Escherichia coli F plasmid partition apparatus is composed of two trans-acting proteins (SopA and SopB) and one cis-acting DNA sequence (sopC). The SopB-sopC complex has been suggested to serve a centromere-like function through its interaction with chromosomally encoded proteins which remain to be identified. In this paper, we are introducing a new yeast 1.5-hybrid system which assembles the two-hybrid and one-hybrid system as a mean to find and additional component of the F plasmid partition system, interacting with DNA (sopC)-bound SopB protein. The results indicates that this system is a promising one, capable of selecting an interacting component.
Lipopolysaccharide (LPS) and cell wall protein-A (CWP-A) were extracted from the cell wall of Vibrio vulnificus, Escherichia coli and Salmonella typhimurium. LPSs and CWP-As were injected into rat and the changes of the following blood components were examined. The change of the number of white blood cell (WBC), red blood cell (RCB), platelet (PLT), blood urea nitrogen (BUN) and blood glucose in rat blood and interferon (IFN) activity change by LPS and CWP-A were measured. WBC, RETI, PTT, and BUN were increased and RBC and blood glucose were increased slightly, but PLT was decreased.
본(本) 실험(實驗)은 대두(大豆)의 성숙중(成熟中) 종실(種實)의 발육(發育)과 단백질(蛋白質) 및 그 구성분(構成分)의 변화(變化)에 관한 고저단백질(高低蛋白質) 품종간(品種間)의 생리적(生理的) 차이를 밝히고자 고단백품종(高蛋白品種) 서해(西海)20호(號), 중단백품종(中蛋白品種) 광교(光敎) 및 저단백품종(低蛋白品種) Shelbv를 공시(供試)하여 종실(種實)의 발육상황(發育狀況), 단백질(蛋白質) 및 지방함량(脂肪含量) 변화(變化), disc polyacrylamide gel 전기영동법(電氣泳動法)에 의한 단백질구성분(蛋白質構成分)의 조성변화(組成變化) 등을 조사(調査)하였던 바 그 결과(結果)를 요약(要約)하면 다음과 같다. 1. 대두(大豆) 종실(種實)은 대체(大體)로 개화후(開化後) 22일(日)까지 완만(緩慢)히 그 이후(以後) 20~30일간(日間) 직선적(直線的)으로 급속(急速)히, 그후 5~15일간(日間) 서서히 건물중(乾物中)이 증가(增加)되어 최고(最高)에 달하며, 개화후(開化後) 12일(日)부터 27일(日)까지 단백질함량(蛋白質含量)은 급속(急速)히 감소(減少)되는 반면에 지방함량(脂肪含量)은 급격(急激)히 증가(增加)되고 그 후부터 개화후(開化後) 40~47일(日)까지는 단백질(蛋白質)과 지방함량(脂肪含量) 모두 서서히 증가(增加)된 후 성숙기(成熟期)까지 큰 변화(變化)가 없었다. 2. 고단백품종(高蛋白品種) 서해(西海)20호(號)는 광교(光敎) 및 Shelby에 비해 전(全) 성숙기간(成熟期間)에 대한 비율(比率)로 보아 성숙초기(成熟初期)의 단백질(蛋白質) 함량(含量) 감소기간(減少期間)이 짧고 감소율(減少率)도 적었으며 그후 단백질함량(蛋白質含量) 증가기간(增加期間)이 길고 증가율(增加率)도 큰 특성(特性)을 보였으나, 지방(脂肪) 축적(蓄積)은 일찍 정지(停止)되었다. 3. 저단백(低蛋白) 고지방품종(高脂肪品種) Shelby는 서해(西海)20호(號) 및 광교(光敎)에 비해 전(全) 성숙기간(成熟期間)에 대한 단백질함량(蛋白質含量) 감소기간(減少期間)이 길고 증가기간(增加期間)은 짧았으며, 지방함량(脂肪含量)의 증가기간(增加期間)이 특히 길었다. 4. 종실(種實)의 성숙과정중(成熟過程中) 단백질구성분(蛋白質構成分)의 변화양상(變化樣相)은 품종간(品種間) 차(差)가 뚜렷하였고, 완숙종실(完熟種實)의 단백질구성분(蛋白質構成分)들이 모두 출현(出現)하는 시기(時期)는 종실(種實)의 단백질함량(蛋白質含量) 감소(減少)가 끝난 시기(時期)와 대체(大體)로 일치(一致)되었으며, 상대이동도(相對移動度)가 가장 작은 단백질(蛋白質)(a'=Rm 0.03)이 개화후(開花後) 17일(日)까지는 존재(存在)하였으나 그 이후(以後)에는 없었다. 5. 고단백품종(高蛋白品種) 서해(西海)20호(號)는 광교(光敎) 및 Shelby에 비해 단백질구성분(蛋白質構成分) a($a_1+a_2+a_3$)의 조성비율(組成比率)이 성숙초기(成熟初期)에서부터 계속 높았고 개화후(開花後) 47일(日)까지 계속 증가(增加)되었으나, 광교(光敎)와 Shelby에서는 구성분(構成分) a의 조성비율(組成比率)이 개화후(開花後) 27일경(日頃) 이후(以後) 거의 변화(變化)되지 않았다.
본 연구에서는 오징어를 주원료로_하여 제조한 식해의 숙성과정증 수분함량 및 속성온도에 따른 단백질화학적 변화를 검토하였다. 속성과정중 pH의 변화는 수분함량 및 숙성온토가 높을 수록 빠르게 저하되었으며 이에 따른 산도의 변화도 빠르게 증가되었다. 또한 젖산균의 생성속도에 있어서도 수분함량 및 숙성온도가 높을수록 빨랐다. 한편 숙성과정중의 오징어 근단백질의 subunit 조성의 변화는 식해의 제조과정중 MHC에 상당하는 성분은 완전히 소실되었으며, 그 후 숙성기간이 경과함에 따라 A에 상당하는 성분도 서서히 소실되었다. 이와같은 결과는 적어도 숙성초기가지는 오징어육의 자가분해효소에 의한 것으로 숙성초기까지는 오징어의 자가분해효소에 의한 것으로 사료되며, 그후의 단백질의 분해과정은 숙성 진행과 함께 숙성 관여미생물 성장에 의해 생성되는 protease 및 오징어육 자체내 산성 protease에 의한 것으로 생각되었다.
The physicochmical properties of recombinant hepatitis B surface antigen (r-HBsAg), which was expressed in C127 mammalian cell were studied. Using roller bottle culture in DMEM supplemented with fetal bovine serum, 10-15 mg/L of r-HBsAg was produced with about 31% of purification yield. The purity of r-HBsAg by HPLC was 99.8% and electron microscopic examination showed homogeneous spherical particle with 22 nm in diameter, a morphological characteristic of HBsAg. The density of r-HBsAg by CsCI density gradient method was 1.19g/ml and the isoelectric point by Mono $P^{TM}$ HR 5/20 column was 4.6. The analysis of subunit protein pattern using SDS-PAGE followed by scanning densitometry gave 81.3% of S protein and 18.7% of pre-S protein. fluorophore-assisted-carbohydrate-electrophoresis analysis showed the relative amount of carbohydrate to protein was 1.7% and it smajr component was N-acetyl glucosamine, which was about 39% of total carbohydrate. The relative amount of lipid to protein determined by vanillin phosphoric acid method was 32.5% and its major component was phospholipid, which was about 70% of total lipid. The physicochemical properties of C127 mammalian cell-derved r-HBsAg are similar to those of p-HBsAg, suggesting that the r-HBsAg can be used in developing a new preventive vaccine against hepatitis B.
The aim of the present study was to evaluate the effectiveness of Lycium barbarum polysaccharide (LBP) on lipid oxidation and protein degradation in Tan sheep meatballs during the frozen period. The meatballs were treated with LBP at 0.01%, 0.02%, and 0.03% and stored at -18±1℃ for 0, 3, 6, 9, and 12 weeks. The effects of LBP treatment were investigated using the contents of total volatile basic nitrogen (TVB-N), texture profile (TP), thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), colour, and pH values, compared with 0.02% butylated hydroxytoluene treatment and the blank control. The results showed that LBP treatment significantly decreased TBARS content compared with the control, which confirmed LBP to be a highly effective component in preventing lipid oxidation of Tan sheep meatballs during frozen storage, and protein degradation in Tan sheep meatballs had a significant inhibition effect because of TVB-N value reduction. In addition, the colour, TP and pH values of meatballs treated with LBP were improved dramatically. To further determine the quality changes of the blank control and all treated groups during storage, the comprehensive score evaluation equation based on principal component analysis was obtained: Y=0.51632Y1+0.29589Y2 (cumulative contribution rate=81.221%), and the 0.02% LBP-treated group had a higher comprehensive score than the other groups, and the quality of LBP-treated meatballs was better as well. In summary, LBP may reduce or inhibit lipid oxidation and protein degradation, and enhance overall quality and shelf-life in prepared meat products.
Kim Ji Eun;Kim Eun Jeong;Rhee Won Jong;Park Tai Hyun
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제10권4호
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pp.353-356
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2005
The effect of silkworm hemolymph on the expression of recombinant protein in Escherichia coli was investigated. The addition of silkworm hemolymph to the culture medium increased the production of recombinant $\beta$-galactosidase in E. coli. The production was dependent on the concentration of the added silkworm hemolymph, which increased 2-, 5-, and 8-fold in media supplemented with 1, 3, and $5\%$ silkworm hemolymph, respectively. To identify the effective component, the silkworm hemolymph was fractionated by gel filtration column chromatography. A fraction, with a molecular weight of about 30 K was identified as the effective component.
A phylogenetic comparison of homologous protein can often supplement genetic and biochemical analysis by revealing conserved structures that are critical for function(Waugh et al., 1989). I therefore isolated a secY homologue from B. subtilis, a gram positive bacterium evolutionary distant from E. coli. The comparison and interplay between these two bacterial systems should contribute greatly to our understanding of the functions and interactions within systems evolved for protein translocation in both prokaryotic and eukaryotic organisms.
Protein kinase는 진핵생물과 원핵생물을 포함하는 모든 생명체에서 세포생존에 절대적으로 중요한 조절 기능을 담당한다. 일반적으로 원핵생물은 histidine 과 aspartic acid kinase로 구성된 bacterial two-component regulatory system에 의하여 환경변화에 따른 유전자의 발현이 조절되지만, 방선균을 비롯한 고등 원핵생물에서는 진핵생물성의 serine/threonine kinase들이 세포분화와 같은 분화과정을 조절하고 있다. Streptomycin 생산균인 Streptomyces griseus 균주에서도 다양한 serine/threonine kinase들이 존재하는 것으로 추정되며, 이들의 기능을 밝히는 것은 생명현상을 이해하는 중요한 열쇠를 제공해 줄 것으로 기대된다. 따라서, S. griseus로부터 protein kinase 를 동정하는 연구를 실시하였으며, 기존의 복잡한 chromatography법의 단점을 보완하기 위해 anti-phosphothreonine, anti-phosphoserine, anti-phosphotyrosine antibody를 이용한 immunoaffinity column chromatography 방법을 도입하였다. 실험 결과 약 14, 29, 31, 35, 40, 52, 56, 60 kDa의 단백질을 효과적으로 동정 할 수 있었으며, nonradioactive protein kination assay 방법으로 이들의 인산화능을 확인하였다.
본 연구에서는 국내에서 반추가축용 조사료 원으로 많이 사용하고 있는 화본과 수입조사료 6종(bermuda grass hay, klein grass hay, oat hay, orchard grass straw, tall fescue straw and timothy hay)에 대하여 최근 NRC의 nutrient requirements of daily cattle(7th revised edition, 2001)에서 권장하는 사료의 영양성분 분석방법에 따라 일반조성분과 함께 heat-stable $\alpha-amylase$ treated neutral detergent fiber (aNDF), acid detergent fiber (ADF), acid detergent lignin(ADL), neutral detergent insoluble crude protein(NDICP)과 acid detergent insoluble crude protein(ADICP) 등의 함량을 분석하고 영양성분간의 Pearson의 상관계수를 산출하였다. 조사료에 따라 다소 차이는 있으나 oat hay는 CP와 NDICP(p<0.05), CP와 ADICP(p<0.01)의 상관관계가 높게 나타났고, orchard grass straw는 CP와 NDICP의 상관관계가 높게 나타났다(p<0.05). Tall fescue straw도 CP와 NDICP의 상관관계가 높게 나타났으며(p<0.01), timothy hay는 CP와 ADICP의 상관관계가 높게 나타났다(p<0.05). Klein grass hay는 CF와 aNDF (p<0.01), oat hay는 CF와 ADF(p<0.05), orchard grass straw는 CF와 ADL(p<0.05), tall fescue straw는 CF와 aNDF(p<0.01), CF와 ADF(p<0.01), timothy hay는 CF와 aNDF(p<0.01), CF와ADF(p<0.05), CF와 ADL(p<0.01)에서 높은 상관관계를 나타내었다. 이렇게 영양성분 간에 상관관계가 높은 성분들 간에는 앞으로 조사료의 영양성분에 영향을 미치는 제 요인들을 고정하여 상관관계를 조사하고, 분석점수를 많이 하여 회귀식을 만들 수 있다면 수입조사료 평가에 실질적인 적용이 가능할 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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