In the previous report (Choi et al., 1997), the angiogenin binding peptides identified from a phage-peptide library were analyzed by using the fusion proteins composed of the Escherichia coli maltose binding protein and its corresponding peptides. However, it was difficult to obtain a sufficient amount of the fusion proteins required for further analysis because of the low expression level. We now report a high level expression of the fusion protein and analysis of its anti-angiogenin activity. The use of strong T7 promoter and removal of signal sequence allowed about a 20-fold increase in the expression efficiency of the fusion protein. We were able to obtain about 10 mg of purified fusion protein from one liter of culture. The purified fusion protein showed angiogenin-specific affinity and inhibited the binding of biotinylated actin to human angiogenin at $IC_{50}$ of 0.6 mM. Its anti-angiogenin activity was also revealed by the chorioallantoic membrane assay.
Angiogenesis refers to the formation of new capillary blood vessels, or neovascularization occurring under various physical conditions, such as development of the embryo, formation of corpus luteum, wound healing and pathological conditions including tumor growth and metastases, hemangiomas, diabetic retinopathy, rheumatoid arthritis. There are many evidences that angiogenesis is important for the progressive growth of solid tumors and also permits the shedding of metastatic tumors from the primary site. Thus, treatment of angiogenesis inhibitors might be a novel strategy for tumor growth inhibition. Normal vascular endothelial cells are in a state of differentiation and angiogenic endothelial cells migrate and proliferate, and they subsequently differentiate into vessel-forming quiescent phenotype cells, Therfore, it was speculated that a modifier of cell differentiation could also affect angiogenesis. In order to identify new antiangiogenic factors, the research was conducted to estimate the inhibitory activities of cell differentiation agents by means of chick embryo chorioallantoic membrane(CAM) assay. Hence, we have established the CAM assay for the screening of antiangiogenic agents. Using the CAM assay, we found that ursolic acid, a tumor cell differentiation-inducing agent, showed a markedly inhibitory effect on chick embryonic angiogenesis.
Ducklings collected from three farms, having history of rapid onset and spread of nerve signs including kick spasmodically with legs and opisthotonos, were pathologically, barteriologically, virologically examined. Grossly, multiple petechial to ecchymotic hemorrhages were detected in the swollen liver. Histopathologically, diffuse coagulative necrosis of hepatocytes was characteristic in acute cases. Chronic cases revealed marked bile duct hyperplasia rather than hepatocyte necrosis. Some of these cases exhibited multiple granulomas consisting of macrophages, heterophil, fibrin and necrotic cell debri. Filtered homogenate of livers sampled from ducklings caused embryo death with marked hemorrhage and swollen of liver after inoculation into chorioallantoic membrane. Three strains of Salmonella app.,S montevideo, S hadar, and S give, which were biochemically and serologically identified, weir isolated from ducklings of three farms, respectively. From these results, these ducklings were concurrently infected with duck hepatitis virus and Salmonella spp.
대한약학회 2002년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2
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pp.359.2-359.2
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2002
In the previous study, we reported that 2'-hydroxy-4'-methxoychalcone, synthetic chalcone inhibited PGE2 production in TPA- stimulated rat peritoneal macrophages by inhibiting the induction of COX-2 protein. The present study was carried out to clarify whether 2'-hydroxy-4'-methoxychalcone inhibit angiogenesis by the experimental methods in vitro and in vivo. 2'-Hydroxy-4'-methoxychalcone decreased angiogenesis of both chick embryos in the chorioallantoic membrane assay and basic fibroblast growth factor-induced vessel formation inthe mouse Martigel plug assay. (omitted)
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.1
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pp.145.2-145.2
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2003
Gardenia jasminoides Ellis has been used in traditional medicine for the treatment of inflammation, jaundice, headache, fever and hypertension. The 70% ethanolic extract of gardenia fruit showed strong anti-angiogenic activity in the chick embryo chorioallantoic membrane (CAM) assay. Among hexane, ethyl acetate, n-butanol and aqueous fractions prepared from the 70% ethanolic extract, the n-butanol fraction was found to be most effective in the CAM assay. (omitted)
The current study aimed to assess some novel pharmacological activities of vanillin. Vanillin inhibited the chick chorioallantoic membrane (CAM) angiogenesis. Vanillin had anti-inflammatory activity using the acetic acid-induced permeability model in mice. Anti-nociceptive activity of vanillin was shown using the acetic acid-induced writhing test in mice. Vanillin inhibited production of nitric oxide (NO) and induction of inducible nitric oxide synthase (iNOS) but not cyclooxygenase-2 (COX-2) in the lipopolysaccharide (LPS)-activated RAW264.7 macrophages. Vanillin decreased the level of iNOS mRNA in the LPS-activated macrophages. Taken together, these results suggest that vanillin can have anti-angiogenic, anti-inflammatory and anti-nociceptive activities in ICR Mice.
Seow, Lay-Jing;Beh, Hooi-Kheng;Sadikun, Amirin;Asmawi, Mohd Zaini
셀메드
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제4권1호
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pp.4.1-4.4
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2014
Gynura segetum, family Asteraceae is a cultivated species and can be found growing in the tropical regions of Indonesia and Malaysia. The plant is known for its use for the treatment of cancer, inflammation, diabetes, hypertension and skin afflictions. In the current study, anti-inflammatory effect of Gynura segetum leaf has been investigated. The present study investigated the in vivo anti-inflammatory effect of Gynura segetum leaf by using hen's egg test-chorioallantoic membrane (HET-CAM) assay. Different solvent extract of Gynura segetum leaf were tested, the most active methanol extract was further fractionated and tested. Among the extracts tested, the methanol extract showed a significant good anti-inflammatory effect (76.8% inhibition at 50 ${\mu}g/disc$) on the HET-CAM assay as compared with the anti-inflammatory drug indomethacin (82.1% inhibition). However, the fractionated sample exhibited a significantly lower activity in comparison to crude methanol extract. The results demonstrated that Gynura segetum leaf displayed remarkable anti-inflammatory effects, which support the folkloric uses of this plant for treatment of inflammation.
The current work was designed to assess novel pharmacological activities of 4-hydroxybenzaldehyde (HD), a major phenolic constituent of various natural products of plant origin, such as Gastrodia elata Blume. HD exhibited a significant inhibition in the chick chorioallantoic membrane (CAM) angiogenesis. HD also displayed an inhibitory effect in acetic acid-induced permeability in mice. Anti-nociceptive activity of HD was convinced using the acetic acid-induced writhing test in mice. HD was able to suppress production of nitric oxide (NO) and induction of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) in the lipopolysaccharide (LPS)-activated RAW264.7 macrophages. HD also diminished the reactive oxygen species (ROS) level elevated in the LPS-activated macrophages. In brief, HD exhibits anti-angiogenic, anti-inflammatory and anti-nociceptive activities possibly via down-regulating iNOS and/or COX-2, which may be partly responsible for pharmacological efficacies of various natural products.
To evaluate the antitumor activity, antimetastatic and immunomodulatory effects of samryongbakchulsankamibang(SBSK) studies were done experimentally, In cytotoxicity against P388, A549. SK-OV-3, B16-F10 and SK-MEL-2. concentration inhibiting cell growth up to below 40% of control was recognized at $10^{-3}g/ml$ of SBSK. In Inhibitory effect on activity of DNA topoisomerase I. the $IC_{50}$ was shown $200-400{\mu}g/ml$ of SBSK. The T/C was 154% in SBSK-treated group in S-180 bearing ICR mice, The concentration inhibiting adhesion of A549 and B16-F10 to complex extracellular matrix up to below 30% of control was recognized at $5{\times}10^{-4}$, $1{\times}10^{-3}\;g/ml$ of SBSK. In pumonary colonization assay with B16-BL/6, a number of colonies in the lungs were decreased significantly in SBSK-treated group as compared with control group, In hematological changes in B16-BL/6 injected C57BL/6, numbers of WBC and platelet were not changed significantly in SBSK-treated groups, In CAM and in vitro neovascularization assay, angiogenesis was inhibited significantly in SBSK-treated group as compared with control group. From above results it was concluded that SBSK could be usefully applied for the prevention and treatment of cancer.
In the present study, we investigated the effects of motesanib (AMG 706), a multikinase inhibitor alone and in combination with DuP-697, an irreversible selective inhibitor of COX-2, on cell proliferation, angiogenesis, and apoptosis induction in a human colorectal cancer cell line (HT29). Real time cell analysis (RTCA, Xcelligence system) was used to determine the effects on colorectal cancer cell proliferation. Apoptosis was assessed with annexin V staining and angiogenesis was determined with chorioallantoic membrane model. We found that motesanib alone exerted antiproliferative, antiangiogenic and apoptotic effects on HT29 colorectal cancer cells. Combination with DUP-697 increased the antiproliferative, antiangiogenic and apoptotic effects. Results of this study indicate that motesanib may be a good choice in treatment of colorectal tumors. In addition, the increased effects of combination of motesanib with DuP-697 raise the possibility of using lower doses of these drugs and therefore avoid/minimize the dose-dependent side effects generally observed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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