We constructed a micro-patterning system that build patterns on a photoresist coated wafer using laser direct writing system. Confocal microscope system was adapted for real-time auto-focusing of the laser writing lens to generate lines of uniform width.
We demonstrated single-molecule fluorescence resonance energy transfer (FRET) from single donor-acceptor dye pair attached to a DNA with a setup based on a confocal microscope. Singlestrand DNAs were immobilized on a glass surface with suitable inter-dye distance. Energy transfer efficiency between the donor and the acceptor dyes attached to the DNA was measured with different lengths of DNA. Photobleaching of single dye molecule was observed and used as a sign of single-molecule detection. We could achieve high enough signal-to-noise ratio to detect the fluorescence from a single-molecule, which allows real-time observation of the distance change between single dye pairs in nanometer scale.
Collagen can be used in building artificial skin replacements for treatment of burns and towards the reconstruction of bone as well as researching cell behavior and cellular interaction. The strength of collagen in connective tissue rests on the characteristics of collagen fibers. 3D confocal imaging of collagen fibers enables the characterization of their spatial distribution as related to their function. However, the image stacks acquired with confocal laser-scanning microscope does not clearly show the collagen architecture in 3D. Therefore, we developed a new method to reconstruct, visualize and characterize collagen fibers from fluorescence confocal images. First, we exploit the tensor voting framework to extract sparse reliable information about collagen structure in a 3D image and therefore denoise and filter the acquired image stack. We then propose to segment the collagen fibers by defining an energy term based on the Hessian matrix. This energy term is minimized by a min cut-max flow algorithm that allows adaptive regularization. We demonstrate the efficacy of our methods by visualizing reconstructed collagen from specific 3D image stack.
최근 생체의 단층영상 촬영기법으로 각광을 받고 있는 OCT (Optical Coherence Tomography)는 백색광 간섭계를 근간으로 하여 생체의 깊이 정보를 얻어낸다. 2-D 또는 3-D의 입체영상을 얻기 위해서는 1축 또는 2축의 횡방향 스캔이 필요하다. 횡방향 스캔 기법은 SEM (Scanning electron microscope)이나 공초점현미경 (Confocal microscope) 등에서 널리 사용되고 있으므로 기술적인 흥미는 적으나 축방향 (깊이 방향)의 정보 취득 방법은 OCT만의 특징으로 아직 기술적으로 해결 되어야될 부분이 많다. (중략)
Dental Caries which has high prevalence rate, accounts for majority of dental diseases. Many treatment and preventive treatment has been developed, thereby reducing the prevalence rate, but in our country, fluoridization has not spread widely yet, so prevention has not been done satisfactorily. When dental caries progresses, irreversible damage of tooth structure occurs. In initial dental caries, demineralizing tooth structure can be remineralized, so restorative treatment is unnecessary. In this study, 20 teeth restored with composite resin without fluoride release were used and divided into two groups. Incipient dental caries were artificially made and demineralization procedure was done for 1 and 2 weeks, for each group. Changes in mineral contents around the margins were analysed with confocal laser scanning microscope. The results were as follow. 1. Both total fluorescence of the lesion and average fluorescence of the lesion of remineralized samples decreased compared to demineralizing state. (p<0.01) 2. Confocal laser scanning microscopy can be used in quantitative analysis of mineral change. In result, confocal laser scanning microscopy can be used in quantitative analysis of mineral change and it could be used in many different fields of dentistry in the future.
미분간섭현미경법과 아크리딘-오렌지(acridine-orange) 형광 염색을 이용하여 쥐 혈관 내의 실 모양 구조물을 관찰하였다. 공초점현미경법과 헤마톡실린-에오신(hematoxylin-eosin) 염색을 통해 피브린, 모세혈관, 소정맥, 소동맥 혹은 림프관의 핵 분포와 뚜렷이 구별되는 혈관 내 실 모양 구조물의 핵 분포 패턴을 얻어낼 수 있었다. 이 실 모양 구조물의 생리적 기능을 침술과 연관하여 논의하였다. 특히, 이 실 모양 관을 통한 약물의 흐름이 약침의 기전에 해당할 것이라는 가설을 제기하였다.
본 연구의 목적은 돼지난자의 체외성숙, 수정 및 단위발생시 일어나는 표층과립의 분포를 살펴보고, 그것들의 역할을 규명해 보고자 실시하였다. 난자의 표층과립은 형광염색을 실시한 후 laser scanning confocal microscope를 이용하여 관찰하거나 transmission electron microscope를 사용하여 관찰하였다. Germinal vesicle 단계의 돼지난자에서는 표층과립은 난자피질에 비교적 두꺼운 형태로 발견되었는데, germinal vesicle breakdown이 일어난 직후 피질 부근으로 표층과립의 움직임이 관찰되었다. Microfilaments의 중합화를 방해하는 cytochalasin B를 처리하였을 때 표층과립의 움직임은 관찰되지 않았다. 무 처리군의 수정 및 단위발생을 유도한 난자에서는 표층과립 내용물들이 위란강내에 균질하게 관찰되었으나, cytochalasin B를 처리한 난자에서는 비정상적인 cortical granule의 움직임을 관장하고 이러한 움직임이 수정시 다정자 침입을 막고 표층과립 반응에 영향을 미치는 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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