Identifying Hoxc8 target genes is at the crux of understanding the Hoxc8-mediated regulatory networks underlying its roles during development. However, identification of these genes remains difficult due to intrinsic factors of Hoxc8, such as low DNA binding specificity, context-dependent regulation, and unknown cofactors. Therefore, as an alternative, the present study attempted to test whether the roles of Hoxc8 could be inferred by simply analyzing genes frequently coexpressed with Hoxc8, and whether these genes include putative target genes. Using archived gene expression datasets in which Hoxc8 was differentially expressed, we identified a total of 567 genes that were positively coexpressed with Hoxc8 in at least four out of eight datasets. Among these, 23 genes were coexpressed in six datasets. Gene sets associated with extracellular matrix and cell adhesion were most significantly enriched, followed by gene sets for skeletal system development, morphogenesis, cell motility, and transcriptional regulation. In particular, transcriptional regulators, including paralogs of Hoxc8, known Hox co-factors, and transcriptional remodeling factors were enriched. We randomly selected Adam19, Ptpn13, Prkd1, Tgfbi, and Aldh1a3, and validated their coexpression in mouse embryonic tissues and cell lines following $TGF-{\beta}2$ treatment or ectopic Hoxc8 expression. Except for Aldh1a3, all genes showed concordant expression with that of Hoxc8, suggesting that the coexpressed genes might include direct or indirect target genes. Collectively, we suggest that the coexpressed genes provide a resource for constructing Hoxc8-mediated regulatory networks.
Chitinolytic activity was enhanced by coexpression of endo-chitinase gene (chiA) and chitobiosidase gene (chiB) from Serratia marcescens KFRI314 using constitutive expression vector, pHCEIA, in E. coli. Coexpression vector was constructed by inserting ribosome binding site (RBS) into junction between two chitinase genes. SDS-PAGE analyses showed that two chitinase were constitutively expressed while E. coli clones expressing two chitinases simultaneously increased halo size on colloidal chitin plate. Furthermore, the chitinolytic activities were much enhanced in coexpressed clones when degradation patterns of substrate analogues such as 4-MU-(NAG), $4-MU-(NAG)_2$,$4-MU-(NAG)_3$ were used. Consequently, the combined use of endochitinase and chitobiosidase greatly increased overall chitinolytic activities on recombinant E. coli clones.
The herpes simplex virus type-1 (HSV-1)-encoded DNA polymerase consists of two subunits, the products of the UL30 and UL42 genes. UL30 and UL42 were coexpressed in Sf9 cells infected with recombinant baculoviruses carrying the two genes. The UL30 and UL42 gene products remained tightly associated throughout the purification, which led to a near homogeneous heterodimer composed of the DNA polymerase and UL42 protein. The DNA polymerase-UL42 protein heterodimer, purified from the recombinant baculovirus-infected Sf9 cells, showed the same high degree of processivity of deoxynucleotide polymerization as the enzyme purified from the HSV-1 infected primate cells. Like the latter, it contained a 3'-5' exonuclease activity that specifically hydrolyzes an incorrectly matched nucleotide at the 3' terminus of a primer, thereby contributing to the fidelity of DNA replication.
Feng, Yaping;Syrkin-Nikolau, Judith A.;Wurtele, Eve S.
Interdisciplinary Bio Central
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제5권1호
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pp.1.1-1.8
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2013
High quality publicly-available transcriptomic data representing relationships in gene expression across a diverse set of biological conditions is used as a context network to explore transcriptomics of the CNS. The context network, 18367Hu-matrix, contains pairwise Pearson correlations for 22,215 human genes across18,637 human tissue samples1. To do this, we compute a network derived from biological samples from CNS cells and tissues, calculate clusters of co-expressed genes from this network, and compare the significance of these to clusters derived from the larger 18367Hu-matrix network. Sorting and visualization uses the publicly available software, MetaOmGraph (http://www.metnetdb.org/MetNet_MetaOm-Graph.htm). This identifies genes that characterize particular disease conditions. Specifically, differences in gene expression within and between two designations of glial cancer, astrocytoma and glioblastoma, are evaluated in the context of the broader network. Such gene groups, which we term outlier-networks, tease out abnormally expressed genes and the samples in which this expression occurs. This approach distinguishes 48 subnetworks of outlier genes associated with astrocytoma and glioblastoma. As a case study, we investigate the relationships among the genes of a small astrocytoma-only subnetwork. This astrocytoma-only subnetwork consists of SVEP1, IGF1, CHRNA3, and SPAG6. All of these genes are highly coexpressed in a single sample of anaplastic astrocytoma tumor (grade III) and a sample of juvenile pilocytic astrocytoma. Three of these genes are also associated with nicotine. This data lead us to formulate a testable hypothesis that this astrocytoma outlier-network provides a link between some gliomas/astrocytomas and nicotine.
Seo, Myung-Ji;Im, Eun-Mi;Nam, Jung-Yeon;Kim, Soon-Ok
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제17권6호
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pp.1045-1048
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2007
Two genes, dps encoding decaprenyl diphosphate synthase and dxs encoding 1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate synthase, were isolated from Rhizobium radiobacter ATCC 4718. DNA sequencing analysis of the dps and dxs genes revealed an open reading frame of 1,077 bp and 1,920 bp, respectively. The heterologous expression in Escherichia coli BL21(DE3) was carried out in order to identify their functions. Recombinant E. coli BL21(DE3) harboring the dps gene produced $CoQ_{10}$ as well as $CoQ_8$ and $CoQ_9$, whereas E. coli harboring only the dxs gene produced more $CoQ_8$ compared with the wild-type E. coli. Additionally, the coexpression of dps and dxs genes in E. coli was carried out. The recombinant E. coli harboring only the dps gene produced $0.21{\pm}0.04\;mg/l$ of $CoQ_{10}$, whereas the coexpressed E. coli with dps and dxs genes produced $0.37{\pm}0.07\;mg/l$ of $CoQ_{10}$. HPLC analysis also showed that the $CoQ_{10}$ fraction (100% of the total CoQs distribution) was increased from $15.86{\pm}0.66%$ (only dps) to $29.78{\pm}1.80%$ (dps and dxs).
Kim, Jun-Sub;Yeom, Hye-Jung;Kim, Seung-Jun;Kim, Ji-Hoon;Park, Hye-Won;Oh, Moon-Ju;Hwang, Seung-Yong
Molecular & Cellular Toxicology
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제3권3호
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pp.208-213
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2007
With the help of a development and popularization of microarray technology that enable to us to simultaneously investigate the expression pattern of thousands of genes, the toxicogenomics experimenters can interpret the genome-scale interaction between genes exposed in toxicant or toxicant-related environment. The ultimate and primary goal of toxicogenomics identifies functional context among the group of genes that are differentially or similarly coexpressed under the specific toxic substance. On the other side, public reference databases with transcriptom, proteom, and biological pathway information are needed for the analysis of these complex omics data. However, due to the heterogeneous and independent nature of these databases, it is hard to individually analyze a large omics annotations and their pathway information. Fortunately, several web sites of the public database provide information linked to other. Nevertheless it involves not only approriate information but also unnecessary information to users. Therefore, the systematically integrated database that is suitable to a demand of experimenters is needed. For these reasons, we propose SOP (Search of Omics Pathway) database system which is constructed as the integrated biological database converting heterogeneous feature of public databases into combined feature. In addition, SOP offers user-friendly web interfaces which enable users to submit gene queries for biological interpretation of gene lists derived from omics experiments. Outputs of SOP web interface are supported as the omics annotation table and the visualized pathway maps of KEGG PATHWAY database. We believe that SOP will appear as a helpful tool to perform biological interpretation of genes or proteins traced to omics experiments, lead to new discoveries from their pathway analysis, and design new hypothesis for a next toxicogenomics experiments.
Benzo[a]pyrene (B[a]P), a polycyclic aromatic hydrocarbon, is a principal component of cigarette smoke. B[a]P can cause lung carcinogenesis and plays a key role in lung cancer progression. The role of B[a]P has been reported in lung cancer, but its effects on lung cancer stem cells (CSCs) have not been investigated. Emerging evidence indicates that CSCs are associated with carcinogenesis, tumor initiation, relapse, and metastasis. Therefore, targeting CSCs to defeat cancer is a challenging issue in the clinic. This study explored whether B[a]P alters gene expression in lung cancer cells and CSCs. The lung adenocarcinoma A549 cell line was used to investigate the role of B[a]P on lung cancer cells and lung CSCs using microarray and quantitative PCR. B[a]P ($1{\mu}M$) provoked gene expression changes in A549 cancer cells and CSCs by deregulating numerous genes. Gene pathway analysis was performed using GeneMANIA and GIANT. We identified genes that were coexpressed and showed physical interactions. These findings improve our understanding of the mechanism of B[a]P in lung cancer and cancer stem cells and can be an attractive therapeutic target.
이 연구의 목적은 생물공학적으로 이소프레노이드 생합성 유전자를 클로닝하여 이들을 형질전환시킨 대장균을 제조하여 이들을 숙주로 사용하여 아스타잔틴의 생산을 증가시키는 것이다. 본 연구진은 선행연구에서 Paracoccus haeundaensis로부터 아스타잔틴 생산에 관여하는 6개의 아스타잔틴 생합성 유전자군을 보고하였고, 이들 유전자들을 발현 벡타(pCR-XL-TOPO-Crt)에 재조합한 후 이 벡터를 대장균에 형질 전환시켜서 건조중량으로 400 ${\mu}g$/g의 아스타잔틴을 생산하였다. 아스타잔틴의 생산성을 증가시키기 위해서 대장균으로부터 이소프레노이드 생합성 경로에 관여하는 4-hydroxy-3-methylbut-2-enyl diphosphate reductase (lytB), farnesyl diphosphate (FPP) synthase (ispA), isopentenyl (IPP) diphossphate isomerase (idi) 유전자들을 클로닝하였고, 이들 유전자를 (pCR-XL-TOPOCrt-full)와 같이 대장균에 각각 공발현시켰다. idi 유전자와 아스타잔틴 생산에 관여하는 아스타잔틴 생합성 유전자군이 함께 형질 전환된 BL21(DE3) Codon Plus RIL 대장균를 배양하였을때, 건조중량으로 1,200 ${\mu}g$/g의 아스타잔틴을 생산하였다. 따라서 본 연구 결과, 이소프레노이드 생합성 유전자와 아스타잔틴 생합성 유전자군을 공발현 시킬 때 아스타잔틴의 생산이 3배 증가하였다.
Human endogenous retroviral long terminal repeats (LTRs) have been found to be coexpressed with sequences of genes located nearby. It has been suggested that the LTR elements have contributed to the structural change or genetic variation of human genome connected to various diseases. The HERV-W family has been identified in the cerebrospinal fluids and brains of individuals with schizophrenia. Using a cDNA library derived from a human brain, the HERV-W LTR elements were examined and five new LTR elements were identified. These elements were examined using a YAC clone panel from the Xq21.3 region linked to psychosis that was replicated on the Y chromosome after the separation of the chimpanzee and human lineages. Fourteen elements of the HERV-W LTR were identified in that region. Those LTR elements showed a high degree of sequence similarity ($91.8-99.5\%$) with previously reported HERV-W LTR. A phylogenetic tree obtained from the neighbor-joining method revealed that new HERV-W LTR elements were closely related to the AXt000960, AF072504, and AF072506 from the GenBank database. The data indicates that several copy numbers of the HERV-W LTR elements exist on the Xq21.3 region and are also expressed in the human brain. These LTR elements need to be further investigated as potential leads to neuropsychiatric diseases.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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