In order to observe the anticellulolytic localization in the epithelia of the digestive tract such as esophagus, crop, and intestine of a Korean land snail N. samarangae, a cytochemical method and a immunogold labelling method were applied. For the cytochemical study on the cellulase activity, Benedict reaction method applied. And for the immunocytochemical study, the rabbit serum immunoglobuins (IgG) was obtained from the rabbits injected with cellulase which was extracted from body fluid of the snail. The digestive tract tissues of N. samarangae were fixed with 4% paraformaldehyde and 2% OsO4 and embedded in Lowicryl K4M at -40$^{\circ}C$ under UV light (360 nm). The thin sections were loaded on the nickel grids and stained with the serum IgG and protein A-gold complex (particle size: 10 nm). Observations were undertaken with transmission electron microscope (Jeol, JEM-1010). The epithelium of the digestive tract was consisted of five types of cells. In the cytochemical study, the reaction products were found along the periphery of the vacuoles derived from the Bebedict reaction. In the immunocytochemical study, the protein-A gold particles were selectively labelled in Type 1, Type 3 and Type 4 cells in intestinal tissue. membranes of rER, in the surrounding cytoplasm of the rER and secretory granules, and in the apical cytoplasm of the cells. On the material being secreted from the apical cytoplasm was also labelled with the immunogold particles. The all results obtained throughtout present study suggest that the intestinal epithelium of the snail N. samarangae seretes cellulase as one of digestive enzymes.
A cytochemical study by the Benedict's reaction method was conducted to find out the cellulase activity in the digestive organs of Helix aspersa. Out of the all digestive organs, the stomach, the intestine, and the digestive gland showed cellulase activities under the transmission electron microscopy.
Peripheral blood mononuclear cells(PBMNC) of Korean native cattle rosetted with Korean goat erythrocytes(KGRBC) and blood monocytes were evaluated for four cytochemical reactions such as acid phosphatase(ACP), alkaline phosphatase-anti-boby(ALP-Ab), ${\alpha}$-naphthyl butyrate esterase(${\alpha}$-NBE) and peroxidase. The results obtained were as follows; In rosetted cells, the positivities of ACP in E AET-DeX, EA and EAC were 70.3%, 22.4% and 25.2%, those of ${\alpha}$-NB were 27.4%, 44.2% and 79.8%, and those of ALP-Ab were 9.5%, 88.3% and 91.5%, respectively. Whereas, the positivity for Peroxidase in monocytes was 100%. In non-rosetted (remained) cells, the positivities of ACP in E AET+DeX. EA and EAC were 41.4%, 57.2% and 61.9%, those of ${\alpha}$-NB were 38.6%, 16.5% and 18.9% and those of ALP-Ab were 98.2%, 5.3% and 6.3%, in order.
This study was carried out to investigate the localization of lipids and lipase activity with lipid staining and cytochemical technique in endosperm cells of Panax ginseng C.A. Meyer seed. In endosperm cells of indehiscent seed, protein bodies facing the umbiliform layer are different in electron density during the various degraded processes. Gradually, protein matrix near the cell wall was lysed and electron lucent inclusions appeared on umbiliform layer. The protein body with high electron density and the spherosome with low electron density were observed in endosperm cells. As a result of lipid staining, electron density of spherosome is more intense than those of the protein matrix within the protein body in endosperm cells of indehiscent seed. Free spherical spherosomes within the umbiliform layer have a high electron density. The spherical spherosomes were more electron densed and were uniform in comparison with the cytoplasmic proteinaceous granules in endosperm cells of seed with red seed coat. The major component of spherosome was determined to be lipid. Lipase activity occurs in the spherosome and near the endosperm cell wall facing the umbiliform layer. Cytochemical reaction products of lipase were observed in the spherosome membrane and in the inner regions of spherosome. After protein bodies were digested, lipase activities were observed in free spherosomes and near the cell wall of endosperm cells. Umbiliform layer composing of fibrillized wall and digested materials of the endosperm cell showed a little lipase reaction products.
The purpose of this study was to investigate the differentiation and degeneration of neurons in developing chick embryo. The activity of acid phosphatase(ACP) was measured and cytochemical study of ACP and ultrastructural changes were observed in prosencephalon, mesencephalon and rhombencephalon from day 4 to day 19 of incubation. As a result, the activity of ACP of all brain region was tend to increase from day 4 to day 19. On day 13, activities of ACP of mesencephalon and rhombencephalon were increased greatly and activity of ACP was decreased each region on day 17. On electron microscopic examination, the reaction product of ACP were localized at GERL complex, lysosome, Golgi body and vacuoles of neurons. Morphologically, disrupted nuclear envelope, mitochondrial destruction, vacuolization and ribosomal crystalization were observed.
Although various raw plant materials have been demonstrated to exert anti-obesity effects to a greater or lesser extent in both humans and animals when they are used to supplement the diet, it has not been shown extensively that they influence adipocyte cell differentiation involving lipid metabolic gene expressions. Using a well-established 3T3-L1 preadipocyte differentiation system, we decided to look into molecular and cellular event occurring during adipocyte differentiation when raw plant materials aye included in the process, in an effort to demonstrate the potential use of a screening system to define the functions of traditionally well-known materials. To these ends, the effects of ethanol (EtOH) or EtOH/distilled water (DW) extracts of Wax Gourd were examined using cytochemical and molecular analyses to determine whether components of the extracts modulate adipocyte differentiation of 3T3-Ll preadipocytes in vitro. The cytochemical results demonstrated that EtOH or EtOH/DW extracts did not affect lipid accumulation and cell proliferation, although the degree of lipid accumulation was influenced slightly depending on the extract. EtOH extract was highly effective in apoptotic induction during differentiation of 3T3-Ll preadipocytes (p<0.05). Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis of lipoprotein lipase (LPL), Uncoupling protein (Ucp) 2, 3 and 4 also showed that while LPL expression was not influenced, Ucp2, 3 and 4 were up regulated in the EtOH extract-treated group and down regulated in the EtOH/DW extract-treated group. These changes in gene expressions suggest that the components in different fractions of Wax Gourd extracts may modulate lipid metabolism by either direct or indirect action. Taking these results together, it was concluded that molecular and cellular analyses of adipocyte differentiation involving lipid metabolic genes should facilitate understanding of cellular events occurring during adipocyte differentiation. Furthermore, the experimental scheme and analytical methods used in this study should provide a screening system for the functional study of raw plant materials in obesity research.
실험에 사용한 플라나리아는 Dugesia japonica Ichikawa et Kawakatsu로서 핵형분석에 의하여 종을 확인하였다, 이 종의 유조직을 구성하는 세포들의 세포화학적 및 미세구조적 특징을 밝히고자 본 실험을 행하였다. 세포화학적으로 방법으로는 hematoxyline-edsin, periodie, acid-schiff(PAS),PAS-alcian blue 반응 그리고 methylene blue-basic fuchisn 두으로 염색으 시행하였고, 유조직의 미세구조를 투과전자현미경으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 유조직에는 두 조의 유조직 세포 이외에 봉상체형성세포와 종의 호염기성세포, 1종의 호산성세포 그리고 투명과립세포 7종의 과립세포가 관찰되었다. 1.유리유조직세포(Free parenchymal cell): 핵막 바로 주위에 세포질에는 다수의 chromatoid body가 존재하였고 세포질에 비하여 핵은 매우 컸다. 핵질에서는 뚜렷한 인을 관찰할 수 있었고 큰 염색질은 핵질에 균일하게 많이 분포되었다. 2.고정유세포( Fixed parenchymal cell): 이 세포는 불규칙한 모습으로 많은 세포돌기를 내고 있었고, 세포질에는 전자밀도가 매우 낮은 투명질에 과립성소포체, mitochondria 그리고 Golgi체등이 발달되어 었었다. 3.봉상체 형성세포(Rhabdite-forming cell): 세포질에는 전자밀도가 매우 높은 봉상체과립(0.3 x 0.9 $\mu$m)들을 포함하였으며 과립성소포체,mitochondria 그리고 Golgi체 등의 세포소기관도 매우 발달되어 있었다. 4. A형 호염기성과립세포(Basophilic granule cell type A): 세포질내에는 alcian blue에 강한 양성반응을 나타내고 전자밀도가 매우 높은 불규칙한 형태의 과립 (1.4 x 0.7 $\mu$m)들이 밀접되어 있었다. 5. C형 호기성과립세포(Basophilic granule cell type C): 세포질에는 PAS반응에 양성을 나타내는 작은 과립(0.2$\mu$m)들이 분산되어 있었다. 이 유형의 과립들은 근육층에서도 관찰되었다. 6. D형 호기성과립세포(Basophilic granule cell type D): 생긱기관 주위의 유조직에서만 관찰되었으며 세포질에는 PAS반응에 강한 양성을 보이고 또한 약한 eosinophilic도 나타내는 원형의 과립들이 대부분 집단을 이루웠다. 7. E형 호기성과립세포(Basophilic granule cell type E): 생식기관 주위의 유조직내에서만 관찰되었으며, 세포질내에는 PAS양성과립(약0.2$\mu$m)이 극소수 분산되어 있었다. 8. 호산성 과립세포(Eosinophilic granule cell): 세포질에는 eosinophilia를 나타내며, 전자밀도가 매우 높은 구형 또는 불규칙형과립(0.3$\times$0.2-8$\times$0.4$\mu$m)들이 존재하였으며, cisternae가 넓은 과립성소포체도 매우 발달되어 있었다. 9. 투명과립세포(Transparent granule cell): 본 실험에서 실시된 세포화학적 염색반응에서 음성을 나타내는 투명과립을 포함하고 있는 이같은 세포들은 D형 호염기성과립세포 주위에서 주로 관찰되었다.
Garbary, David J.;Deckert, Ron J.;Hubbard, Charlene B.
ALGAE
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제20권4호
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pp.353-361
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2005
Ascophyllum nodosum (L.) Le Jolis has a systemic infection with the ascomycete Mycophycias ascophylli (Cotton) Kohlmeyer and Volkmann-Kohlmeyer with which it establishese a mutualistic symbiosis. In addition, A. nodosum is the host for the obligate red algal epiphyte, Vertebrata lanosa (L.) Christensen. Using light and electron microscopy we describe morphological and cytochemical changes occurring as a consequence of rhizoid penetration of V. lanosa into cortical host tissue. Rhizoids induce localized cell necrosis based on physical damage during rhizoid penetration. Host cells adjacent to the rhizoid selectively undergo a hypersensitive reaction in which they become darkly pigmented and become foci for hyphal development. Light and electron microscopy show that M. ascophylli forms dense hyphal aggregations on the surface of the V. lanosa rhizoid and extensive endophytic hyphal growths in the rhizoid wall. This is the first morphological evidence of an interaction between M. ascophylli and V. lanosa. We speculate that M. ascophylli may be interacting with V. lanosa to limit tissue damage to their shared host. In addition, the fungus provides a potential pathway for the transfer of materials (e.g., nutrients and photosynthate) between the two phototrophs.
The peroxidase activity was localized cytochemically to get an insight into its precise function in lignin biosynthesis. In this work, cerium chloride ($CeCl_3$) was used as a trapping agent for hydrogen peroxide ($H_2O_2$) generated from peroxidase. Seasonal variation of peroxidase activities in cambial region of Populus, Pinus, and Ginkgo was investigated at subcellular levels. Under transmission electron microscopy, electron dense deposits of cerium perhydroxide formed by reaction with $H_2O_2$ were observed in cambium and its immediate derivatives. The staining with $CeCl_3$ in cambium varied with growth seasons. The strongest $H_2O_2$ accumulation, regardless of tree species, appeared in May. Staining pattern of $CeCl_3$ in the cambium of poplar indicated that the production of peroxidase started in March before the opening of buds and reached the highest in May and then declined in August. Ginkgo and Pinus showed relatively late generation of $H_2O_2$ production when compared with Populus. Although Ginkgo and Pinus are classified into gymnosperms, however, the generation of peroxidase production and its duration was different from each other. Little staining appeared in all the tree samples collected in September before falling the leaves.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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