Comparative sequence analyses were conducted on complete mtDNA sequences from four small mammal species in Korea and revealed the presence of 30 well conserved sequences in various regions of the complete mtDNA sequences. The conserved sequences were found in 9 regions in protein coding genes, 10 regions in tRNA genes, 10 in rRNA genes, one region in replication origin and 2 regions in D loop. They could be used to design primers for amplifying complete mtDNA sequences of small mammals.
The PRD1 DNA polymerase is a small multi-functional enzyme containing conserved amino acid sequences shared by family B DNA polymerases. Thus the PRD1 DNA polymerase provides an useful model system with which to study structure-functional relationships of DNA polymerase molecules. In order to investigate the functional and structural roles of the highly conserved amino acid sequences, we have introduced three mutations into a conserved amino acid of the PRD1 DNA polymerase. Genetic complememtation study indicated that each mutation inactivated DNA polymerase catalytic activity.
Virus taxonomy was initially determined by clinical experiments based on phenotype. However, with the development of sequence analysis methods, genotype-based classification was also applied. With the development of genome sequence analysis technology, there is an increasing demand for virus taxonomy to be extended from in vivo and in vitro to in silico. In this study, we verified the consistency of the current International Committee on Taxonomy of Viruses taxonomy using an in silico approach, aiming to identify the specific sequence for each virus. We applied this approach to norovirus in Caliciviridae, which causes 90% of gastroenteritis cases worldwide. First, based on the dogma "protein structure determines its function," we hypothesized that the specific sequence can be identified by the specific structure. Firstly, we extracted the coding region (CDS). Secondly, the CDS protein sequences of each genus were annotated by the conserved domain database (CDD) search. Finally, the conserved domains of each genus in Caliciviridae are classified by RPS-BLAST with CDD. The analysis result is that Caliciviridae has sequences including RNA helicase in common. In case of Norovirus, Calicivirus coat protein C terminal and viral polyprotein N-terminal appears as a specific domain in Caliciviridae. It does not include in the other genera in Caliciviridae. If this method is utilized to detect specific conserved domains, it can be used as classification keywords based on protein functional structure. After determining the specific protein domains, the specific protein domain sequences would be converted to gene sequences. This sequences would be re-used one of viral bio-marks.
In fungi known as ascomycetes, ability to mate is controlled by a single mating type (MAT) locus with two dissimilar sequences called idiomorphs carrying genes encoding transcription factors that are unrelated to each other. Fungi requiring strains with different MAT genes to complete the sexual process are heterothallic (self-sterile); species in which as single strain is able to undergo sexual reproduction are homothallic (self-fertile). Previous analysis of sequences from several heterothallic and homothallic species of the ascomycete genus Cochliobolus showed that homothallics evolve from heterothallics and that each known Cochliobolus homothallic species arose independently, from a different heterothallic ancestral species. Here we report detailed comparative analyses of MAT sequences ad their flanking regions, and show that: (1) The level of MAT gene similarity is not correlated with reproductive life style; (2) MAT proteins from all Cochliobolus species are conserved within the transcription factor signature sequences; they are not conserved in the carboxy terminal half of MAT-1, or third of MAT-2, except in those from very closely related species; (3) A gene (ORF1) of unknown function, consistently found on the MAT flank, is more conserved than are the MAT genes themselves; (4) The intergenic sequences diverge sharply among species.
From the sequence alignment of various non-ribosomal peptide synthetases, several motifs of highly conserved sequences have been identified within each domain of peptide synthetases. We designed PCR primers based on the highly conserved nucleotide sequences to amplify and isolate a ∼7.2-kb DNA fragment of the Bacillus subtilis 713 which was isolated and reported to produce an antifungal peptide compound. Nucleotide sequence analysis of 4.8 kb of the predicted amino acids revealed significant homology to various peptide synthetases over the whole sequence and also revealed two amino acid-activating domains with highly conserved Core 1 to Core 6 and spacer motif. This suggests that the isolated DNA fragment is part of a peptide synthetase gene for antifungal peptide.
Together with the previous reports, my computer survey revealed that several bacteria contain six copies of the type group II intron IntA. The sequence analysis of IntAs showed the high level of homology in the nucleotide sequence (91.9-99.8%). The consensus sequence, 2,270 base pair long, was derived from the nucleotide sequences of all IntA members. The size of the open reading frame intA was 502 amino acids long, that is homologous to reverse transcriptase-like proteins encoded within the group II introns. It was reported that EPEC.IntA and Sf.IntA were inserted into IS911 and IS629, respectively. The sequence of the flanking region IntA was analyzed here. The data show the insertion of EC.IntA into IS629, the insertion of EHEC.IntA into IS3, the insertion of Yp.IntA into IS904-like sequence, and the insertion of EK12.IntA into IS911. Interestingly, these IS elements nested by IntAs were the members of IS3 family elements. The sequences of the IS3 members correspond to the OrfB with the DDE motif conserved in retroviral integrases. Alignment of the flanking sequences of IntAs revealed that the flanking regions -25 to + 10 of insertion sites, that are generally believed to be required for the retrohoming, were not strongly conserved. The data presented here suggests that the retrohoming pathway of IntA seems to differ from those of other group II introns.
GnRH (gonadotropin-releasing hormone) is a supreme hormone regulating reproductive activity in most animals. The sequences of amino acid and nucleic acid of GnRH reported up to now are examined from the evolutionary framework of Chordata. All identified GnRH are classified into GnRH1, GnRH2, or GnRH3. In all three forms of GnRH both N-terminal and C-terminal are conserved, which allows for effective binding to their receptors. The three amino acids in the middle of GnRH1 sequence have altered diversely from the primitive Chordata, which is indicative of the adaptation process to the ambient environment. GnRH2 and GnRH3 sequences are well conserved. There are more diverse modifications in the nucleic acids than in amino acid sequence of GnRH1. These variations can result from meiosis, mutation, or epigenetics and indicate that GnRH is the product of natural selection.
We subcloned two chicken H3 histone genes and transfected them into Rat 3 cell line. One contains 300 bp 5' to its cap site and the other contains 130 bp 5' to its cap site when cloned into plasm ids. Both of them showed 5' phase specific expression of their mRNA about 8 fold higher (during 5' phase) than during Gl phase. This means that only 130 bp 5' to its cap site was enough to confer cell cycle regulated expression of the latter gene. The DNA sequences of their 5' flanking region did not reveal any particular homologies or subtype-specific sequences. The DNA sequence data also showed that even though the protein coding regions of the histone genes have been conserved exceptionally well throughout evolution, their 5' untranslated regions have not been conserved as well.
Kim, Gi-Young;Lee, Goang-Jae;Ha, Myung-Gyu;Lee, Tae-Ho;Lee, Jae-Dong
Mycobiology
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v.28
no.1
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pp.11-16
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2000
The nucleotide sequences of the internal transcribed spacer (ITS) regions of the ribosomal DNA including the 5.8S ribosomal RNA gene (rDNA) have been determined for 11 species in order to analyze their intrageneric relationships. The total length of these sequences ranged from 530 nucleotides for Trichoderma reesei KCTC 1286 to 553 nucleotide for Trichoderma koningii IAM 12534. Generally speaking, the length of ITS1 region was about 30 nucleotides longer than that of the ITS2 region. Also, the sequences of 5.8S rDNA were more conserved in length and variation than those of ITS regions. Although the variable ITS sequences were often ambiguously aligned, the conserved sites were also found. Thus, a neighbor-joining tree was constructed using the full sequence data of the ITS regions and the 5.8S rDNA. The Trichoderma genus used to be grouped on the basis of the morphological features and especially the shape of phialides needs to be reexamined. The phylogenetic tree displayed the presence of monophylogeny in the species of Trichoderma. Therefore, it was difficult to distinguish the intrageneric relationships in the Trichoderma genus.
Lee, Kang Seon;Bang, Hyoeun;Choi, Jung Kyoon;Kim, Kwoneel
Molecules and Cells
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v.43
no.4
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pp.331-339
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2020
Genetic modifications in noncoding regulatory regions are likely critical to human evolution. Human-accelerated noncoding elements are highly conserved noncoding regions among vertebrates but have large differences across humans, which implies human-specific regulatory potential. In this study, we found that human-accelerated noncoding elements were frequently coupled with DNase I hypersensitive sites (DHSs), together with monomethylated and trimethylated histone H3 lysine 4, which are active regulatory markers. This coupling was particularly pronounced in fetal brains relative to adult brains, non-brain fetal tissues, and embryonic stem cells. However, fetal brain DHSs were also specifically enriched in deeply conserved sequences, implying coexistence of universal maintenance and human-specific fitness in human brain development. We assessed whether this coexisting pattern was a general one by quantitatively measuring evolutionary rates of DHSs. As a result, fetal brain DHSs showed a mixed but distinct signature of regional conservation and outlier point acceleration as compared to other DHSs. This finding suggests that brain developmental sequences are selectively constrained in general, whereas specific nucleotides are under positive selection or constraint relaxation simultaneously. Hence, we hypothesize that human- or primate-specific changes to universally conserved regulatory codes of brain development may drive the accelerated, and most likely adaptive, evolution of the regulatory network of the human brain.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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