It was known that many beekeepers use some acaricides to protect their bees. Among the acaricides used in bees, amitraz, bromopropylate, coumaphos, and cymiazole were used commonly in Korea. In middle of 2006, Korean government set maximum residual limit (MRL) of amitraz and coumaphos as 0.2 ppm and 0.1 ppm, respectively. Because the environment of bee farm changes every year, it is needed to monitor acaricides in honey continuously. In this work, ten samples of honey collected from local markets and internet in 2011 were tested for determination of the amount of amitraz, bromopropylate, coumaphos and cymiazole by HPLC-DAD. Levels of the acaricide residues found were less than 25 ppb.
Organophosphorus hydrolase (OPH) expressed from recombinant Escherichia coli was used to biodegrade organophosphate insecticide coumaphos which has a very high toxicity in mammalian cells. To improve the productivity of OPH, the effects of nonionic surfactants (Tween 20, PEG 1000) and organic solvents, such as glycerol, propanol, and ethanol, were investigated in the strain culture. The maximum OPH was produced when the 0.25% of Tween 20 and 0.5% of glycerol were added to the medium. As the OPH obtained from disrupt-cell process by ultrasound treatment was used, the biodegradation efficiencies of 0.2, 0.5, 1.0 and 2.0 mM coumaphos were 100, 88, 84 and 78%, respectively. A novel method developed in this study could be applied to the biodetoxification technology in the contaminated region with various coumaphos concentration.
Recently, we reported an improved technology for the degradation of organophosphate nerve agents using whole cells of genetically engineered Escherichia coli that anchored and displayed the enzyme organophosphorus hydrolase on the cell surface. In this paper we report the immobilization of these cells on highly porous sintered glass beads and the subsequent application of the immobilized cell in a continuous-flow packed bed bioreactor for the biodetoxification of a widely used insecticide, coumaphos.
Simultaneous determination of amitraz, bromopropylate, coumaphos, cymiazole and 2,4-dimethylaniline in 200 honey samples purchased in Korea was performed by reversed-phase high-performance liquid chromatography with multiple UV detection. 2% Acetone in hexane was used for a liquid-liquid extraction and 20-40% water in acetonitrile solutions were used as mobile phases. The LOD for the analytes varied between 0.4 and 1.5 $\mu$g/L and the recoveries were yielded between 64 and 94%. Relative standard deviation of the repeatability of the method is less than 15%. Amitraz was not present in amount above 10 $\mu$ g/L and one for coumaphos and cymiazole and two for bromopropylate, and three for 2,4-dimethylanilne were detected in amount above 10 $\mu$ g/ L. Levels of the acaricide residues found were less than 50 $\mu$ g/L.
BACKGROUND: Recently, the widespread distribution of pesticides in the hive has been of concern about pesticide exposure on honeybee (Apis mellifera L.) health. Larval toxicity was adapted to assess the synergistic and antagonistic interaction of cumulative mortality to the honeybee larvae of the four most common pesticides detected in pollen. METHODS AND RESULTS: Acetamiprid($3.0{\mu}l/L$), chlorothalonil ($803.0{\mu}l/L$), coumaphos ($128.0{\mu}l/L$), and tau-fluvalinate ($123.0{\mu}l/L$) were tested in combination; binary, ternary and four component mixture. Larvae were exposed to four pesticides mixed in diet at the average levels detected in pollen. As a result, synthetic toxicity was observed in the binary mixture of acetamiprid with coumaphos. The binary and ternary component mixtures of tested pesticides have mostly demonstrated additive effect in larval bees. The significant antagonistic effects were found in four parings of mixtures including chlorothalonil added to acetamiprid/tau-fluvalinate or acetamiprid/coumaphos/tau-fluvalinate, and tau-fluvalinate added to acetamiprid/chlorothalonil or acetamiprid/coumaphos/chlorothalonil. CONCLUSION: Interactions between combinations of four pesticides showed mostly additive or antagonistic effects in larval bees. Therefore, predicting the larval mortality of pesticides mixtures on the basis of the results of single pesticide may actually overestimate the risk. We suggest that pesticide mixture in pollen be evaluated by adding their toxicity together for complete data on interactions.
This research was carried out to investigate residues of neomycin, streptomycin, dihydrostreptomycin, amitraz, 2,4-dimethylaniline (one of amitraz's metabolites), and coumaphos in honey in order to intensively control their use following the establishment of Korean maximum residue limits (MRLs) for veterinary drugs in honey in 2007. To monitor for residues, 110 honeys and food products with honey were collected and analyzed. The collected honeys included acasia, mixed flower, chestnut, rape flower, jujube, and native types. Neomycin, streptomycin, dihydrostreptomycin, oxytetracycline, and amitraz were not detected among samples. Coumaphos was found in the Korean acasia honey at 0.02 mg/kg, but its concentration was under the MRL (0.1 mg/kg) for coumaphos. According to the results, there were no violations of the Korean MRLs of veterinary drugs in honey.
An analytical method based on solid-phase extraction and gas chromatography / mass spectrometry has been developed for measurement of acaricides (amitraz, bromopropylate, coumaphos, cymiazole, and tetradifon) in honey sample. In the stability test of acaricides in honey, amitraz underwent a rapid degradation into 2,4-dimethylaniline (DMA), 2,4-dimethylphenylformamide (DMPF), and N-(2,4-dimethylphenyl)-N'-methylformamidine (DMPMF), whileas other acaricides were found to be stable even for over three months. Extraction of five acaricides from 5g of honey sample was carried out by liquid-liquid extraction using 20mL of ethylacetate. For purification, Florisil-SPE cartridge with elution of 5mL of n-hexane/ acetone (55:45, v/v) was found to remove interferences effectively. Quantification was performed using gas chromatography / mass spectrometry in the selected ion monitoring mode. Spiking experiments were carried out to determine the recovery, precision, and limits of detection (LODs) of the method. The overall recovery values from honey spiked at 0.02 and 0.20 ${\mu}g/g$ levels, respectively, were found to be greater than 75% for all acaricides. The method detection limits for acaricides were ranged from 0.1 to 3 ppb. The developed method in this study was applied for the monitoring of acaricides in honey products collected from urban markets in Korea.
Four diazinon-degrading bacteria were isolated from agricultural soil by using an enrichment technique. The biochemical analysis and molecular method including RFLP indicated that these isolates were identical, and one strain designated DI101 was selected for further study. Phylogenetic analysis based on 16S rDNA sequencing indicated that the strain DI101 clearly belongs to the Serratia marcescens group. The ability of the strain to utilize diazinon as a source of carbon and phosphorus was investigated under different culture conditions. The DI101 strain was able to completely degrade 50 mg/l diazinon in MSM within 11 days with a degradation rate of 0.226 $day^{-1}$. The inoculation of sterilized soil treated with 100 mg/kg of diazinon with $10^6$ CFU/g DI101 resulted in a faster degradation rate than was recorded in non-sterilized soil. The diazinon degradation rate by DI101 was efficient at temperatures from 25 to $30^{\circ}C$ and at pHs from 7.0 to 8.0. The degradation rate of diazinon was not affected by the absence of a phosphorus supplement, and addition of other carbon sources (glucose or succinate) resulted in the slowing down of the degradation rate. The maximum degradation rate ($V_{max}$) of diazinon was 0.292 $day^{-1}$ and its saturation constant ($K_s$) was 11 mg/l, as determined by a Michaelis-Menten curve. The strain was able to degrade diethylthiophosphate-containing organophosphates such as chlorpyrifos, coumaphos, parathion, and isazofos when provided as a source of carbon and phosphorus, but not ethoprophos, cadusafos, and fenamiphos. These results propose useful information for the potential application of the DI101 strain in bioremediation of pesticide-contaminated environments.
Kim, Jong-Hwa;Moon, Sun-Ea;Kim, Ki-Yu;Jung, You-Jung;Lee, Chang-Hee;Ku, Eun-Jung;Yoon, Mi-Hye;Lee, Jong-Bok
Journal of Food Hygiene and Safety
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v.31
no.2
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pp.94-98
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2016
This study was conducted to establish the simultaneous analysis method for veterinary drug residues in honey by high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry (HPLC/MS/MS). The eleven targeting veterinary drugs with honey test method in Korean Food Standards Codex were divided into Group 1 (streptomycine dihydrostreptomycine, neomycine) and Group 2 (oxytetracycline, enrofloxacin, ciprofloxacin, cymiazole, chloramphenicol, amitraz, coumaphos, fluvalinate) to be analyzed simultaneously. From the results, the retention time (RT) of the targeting drugs was within 15 min, the range of detection limits was 0.0056 to $0.0643{\mu}g/g$ and the range of quantification limits was 0.0169 to $0.1948{\mu}g/g$. The coefficients of determination ($R^2$) for Group 1 ($0.05{\sim}1.0{\mu}g/mL$) and Group 2 ($0.01{\sim}1.0{\mu}g/mL$) were 0.9917~0.9987 and 0.9923~1.000 respectively, and showed the good linearity. The recovery rates for Group 1 (final conc. $0.25{\mu}g/g$) and Group 2 (final conc. $1.0{\mu}g/g$) were 65.1~80.6% and 64.2~90.3% respectively. Also, the analysis results of inter day (n = 3) and intra day (n = 6) RSD (%) for area and retention time showed that the RSD (%) for area and retention time was below 10.92% and 1.57%. Therefore, the simultaneous analysis method of this study is evaluated to be a good test method for veterinary drug residues in honey.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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