• 대한치과마취과학회지
• /
• 제14권1호
• /
• pp.41-47
• /
• 2014

Background: Autophagy is a self-eating process that is important for balancing sources of energy at critical times in development and in response stress. Autophagy also plays a protective role in removing clearing damaged intracellular organelles and aggregated proteins as well as eliminating intracellular pathogens. The purpose of the present study was to examine the protective effect of propofol against hypoxic damage using keratinocytes. Methods: Human keratinocytes (HaCaT cells) were obtained from the American Type Culture Collection. Propofol which were made by dissolving them in DMSO were kept frozen at $-4^{\circ}C$ until use. The stock was diluted to their concentration with DMEM when needed. Prior to propofol treatment cells were grown to about 80% confluence and then exposed to propofol at different concentrations (0, 25, 50, 75, $100{\mu}M$) for 2 h pretreatment. Cell viability was measured using a quantitative colorimetric assay with thiazolyl blue tetrazolium bromide (MTT assay), and fluorescence microscopy and western blot analysis were used for evaluation of autophagy processes. Results: The viability of propofol-treated HaCaT cells was increased in a dose-dependent manner. Propofol did not show any significant toxic effect on the HaCaT cells. The autophagy inhibitor, 3-methyladenine, reduced cell viability of hypoxia-injured HaCat cells. Fluorescence microscopy and western blot analysis showed propofol induce autophagy pathway signals. Conclusions: Propofol enhanced viability of hypoxia-injured HaCaT cells and we suggest propofol has cellular protective effects by autophagy signal pathway activation.

• 생명과학회지
• /
• 제8권3호
• /
• pp.257-262
• /
• 1998

발암물질인 benzo(a)pyrene(B(a)P)이 암세포에 대한 세포성 방어능을 나타내는 자연살해(natural killer(NK))세포 활성에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 사료를 C57BL/6마우스에 노출시킨 후 NK세포활성을 MTT시험법을 이용하여 측정하였다. 정상 및 시료노출군 마우스의 NK세포활성은 표적세포인 Yac-1세포에 대한 사멸세포백분율(percent dead cell)로서 측정하였다. 정상마우스의 비장세포에 B(a)P를 노출시켰을 때 노출군들은 시료농도에 따른 활성도에 큰 변화는 없었으니 낮은 농도($2.5^{\mu}g/ml$)의 노출에서도 정상에 비하여 현격히 낮은 활성치를 보였다. 정상마우스에 시료를 투여한 후에 분리한 비장세포의 NK세포활성치는 E/T ratio 200/1에서, 1회 투여보다는 2-3회 투여군에서 유의한 감소를 나타냄으로서 반복노출의 효과를 보였다. 본 시험을 통하여 B(a)P는 마우스 면역계에 미치는 효과중 암형성에 지대한 영향을 주는 NK세포활성을 크게 저하시킴을 알 수 있었다.

• 한국식품영양학회지
• /
• 제13권5호
• /
• pp.411-418
• /
• 2000

결명자차, 녹차 및 밤차가 인체의 생체기능활성화에 미치는 영향을 알아보기 위하여 국소뇌혈류량 및 혈압, in vitro상에서의 면역세포의 활성화, 그리고 암세포가 이식된 동물에서의 면역세포 활성화와 암세포의 증식억제 효과를 관찰한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 단당류는 현미녹차와 결명자차에는 glucose, ga-lactose등이 들어 있으나 밤차에는 glucose, gal-actose, mannose가 들어 있다. 2. 아미노산은 현미녹차, 밤차, 결명자차 순으로 들어 있다. 3. 카페인은 현미녹차에는 들어 있으나 밤차와 결명자차에는 들어 있지 않았다. 4. 결명자 차는 국소뇌혈류량을 증가시킨 반면 밤차는 감소시켰다. 5. 녹차는 혈압을 증가시켰다. 6. 밤차는 in vitro 상에서 흉선세포와 비장세포의 증식을 유의성있게 증가시켰다. 7. 결명자차와 녹차는 in bitro 상에서 흉선세포의 증식을 감소시켰다. 8. 결명자차와 녹차는 L1210세포가 이식된 동물의 흉선세포 증식을 감소시켰다. 9. 밤차는 L1210세포가 이식된 동물의 비장세포 증식을 촉진시켰다. 10. 밤차와 결명자차는 L1210세포가 이식된 동물의 암세포 증식을 억제하였다.

• 한국식품과학회지
• /
• 제50권5호
• /
• pp.528-534
• /
• 2018

본 연구에서는 흑미 호분을 실험소재로 선택하여, 흑미 호분에 효소(lipase, lecitase, lipopan)를 처리함으로써 산화방지와 항염증활성을 증진하고자 하였다. 항산화 활성을 확인해보고자 DPPH 라디칼 제거능과 ABTS 라디칼 제거능을 실시하였다. 그 결과 효소 처리군이 무 처리군에 비해 산화방지 활성이 증가됨을 확인할 수 있었고, 특히 라이페이스를 처리한 후 추출한 시료에서 산화방지활성 증진이 가장 효과적이었다. 이것은 총 안토사이아노 사이드 함량 측정 결과와 일치한 것을 확인하였다. 이러한 산화방지 활성의 증가에서 라이페이스의 작용이 흑미 호분 겉면의 지방 분해를 도와 산화방지능과 관련된 유효성분들을 효과적으로 추출한 것으로 생각된다. 항염증 활성을 비교하기 위해서는 효소처리한 흑미 호분 추출물(OLAE)과 LPS를 함께 처리하여 RAW 264.7 세포가 생산하는 NO의 양과 염증성 사이토카인의 분비량을 측정해 보았다. 효소 처리를 한 경우, 라이페이스와 lecitase를 연이어 처리한 경우의 시료에서 NO의 생성이 억제되고, 염증성 사이토카인($TNF-{\alpha}$, IL-6)의 분비량이 감소됨을 확인하였다. 항염증 활성의 증진은 두 가지의 효소를 처리하는 과정 중에 일어나는 유효성분의 변화 또는 성분의 전환이 되었기 때문이라 여겨지며, 이를 확인하는 후속연구가 필요하다고 생각된다. 이상의 결과는 부산물로 버려지는 흑미 호분을 효소 처리 과정을 이용하여 만든 흑미 호분층 추출물(OLAE)로 활용하면 유용하고 안정하고 효과적인 산화방지 및 항염증 기능성 식품 소재 개발로 가능함을 제시할 수 있다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
• /
• 제24권3호
• /
• pp.661-670
• /
• 1994

It is well known that the application of dressings after periodontal surgery have benefits to provide the comforts to patient and to promote the healing process with action of bleeding control and temporary stabilization for the operated mobile teeth. But until recently the relationship between periodontal dressings and cells which are composed of periodontium has not been clear. The purpose of this study was to evaluate the cytotoxic effect of soluble extracts from the four different kinds of periodontal dressings, two of them were eugenol type (K.H.pack, Wondrpak) and the others were non-eugenol type (Coe-pak, Periocare), on the human gingival fibroblasts in vitro. Human gingival fibroblasts were primarily cultured from gingiva around third molar during the extraction for preventive purposes. Extracts solution were prepared with culture medium by means of imersing the consistent size of periodontal dressing made from plastic mold. Cell were inoculated into the 24 well plate with $3\;{\times}\;10^4\;cells/well$ of medium at $37\;^{\circ}C$, 100% of humidity, 5% of $CO_2$, incubator for 24 hours. After discard of the supernatant of medium, those cells were cultured with original, 1/2, 1/5, 1/10 diluted soluble extract for 24, 48 and 72 hours, and counted the number of cells using the hemocytometer at each designed time and concentration. Also, the cytotoxic effect of soluble extract was measured by Wataha's MTT assay method. In briefly, cells were inoculated and cultured into 96 well culture plate with $2\;{\times}\;10^4\;cells/well$ for 24 hours. Soluble extracts were applied to cultured cells and incubated for 48 hours at same condition. $50\;{\mu}l$ of MTT solution and DMSO were added into each well for the detection of absorbance with ELISA reader. The measured data were calculated by value of colorimetric assay for survival rate. The results were as follows ; In the case of eugenol type of dressing, original, 1/2 and 1/5 diluted extracts of K.H.pack showed very low survival rate. And original extract of Wondrpak showed strong cytotoxic effect and 1/2 diluted extract showed moderate cytotoxic effect. In the case of Non-eugenol type of dressings, only original extract of Coe-pak revealed strong cytotoxic effect and Periocare had little cytotoxic effect. It is concluded that eugenol type of dressings showed more cytotoxic effect than non-eugenol types. This study suggest that use of non-eugenol dressings after periodontal surgery is recommended.

• 한국안광학회지
• /
• 제20권1호
• /
• pp.75-81
• /
• 2015

목적: 본 연구는 안구에 존재하는 항산화효소인 superoxide dismutase(SOD)와 catalase(CAT)가 UV-A에 반복적으로 노출되었을 때 이들의 구조 및 활성의 변화가 유발되는지 알아보고 이들의 상관관계를 밝히고자 수행되었다. 방법: SOD와 CAT의 표준품으로 각각의 효소용액을 제조하고 하루 30분, 1시간 및 2시간씩 365 nm의 UV-A에 노출시키는 조건으로 1, 2, 3, 4 및 5일 동안 UV-A에 반복적으로 노출시켰다. UV-A 반복노출에 따른 SOD와 CAT의 구조변성은 전기영동분석으로 확인하였으며, 이들 효소의 활성은 분석키트를 이용하여 비색분석법으로 측정하였다. 결과: UV-A에 반복노출된 SOD는 일일 1시간 이상 조건으로 반복노출되었을 때 전기영동분석에서 효소의 다중화(polymerization)가 관찰되었으나 활성의 변화는 12% 이내로 나타났다. 반면 UV-A에 반복노출된 CAT는 전기영동 시 효소의 밴드크기가 감소하여 구조변성이 나타났음을 알 수 있었으며, 효소활성 또한 유의하게 감소됨을 확인하였다. 반복노출시간이 긴 경우 CAT은 전기영동분석에서는 효소밴드를 보임에도 불구하고 그 활성은 완전히 소실됨을 알 수 있었다. 결론: 이상의 결과로 UV-A 반복노출에 따른 항산화효소의 구조변성은 효소의 종류에 따라 그 정도와 양상이 다르게 나타나며, 구조변성이 효소활성의 감소정도와 반드시 일치하는 것은 아님을 알 수 있었다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
• /
• 제14권11호
• /
• pp.6949-6953
• /
• 2013

Background: Nowadays, the encapsulation of cytotoxic chemotherapeutic agents is attracting interest as a method for drug delivery. We hypothesized that the efficiency of helenalin might be maximized by encapsulation in ${\beta}$-cyclodextrin nanoparticles. Helenalin, with a hydrophobic structure obtained from flowers of Arnica chamissonis and Arnica Montana, has anti-cancer and anti-inflammatory activity but low water solubility and bioavailability. ${\beta}$-Cyclodextrin (${\beta}$-CD) is a cyclic oligosaccharide comprising seven D-glucopyranoside units, linked through 1,4-glycosidic bonds. Materials and Methods: To test our hypothesis, we prepared ${\beta}$-cyclodextrin-helenalin complexes to determine their inhibitory effects on telomerase gene expression by real-time polymerase chain reaction (q-PCR) and cytotoxic effects by colorimetric cell viability (MTT) assay. Results: MTT assay showed that not only ${\beta}$-cyclodextrin has no cytotoxic effect on its own but also it demonstrated that ${\beta}$-cyclodextrin-helenalin complexes inhibited the growth of the T47D breast cancer cell line in a time and dose-dependent manner. Our q-PCR results showed that the expression of telomerase gene was effectively reduced as the concentration of ${\beta}$-cyclodextrin-helenalin complexes increased. Conclusions: ${\beta}$-Cyclodextrin-helenalin complexes exerted cytotoxic effects on T47D cells through down-regulation of telomerase expression and by enhancing Helenalin uptake by cells. Therefore, ${\beta}$-cyclodextrin could be superior carrier for this kind of hydrophobic agent.

• 대한한방내과학회지
• /
• 제39권6호
• /
• pp.1244-1255
• /
• 2018

Objectives: The purpose of this study is to determine the stimulatory effects of herbal medicines extracts on cytokines release of immune response in immune cells, RAW 264.7 and TK-1 cell. Methods: In a total of 18 extracts, 9 water extracts and 9 ethanol extracts, of herbal medicines, the quantities of polyphenolic compounds were measured and anti-oxidation activities were determined by colorimetric assay. The herbal medicine extracts were treated on RAW 264.7 and TK-1, respectively, and then the releasing changes of tumor necrosis factor-${\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$), interleukin-6, and interleukin-10 from both immune cells were determined by the enzyme-linked immunosorbent assay. Results: The polyphenol contents were measured to be 1.56~0.64 mg/g of solids in the two types of extracts with 9 kinds of herbal medicines, while antioxidant activities were found to be 95.62~31.46% as compared with ascorbic acid control. In RAW 264.7 cells treated with herbal medicines extracts, the secretion of $TNF-{\alpha}$ increased to 1.31~1.18 fold, and the amounts of IL-6 were 68.4~97.9% compared with the control group treated with LPS alone. In particular, the secretion amount of anti-inflammatory cytokine IL-10 was suppressed by treatment using herbal medicine extracts. In the case of TK-1 cells, $TNF-{\alpha}$ secretion was suppressed according to the concentrations of herbal extract. The released amounts of IL-10 were shown at 10~40 pg/ml, and increased in a dose-dependent manner. Conclusions: Herbal medicines extracts act on macrophages inducing the secretion of inflammatory cytokine, thereby enhancing the activity of innate immunity. When acting on T cells involved in adaptive immunity, the secretion of anti-inflammatory cytokine is increased to induce the inhibition of the innate immune response.

• 농촌의학ㆍ지역보건
• /
• 제23권2호
• /
• pp.305-310
• /
• 1998

배경 : 농약의 사용이 보편화되면서 점차 그 사용량이 증가되고 있다. 저자들은 농한기의 농업인을 대상으로 국내에서 가장 많이 사용되는 맹독성 농약인 methyl bromide와 organophosphate compound의 농업인 체내 잔류 정도를 혈청 bromide 농도와 cholinesterase 활성도도 측정을 통해 조사하고자 하였다. 방법 : 농한기에 경상남도 산청군과 하동군에 거주하는 121명의 농업인을 대상으로 농번기의 농약사용에 관한 설문조사와 농약의 잔류정도를 측정하기 위한 혈액을 채취하였다. 대조군으로는 간 기능이 정상이며 B형 간염 항원이 없는 사람 중에서 연령과 성별에 맞게 무작위로 240명을 선별하였다. 농업인과 대조군에서 혈중 bromide는 혈청을 이용하여 gold chloride방법으로 구하고, cholinesterase는 colorimetric assay로 측정하였다. 대상 농업인중에서 간기능 검사가 이상 소견을 보이거나 B형 간염 항원 양성인 33명과 이에 해당하는 대조군 65명은 비교대상에서 제외하였다. 결과 : 정상인 240명을 대상으로 산정한 혈청 bromide 농도의 참고치는 72.9 ug/mL이하, 혈청 cholinesterase 활성도의 참고치는 1.6-15.9 U/mL 이었다. 정상인 175명의 혈청 bromide 농도는 $29.8{\pm}22.5\;{\mu}g/mL$, 혈청 cholinesterase 활성도는 $8.7{\pm}3.6$ U/mL이었다. 농업인의 혈청 bromide 농도는 $31.7{\pm}18.0\;{\mu}g/mL$로 대조군과 차이를 보이지 않았고, 혈청 cholinesterase도는 $10.9{\pm}4.2$ U/mL로 대조군에 비하여 유의하게 높았다. 농업인을 경작 면적, 농약 사용시 장갑 및 마스크 착용 유무에 따라 분휴류여 비교해 본 결과, 혈청 bromide 농도나 혈청 cholinesterase 활성도 차이가 없었다. 결론 : 농한기 농업이과 정상인을 비교해 보았을 때 methyl bromide 중독시 증가하는 혈청 bromide 농도는 차이가 없었으며, organophosphate compound 중독시 감소되는 cholinesterase는 농한기 농업인에서 대조군보다 높은 값을 보였다. 따라서 혈청 bromide 농도와 cholinesterase 활성도는 농한기 농업인에서 농약의 체내잔류 지표로 유용성이 낮다고 사료된다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
• /
• 제16권5호
• /
• pp.2081-2086
• /
• 2015

Gecko is a kind of traditional Chinese medicine with remarkable antineoplastic activity. However, undefined mechanisms and ambiguity regarding active ingredients limit new drug development from gecko. This study was conducted to assess anti-angiogenic properties of the aqueous extracts of fresh gecko (AG) or macromolecular components separated from AG (M-AG). An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) approach was applied to detect the vascular endothelial growth factor (VEGF) secretion of the tumor cells treated with AG or M-AG. The effect of AG or M-AG on vascular endothelial cell proliferation and migratory ability was analyzed by tetrazolium dye colorimetric method, transwell and wound-healing assays. Chick embryo chorioallantoic membrane (CAM) assays were used to ensure the anti-angiogenic activity of M-AG in vivo. The results showed that AG or M-AG inhibited the VEGF secretion of tumor cells, the relative inhibition rates of AG and M-AG being 27.2% and 53.2% respectively at a concentration of $20{\mu}L/mL$. AG and M-AG inhibited the vascular endothelial (VE) cell proliferation with IC50 values of $11.5{\pm}0.5{\mu}L/mL$ and $12.9{\pm}0.4{\mu}L/mL$ respectively. The VE cell migration potential was inhibited significantly (p<0.01) by the AG (${\geq}24{\mu}L/mL$) or M-AG (${\geq}12\mu}L/mL$) treatment. In vivo, neovascularization of CAM treated with M-AG was inhibited significantly (p<0.05) at a concentration of ${\geq}0.4{\mu}L/mL$. This study provided evidence that anti-angiogenesis is one of the anti-tumor mechanisms of AG and M-AG, with the latter as a promising active component.