Atypical hemolytic uremic syndrome (aHUS), a rare form of thrombotic microangiopathy, is distinguished from the typical form by the absence of a preceding verotoxin-producing Escherichia coli infection. Notably, aHUS occurs in association with genetic or acquired disorders causing dysregulation of the alternative complement pathway. Patients with aHUS may show the presence of anti-complement factor H (CFH) autoantibodies. This acquired form of aHUS (antiCFH-aHUS) primarily affects children aged 9-13 years. We report a case of a 13-year-old Lao girl with clinical features of aHUS (most likely anti-CFH-aHUS). The initial presentation of the patient met the classical clinical triad of thrombotic microangiopathy (microangiopathic hemolytic anemia, thrombocytopenia, and acute kidney injury) without preceding diarrheal illness. Low serum levels of complement 3 and normal levels of complement 4 indicated abnormal activation of the alternative complement pathway. Plasma infusion and high-dose corticosteroid therapy resulted in improvement of the renal function and hematological profile, although the patient subsequently died of infectious complications. This is the first case report that describes aHUS (possibly anti-CFH-aHUS) in Laos.
Four coumarins (1-4) and one polyacetylene (5) were isolated from the roots of Anglica purpuraefolia Chung (Umbelliferae) through repeated column chromatography. Four coumarins, isoscopoletin (1), oxypeucedanin hydrate (2), arnottinin (3) and isokhellactone (4), and a polyacetylene, (+)-9(Z), 17-octadecadience-12,14-diyne-1,11,16-triol (5), were identified by spectroscopic analysis including two dimensional NMR and mass. These compounds were examined for their anti-complement activity against the classical pathway of the complement system. However, compounds 1-5 were inactive in this assay system.
대복피(빈랑나무의 과피)로부터 면역조절 역할이 기대되는 2종의 보체활성화(항보체) 다당을 정제하고 그 작용양식에 대해 검토하였다. 활성다당 AC-2-IIIa 및 AC-2-IIIc는 농도가 증가함에 따라 항보체 활성이 증가하는 양상을 보였으며, 2가 금속이온 부재시 대조구에 비해 거의 완전한 활성의 감소를 보인 반면, $Ca^{2+}$ 이온만을 선택적으로 제거한 경우 활성이 상당량 유지되었다. 또한 이들 활성다당들은 비교적 강력한 보체 제 2경로 활성화능을 나타내었으며, $Ca^{2+}$ 이온 부재 상태에서 정상인의 혈청과 반응시, C3의 분해산물을 anti-human C3를 이용한 면역 전기영동법에 의해 확인할 수 있었다. 또한 anti-human whole serum를 이용한 면역 전기영동 결과, ${\alpha}2-M$ peak 대비 3rd peak의 높이 비율은 AC-2-IIIa가 $1.50{\pm}0.04$, AC-2-IIIc가 $1.22{\pm}0.08$이었는바, 이러한 사실로부터 대복피 유래 AC-2-IIIa 및 AC-2-IIIc의 보체 활성화 양식은 classical 및 alternative pathway 양경로를 모두 경유함을 알 수 있었다.
천연으로부터 보체 저해활성 물질을 선발할 목적으로 용혈성 보체측정법(hemolytic complement assay, $CH_{50}$)을 이용한 미량 탐색법을 확립하였다. 보체결합 반응은 microplate에서 수행하였으며, 표준 용혈(50% hemolysis)을 설정하기 위한 최적조건은 classical pathway (CP)의 경우 양 적혈구 농도를 $5.0{\times}10^8\;cells/ml$로 하였을때 hemolysin 희석농도 $1/75{\sim}1/100$ 및 보체 희석농도 $1/80{\sim}1/120$이었으며, alternative pathway (AP)의 경우는 토끼 적혈구 농도 $4.0{\times}10^8\;cells/ml$에서 보체 희석농도 l/5, EGTA 4mM 및 $Mg^{2+}\;4{\sim}8mM$ 이었다. 비수용성 화합물의 검정에는 dimethyl sulfoxide를 1% 수준이 되도록 시료의 농도를 조절하여 첨가하였다. 본 실험 조건에서 3종의 phenylpropanoid는 모두 농도에 비례하여 항보체 활성을 나타내었는데, 그중 rosmarinic acid의 항보체 활성은 CP의 경우 $0.063{\sim}0.5mM$에서 $5.4{\pm}3.6%{\sim}95.8{\pm}0.2%$, AP의 경우 $0.063{\sim}1\;mM$에서 $35.1{\pm}0.9%{\sim}95.6{\pm}1.1%$으로 측정되었다.
식물성 식품재료를 대상으로 보체 용혈분석법$(TCH_{50})$ 을 이용하여 보체 활성화능(항보체 활성)에 대한 검색을 실시하였다. 총 38종의 식용 식물추출물 중 5종의 시료에서 대조구에 비해 60% 이상의 $TCH_{50}$ 감소를 일으키는 비교적 높은 활성을 나타냈으며 그 활성의 순서는 $1000{\mu}g/ml$ 시료 농도에서 생강>토란대>냉이>은행잎>달래이었다. 한편 가장 높은 활성을 보였던 생강에서 조제된 ZR-1의 경우 pronase 소화 후에는 활성의 변화가 없는 반면에 과요오드산 산화에 의해서는 급격한 활성의 감소를 나타냄으로써 ZR-1의 단백질 부위가 아닌 다당 부위가 활성에 기여함을 알 수 있었다. 또한 ZR-1의 항보체 활성은 $Ca^{2+}$ 이온 부재시 부분적인 감소현상을 보였으며, ZR-1을 정상인의 혈청과 반응 후 anti-humanC3를 이용하여 2차원 면역 전기영동을 행한 결과 C3의 분해산물을 관찰할 수 있었다. 또한 이들 획분은 $ACH_{50}$의 저해를 일으켰다. 동 결과로부터 ZR-1의 보체 활성화 양식은 classical pathway 뿐만 아니라 alternative pathway도 경유함을 알 수 있었다.
계지에서 분리한 보체계 활성화 다당의 보체 활성화양식과 다당의 당쇄결합에 관하여 검토하였다. 계지 보체계 활성화 다당획분들(CC-IIIa, CC-IIIb, CC-IIIc)들은 정상인의 혈청중에 존재하는 주요 보체성분인 C3를 활성화하여 C3a와 C3b 보체 산물을 생성 시켰는데 이 과정은 anti-human C3를 이용한 면역전기영동을 실시하여 확인하였다. $Ca^{++}$ 유무시의 보체계 활성을 측정한 결과 계지에서 분리된 CC-IIIa-3는 고전적 경로(classical pathway)와 부경로(alternative pathway)를 동시에 활성화시킴을 확인하였다. CC-IIIa-3을 메틸화하여 GC/MS로 분석한 결과 비환원 말단의 galactopyranose와 glucopyranose가 확인되었고 1,2-linked rhamnopyranose, 1,6-linked mannopyranose, 1,3-linked glucopyranose, 1,6-linked galactopyranose 등이 확인되었다.
The crude biopolymer (AS-S1) and endobiopolymer (AS-S2) were isolated from the dry stem bark of Acanthopanax sessiliflorus and tested for anti complement activity. The two potent anticomplement biopolymers, AS-1 and AS-2-Fr.I, were isolated by the combination of ion-exchange chromatography and gel filtration methods from the endo-biopolymers (AS-S2). The anticomplement activity of AS-1 (MW 12 kDa) and AS-2-Fr.I (MW 180 kDa) were found to be 84.4% and 100.0%, respectively, at the concentration of $25{\mu}g/ml$. Activated pathway of the complement system occurred in both classical and alternative pathways, as evidenced by crossed immunoelectrophoresis(CIEP), where a major pathway was detected to be the classical one. It was found that the anticomplement activities of the periodate oxidized were decreased significantly, but those of pronase digested biopolymers of AS-1 and AS-2-Fr.I were decreased very little. The AS-1 contained 2,4,6-tri-O-methyl-D-glucitol, 2,3,6-tri-O-methyl-D-galacitol, and 2,3,6-tri-O-methyl-D-galacitol, which indicated that AS-1 contained a $(1{\rightarrow}3),\;(1{\rightarrow}4)-linked$ glucopyranosyl residue and a $(1{\rightarrow}4)-linked$ galactosyl residue. AS-2-Fr.I contained mainly 2,4-di-O-methyl-D-mannitol and 2,3,4-tri-O-methyl-D-galacitol, which contained $(1{\rightarrow}3),\;(1{\rightarrow}6)$ linked mannosyl and $(1{\rightarrow}6)$ linked galactosyl residues.
From December 1993 to April 1994, to investigate complement activation and pulmonary leukostasis, thirty adult patients were studied during cardiopulmonary bypass[CPB for cardiac surgery in Department of Cardiovascular & Thoracic Surgery, Pusan Paik Hospital, Inje University. Total patients were divided into group I and II according to the purpose of study ; Group I was 15 patients undergoing CPB with bubble oxygenator, Group II was 15 patients undergoing CPB with membrane oxygenator. The results of study were summarized as follows.1. The decrease of C3 and C4 levels were observed within few minutes of beginning of CPB in all patients[P<0.05 , and this decrease was proved to be due to complement activation, not by the influence of hemodilution.2. In the correlation between the change of C3 and C4, group I showed linear correlation each other suggesting complement activation occurred through the classical pathway, group II showed a correlation at only partial sampling times suggesting complement activation via both classical and alternative pathway, however there was no significant statistical difference at the change of C3 and C4 concentrations in two groups[P>0.05 .3. After switching to partial CPB, a few difference between right atrial and left atrial WBC count was observed, but statistically not significant and median cell count difference between group I and II was not significant, too [P>0.05 . With the above result, we concluded that CPB itself contributes to the activation of complement system, but bubble oxygenator does not activate always complement system more than membrane oxygenator.
The present study uses quasi-classical trajectory procedures to examine the vibrational relaxation and dissociation of the methyl and ring C-H bonds in excited methylpyrazine (MP) during collision with either N2 or O2. The energy-loss (-ΔE) of the excited MP is calculated as the total vibrational energy (ET) of MP is increased in the range of 5,000 to 40,000cm-1. The results indicate that the collision-induced vibrational relaxation of MP is not large, increasing gradually with increasing ET between 5,000 and 30,000 cm-1, but then decreasing with the further increase in ET. In both N2 and O2 collisions, the vibrational relaxation of MP occurs mainly via the vibration-to-translation (V→T) and vibration-to-vibration (V→V) energy transfer pathways, while the vibration-to-rotation (V→R) energy transfer pathway is negligible. In both collision systems, the V→T transfer shows a similar pattern and amount of energy loss in the ET range of 5,000 to 40,000cm-1, whereas the pattern and amount of energy transfer via the V→V pathway differs significantly between two collision systems. The collision-induced dissociation of the C-Hmethyl or C-Hring bond occurs when highly excited MP (65,000-72,000 cm-1) interacts with the ground-state N2 or O2. Here, the dissociation probability is low (10-4-10-1), but increases exponentially with increasing vibrational excitation. This can be interpreted as the intermolecular interaction below ET = 71,000 cm-1. By contrast, the bond dissociation above ET = 71,000 cm-1 is due to the intramolecular energy flow between the excited C-H bonds. The probability of C-Hmethyl dissociation is higher than that of C-Hring dissociation.
The immunomodulating activities and chemical characteristics of a water-soluble exopolymer from submerged mycelial culture of Phellinus pini were studied. Anticomplementary activity of this polymer was found to be $73.2\%$, and its activation system occurred through both classical and alternative pathways, where the classical pathway was detected to be the major one by crossed immunoelectrophoresis. Nitric oxide (NO) release ability and acid phosphatase activity of macrophage were increased by 1.6-fold ($100{\mu}g/ml$) and 3.4-fold ($500{\mu}g/ml$), respectively, and splenocyte proliferation in mixed lymphocyte reaction (MLR) was also increased by 2.6-fold ($200{\mu}g/ml$), compared to the control. The molecular weight of this polymer, determined by HPLC, was under 5 kDa. Total sugar and protein contents were 89.7 and 10.3%, respectively. Both sugar and amino acid compositions of the exopolymer were also analyzed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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