Post-weaning diarrhea (PWD), mostly caused by enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC), remains to be a major source of economic loss in swine industry. The use of the ETEC-oral challenge model is often applied to mimic unsanitary commercial swine farm conditions where pathogens and unknown complex microbes exist and can cause severe infections in pigs. The purpose of this study was (1) to estimate ETEC density using spectrophotometric computation, (2) to determine survivability of ETEC after storing at $-20^{\circ}C$ for 7 days, and (3) to evaluate survivability of ETEC after blending with diluted sweeteners (0, 5, 10, 20, and 40% sucrose in phosphate buffered saline [PBS]). Cell density was quantified using UV-VIS spectrophotometer and counting ETEC colony forming units (cfu) at 0, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, and 240 min. The established linear equation ($y=0.0031x^2-0.0079x+0.0043$ and $y=0.0046x^2-0.0151x+0.0113$) was used for robust quantification of each ETEC cell density. ETEC stored at $-20^{\circ}C$ showed 108 cfu/mL after thawing and incubation. When ETEC was blended with sweeteners (20 and 40%), survival of ETEC was decreased by 58 and 54% in 5 min post blending. However, addition of 20% of sweetener resulted in a higher survivability than those with other media concentrations. Therefore, the use of ETEC-oral challenge model would be possible as a stable method if we could confirm the appropriate medium that increases survivability of ETEC in weaner pigs.
Tuberculosis is one of the most threatening infectious diseases to public health all over the world, for which Mycobacterium tuberculosis (MTB) is the etiological agent of pathogenesis. Ursolic acid (UA) has immunomodulatory function and exhibits antimycobacterial activity. However, the intracellular killing effect of UA has yet to be elucidated. The aim of this study was to evaluate the intracellular killing effect of UA during mycobacterial infection. The intracellular killing activity of UA was evaluated in the macrophage cell line THP-1 by the MGIT 960 system as well as by CFU count. The production of reactive oxygen species (ROS) and the level of nitric oxide (NO) were measured using DCF-DA and Griess reagent, respectively. Phagocytosis was observed by a fluorescence-based staining method, and the colony forming units were enumerated on 7H11 agar medium following infection. In addition, MRP8 mRNA expression was measured by qRT-PCR. UA significantly decreased the number of intracellular Mycobacterium through generation of ROS and NO. In addition, it profoundly activated the phagocytosis process of THP-1 cells during MTB-infection. Furthermore, our data demonstrated that UA activated the phagocytosis process in human monocyte cells through MRP8 induction. These data suggest that UA firmly contributes to the intracellular killing effect of macrophages during mycobacterial infection.
Bisphenol-A (BPA), a known endocrine disruptor, is a main building block of epoxy resin which is widely used as a coating agent in residential water storage tanks. Therefore, BPA leaching from the epoxy resin may have adverse effects on human health. The possibility of BPA leaching from three epoxy resins were tested with a modified KS D 8502 method at 20, 50, 75 and $100^{\circ}C$ in deionized water and the specified test water, respectively. BPA leached to the test water was identified using GC-MS and quantified with GC-FID after a sequential extraction and concentration. The results showed that BPA leaching has occurred in all three samples tested. The quantify of BPA leaching from unit area of epoxy resin coating was in the range of $10.677{\sim}273.120{\mu}g/m^2$ for sample A, 29.737~1734.045 for sample B and 52.857~548.778 for sample C depending on the test temperature, respectively. In general, the amount of BPA leaching increased as the water temperature increases. This result implies a higher risk of BPA leaching to drinking water during a hot summer season. In addition, microbial growth, measured by colony forming units, in epoxy coated water tanks was higher than that in a stainless steel tank suggesting that compounds leaching from epoxy resin may support the growth of microorganisms in a residential water holding tank.
Bacterial wilt caused by Ralstonia solanacearum has become a severe problem on tobacco in Korea. No effective single control measure is available at present time. One of the most potential way for controlling the bacterial wilt on tobacco is growing tobacco cultivars resistant to the bacterial wilt. In this study, optimal conditions for screening tobacco cultivars resistant to the bacterial wilt were examined to provide reproducible and efficient methods in growth chamber testing and field experiments for evaluating plant disease resistance. For this, already-known inoculation methods, inoculum densities, and incubation temperature, and plant growth stages at the time of inoculation were compared using tobacco cultivars resistant (Nicotiana tabacum cv, NC95), moderately resistant (N. tabacum cv. SPG70), and susceptible (N. tabacum BY4) to the bacterial disease. It was determined that root-dipping of tobacco seedlings at six true leaf stage into the bacterial suspension with inoculum level of $10^8$ colony-forming units (CFU)/ml for 20 min before transplanting was simple and most efficient in testing for resistance to the bacterial wilt of tobacco caused by R. solanacearum, for which disease incidences and severities were examined at 2 weeks of plant growth after inoculation at $20{\sim}25^{\circ}C$ in a growth chamber. These experimental conditions could discriminate one tobacco cultivar from the others by disease severity better than any other experimental conditions. In field testing, the optimum time for examining the disease occurrence was late June through early July. These results can be applied to establishing a technical manual for the screening of resistant tobacco cultivars against the bacterial wilt caused by R. solanacearum.
Cho, Kyungwon;Lee, Si Young;Chang, Beom-Seok;Um, Heung-Sik;Lee, Jae-Kwan
Journal of Periodontal and Implant Science
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제45권2호
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pp.38-45
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2015
Purpose: The purpose of this study was to evaluate the effect of photodynamic therapy (PDT) using erythrosine and a green light emitting diode (LED) light source on biofilms of Aggregatibacter actinomycetemcomitans attached to resorbable blasted media (RBM) and sandblasted, large-grit, acid-etched (SLA) titanium surfaces in vitro. Methods: RBM and SLA disks were subdivided into four groups, including one control group and three test groups (referred to as E0, E30, E60), in order to evaluate the effect of PDT on each surface. The E0 group was put into $500{\mu}L$ of $20{\mu}M$ erythrosine for 60 seconds without irradiation, the E30 group was put into erythrosine for 60 seconds and was then irradiated with a LED for 30 seconds, and the E60 group was put into erythrosine for 60 seconds and then irradiated with a LED for 60 seconds. After PDT, sonication was performed in order to detach the bacteria, the plates were incubated under anaerobic conditions on brucella blood agar plates for 72 hours at $37^{\circ}C$, and the number of colony-forming units (CFUs) was determined. Results: Significant differences were found between the control group and the E30 and E60 groups (P<0.05). A significantly lower quantity of CFU/mL was found in the E30 and E60 groups on both titanium disk surfaces. In confocal scanning laser microscopy images, increased bacterial death was observed when disks were irradiated for a longer period of time. Conclusions: These findings suggest that PDT using erythrosine and a green LED is effective in reducing the viability of A. actinomycetemcomitans attached to surface-modified titanium in vitro.
This study was carried out to investigate the management characteristics and growth performance of L. edodes from the cooling stage to incubation. Bags of different heights and weights are available for bagging. When the medium size of $17{\times}13cm$ was used and the size of the inoculation hole was changed from 1/3 to 2/3, the browning period was shortened to 30 days. Mycelial growth was evaluated according to the cooling temperature after sterilization. It was observed to be the highest at 122 mm/15 days at $10^{\circ}C$ and 114 mm/15 days and 117 mm/15 days at $15^{\circ}C$ and $20^{\circ}C$, respectively. The contamination rate of the sawdust media before inoculation was measured as 0, $4.5{\times}10$, $1.3{\times}10^2$, $4.0{\times}10^3cfu$ at $5^{\circ}C$, $10^{\circ}C$, $15^{\circ}C$, and $24^{\circ}C$ respectively. The average of $1.6{\times}10^8$ colony forming units (cfu) of microorganisms was observed in the sawdust that had been piled for six months outdoors. In summer, the sawdust has to be used immediately after mixing. The sterilized medium had an average of $4{\times}10^3cfu$ of microorganisms at $24^{\circ}C$ and $1.3{\times}10^2cfu$ at $15^{\circ}C$. After 15 days of inoculation in vitro, the growth conditions of the sawdust was the best at 132 mm, followed by grain and liquid. When inoculated with liquid spawn, the moisture content of the substrate should be adjusted between 50% and 55% in advance.
The composition of the bacterial populations in Gorosoe(Acer mono Max.) sap was characterized during storage with different heat treatments($63^{\circ}C$ for 30 min and $73^{\circ}C$ for 15 sec). The saps were aseptically collected at 0, 15 and 30 days of storage and analyzed by dilution plating and 16S rDNA PCR-DGGE analysis. There were significant differences in the total number of colony forming units(CFUs) of bacteria between heated and nonheated saps. Bacteria of nonheated sap were present at a level of $3.4{\times}10^7CFU/m{\ell}^{-1}$, whereas living bacteria were not detected in the heated sap. According to the 16S rDNA sequence and DGGE analysis, Pseudomonas sp. was the most abundant bacterial strain in the samlpes, and the bacterial community structures become more simplified with time and were composed of the Chryseobacterium sp. with time. These results allowed us to characterize the dominant bacteria involved in Gorosoe sap and to better understand their dynamics throughout storage.
The effect of continuous humidifier use on the bioaerosol concentration in an indoor environment was investigated. An ultrasonic humidifier was operated for 10 hr per day for 15 days in an apartment room. During this time period, viable bioaerosol samples were taken using a single-stage Andersen sampler containing culture media plates for bacteria and fungi. The culture plates were then incubated at room temperature for 2~7 days depending on the media. The counts for the air sample plates were corrected for multiple impactions using the positive hole conversion method and are reported as the colony forming units per cubic meter of air (CFU/$m^3$). While the bacterial concentration measured using the tryptic soy agar (TSA) did not show any significant change during the first 3 days, the concentration increased from the $6^{th}$ day (6979 CFU/$m^3$) and reached a maximum on the $9^{th}$ day (46431 CFU/$m^3$). The concentration then decreased to 2470 CFU/$m^3$ on the $12^{th}$ day, at which point the fungal concentration increased rapidly to 14424~16038 CFU/$m^3$. Also, while the fungal concentration showed a significant change until the $9^{th}$ day of humidifier use, fungal growth was observed on the wallpaper and increased rapidly from the $12^{th}$ day. However, the bacterial concentration increased rapidly after the fungi were removed by remediation. The major fungal species identified in the samples were Penicillium representing 34%, Aspergillus representing 31%, Cladosporium representing 24%, and Alternaria representing 1%. The results also indicated that a relative humidity over 80% was easily achieved with continuous humidifier use. Yet, maintaining a high humidity in a room can cause a rapid outbreak of microbial growth.
An, Nan-Hee;Lee, Sang-Min;Cho, Jung-Rai;Lee, Byung-Mo;Shin, Jae-Hun;Ok, Jung-Hun;Kim, Seok-Cheol
한국토양비료학회지
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제47권6호
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pp.451-456
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2014
Organic amendment practices can influence diversity and activities of soil microorganisms. There is a need to investigate this impact compared with other types of materials. This study was carried out to evaluate the long term effects of chemical and organic fertilizer on soil microbial community in upland field. During the last 11 years green manure, rice straw compost, rapeseed cake, pig mature compost, NPK, and NPK + pig mature compost were treated in upland soil. Organic fertilizer treatment found with high bacterial colony forming units (CFUs) as compared to chemical and without fertilizer treatment. There was no significant difference in the actinomycetes and fungal population. The average well color development (AWCD) value was the highest in green manure and, the lowest in without fertilizer treatment. Analyses based on the denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) profile showed that rice straw compost and pig mature compost had a similar banding pattern while rapeseed cake, NPK, NPK + pig mature compost and without fertilizer treatment were clustered in another cluster and clearly distinguished from green manure treatment. Bacterial diversity can be highly increased by the application of organic fertilizer while chemical fertilizer had less impact. It can be concluded that green manure had a beneficial impact on soil microbial flora, while, the use of chemical fertilizer could affect the soil bacterial communities adversely.
In a previous paper, the ogdH gene that encodes 2-oxoglutarat dehydrogenase was isolated from Salmonella typhimurium. The catalytic N-terminal region in the enzyme was found to be very specific for the Salmonella species. Therefore, the aim of the present study was to detect S. typhimurium in food sources using primers designed for OGDH-l and OGDH-2 which were based on the salmonella-specific region of the ogdH gene. A simple polymerase chain reaction (PCR) detection method was developed to detect low numbers of S. typhimurium in a chicken meat microbial consortium. Using the ogdH-specific primers under stringent amplification conditions and for gene probe analysis, fewer than 100 colony-forming units (CFUs) were detectable when pure cultures were employed. When the PCR assay was run on S. typhimurium-contaminated meat contents, only the positive meat samples containing as few as 200 CFUs reacted to the assay. The method employed for sample processing is simple and it was determined to provide a sensitive means of detecting trace amounts of S. typhimurium-specific sequences in the presence of mixed meat microbial populations. When compared with six representative intestinal gram-negative bacterial strains in foods, including Vibrio parahaemolyticus, V. vulnificus, Enterobacter cloacae, E. coli O157:H7, Pseudomonas aeruginosa, and Proteus sp., S. typhimurium had a unique and distinct PCR product (796 bp). In conclusion, the two OGDH primers were found to be rapid and sensitive detectors of Salmonella spp for the PCR method.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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