Results : 1. The body weight of control and treated group was significantly increased(p<<0.001) compared with the normal group at 8 weeks. 2. The femur weight and femur/body weight ratio of treated group were significantly increased(p<<0.05, p<<0.01) compared with the control group at 8 weeks. 3. The femur ash weight showed no significantly different changes, but femur ash/body weight ratio of treated group was significantly increased(p<<0.05) compared with the control group at 8 weeks. 4. In the cross sectional area of cancellous bone of femoral body, the treated group was significantly increased(p<<0.001) compared with the control group at 8 weeks. 5. The serum estrogen level of treated group showed no significantly different changes compared with the control group at 8 weeks. 6. The serum ALP activity of treated group was significantly decreased(p<<0.01) compared with the control group at 8 weeks. 7. The serum Tumor necrosis $factor-{\alpha}(TNF-{\alpha})$ level of treated group was significantly decreased(p<<0.05) compared with the control group at 8 weeks. 8. The serum $Interleukin-l{\beta}(IL-1{\beta})$ level of treated group was significantly decreased(n<<0.001) compared with the control group at 8 weeks. 9. The serum Interleukin-6(IL-6) level of treated group was significantly decreased(P<<0.01)compared with the control group at 8 weeks. Conclusion : These results indicate that GD inhibits bone resorption in ovariectomized rats. And the major inhibitory mechanism may be related to the inhibitory effects of GD on the secretion of $TNF-{\alpha}$, $IL-1{\beta}$ and IL-6 in the pathogenesis of osteoporosis in estrogen deficient rats.
동결건조된 솔잎(Pinus densiflora needles)으로부터 냉수(PD-CW), 열수(PD-HW)와 메탄올추출물(PD-M)을 분획하여 in vitro에서 Peyer's patch를 경유한 장관면역 활성을 측정한 결과, PD-M 획분에서 유력한 골수세포 증식활성을 나타내었다. 메탄올 추출방법을 확립하기 위하여 MeOH 추출물을 균질화, 교반 또는 환류 등의 방법으로 조제하였을 때, 환류방법으로 조제된 MeOH 추출물에서 유의적(p<0.05)으로 가장 높은 장관면역 활성을 in vitro에서 확인할 수 있었다. 솔잎으로부터 분획된 PD-M을 마우스에 경구 투여하고 Peyer's patch를 분리하여 ex vivo에서의 장관면역 활성도 관찰하였다. 다양한 농도로 1주일 동안 PD-M을 경구투여 한 결과, 1.0 g/kg of BW/day의 용량으로 경구투여 한 C3H/He 마우스의 Peyer's patch로부터 얻은 세포배양 상등액에서 saline 대조군보다 2.5배의 높은 장관면역 활성을 보여주었다(p<0.05). 또한 다양한 농도로 경구투여 된 Peyer's patch 세포의 배양액을 이용하여 측정한 IL-6 생산능은 1.0 g/kg of BW/day의 용량에서 1.13배로 증가하였으나 GM-CSF는 처리 용량에 따라 유의적인 값을 보이지는 않았다. 이러한 결과는 PD-M의 경구투여가 Peyer's patch 세포로부터 GM-CSF와 IL-6 등의 조혈세포 증식인자의 분비를 촉진함을 나타내는 것이며, 이러한 cytokine들이 골수세포 증식의 조절인자로서 작용함을 보여주는 것으로 생각한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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