Teratogenic effects of diazinon were assessed morphologically and cholinergic blocking agents. Diazinon at doses ranging from 25 to 2000 ug /egg, was Injected on day 3 of incubation. TD50s were different for the various teratogenic signs (wry neck, micromelia, abnormal feathering, abnormal beak and curled claws). The threshould dose for wry neck was higher than threshould dose for other signs; 40 ug/egg produced substantial micromelia, abnormal feathering. abnormal beak and curled claws, but gave no signs of wry neck. In contrast to the teratogenic doses, the LD50 of diazinon was very high (above 2000 ug /egg). One of the characteristics of diazinon-induced teratogenesis was reduced body weight (78.7%) and body length (73.8%). Maximal teratogenic effects, scored as signs of retarded growth, wry neck micromelia, abnormal feathering, abnormal beak, and curled claws, were produced when the insectcide was administered on the third or fourth day. The threshold dose for type II teratogenic signs(such as wry neck and short neck) was higher than for type I (such as micromelia and abnormal feathering). Morphological studies, using atropine and gallamine, suggested that nicotine but not muscarinic receptors may be involved in the mechanism of diazinon induced type II malformations.
The central nervous system depressant effect of xylazine and xylazine-ketamine was studied in chicken and mice. Intraperitoneal injection of xylazine(1~30 mg/kg) and xylazine(1~30 mg/kg)-ketamine(100 mg/kg) induced a loss of the righting reflex in chicken and mice, respectively. These effects of xylazine were dose-dependent. The results obtained were as follows; 1. The effect of xylazine-induced depression was antagonized by adrenergic antagonists having ${\alpha}_2$-blocking activity(yohimbine, tolazoline, piperoxan and phentolamine). 2. Yohimbine was most effective in the reduction of the CNS depression by xylazine. 3. Phenoxybenzamine and prazosin did not reduced CNS depression by xylazine in both species. 4. Labetalol (${\alpha}_1$, ${\beta}_1$-adrenergic antagonist) and propranolol(${\beta}$-adrenergic blocking agent) were not effective in reducing xylazine induced depression. 5. Cholinergic blocking agents (atropine and mecamylamine), a dopaminergic antagonist (Haloperidol), a histamine $H_1$-antagonist(chlorpheniramine), a histamine $H_2$-antagonist(cimetidine), a serotonergic-histamine $H_1$ antagonist(cyproheptadine) were not effective in reducing xylazine-induced depression. 6. Xylazine-induced depression is mediated by ${\alpha}_2$-adrenergic receptors and appears not to be involved in cholinergic, dopaminergic, serotonergic or histaminergic pathways.
Teratogenic effects of diazinon were assessed on morphology of chick embryos cholinergic blocking agents. Diazinon at doses ranging from 25 to $2000{\mu}g/egg$, was injected on Day 3 of incubation. $TD_{50S}$, were different for the various teratogenic sings such as wry neck, micromelia, abnormal feathering, abnormal beak and curled claws. The threshold dose for wry neck was higher than the threshold dose for other signs; $40{\mu}g/egg$ produced substantial micromelia, abnormal feathering, abnormal beak and curled claws, but gave no sings of wry neck. In contrast to the teratogenic doses, the $LD_{50}$ of diazinon was very high(above $2000{\mu}g/egg$). One of the characteristics of diazinon-induced teratogenesis was reduction of body weight(78.8%) and body length(73.8%). Maximal teratogenic effects, scored as sings of retarded growth, wry neck, micromelia, abnormal feathering, abnormal beak, and curled claws, were produced when the insectcide was administered on the third or fourth day. The threshold dose for type II teratogenic sings including wry neck and short neck was higher than for type I including micromelia and abnormal feathering. Morphorlogical studies, using atropine and gallamine, suggested that nicotinc but not muscarinic receptors may be involved in the mechanism of diazinon-induced type II malformations.
The effects of various autonomic blocking agents to perivascular nerve stimulation were investigated on isolated coronary artery of pig. 1. The magnitude of contractile response to perivascular nerve stimulation increased with increasing frequency(280Hz) of stimulation. 2. The contractions to perivascular nerve stimulation(40V, 40Hz, 0.5msec, 1min) were increased by pretreatment of the cholinestrase inhibitor, physostigmine. 3. The contraction to perivascular nerve stimulation(40V, 40Hz, 0.5msec, 1min) was antagonised by the muscarinic antagonist, atropine. 4. The contraction to perivascular nerve stimulation(40V, 40Hz, 0.5msec, 1min) was blocked by the neural blocker, tetrodotoxin. 5. The contractions to perivascular nerve stimulation(40V, 40Hz, 0.5msec, 1min) were not significantly affected by the ${\alpha}$-adrenergic antagonist, phentolamine or ${\beta}$-adrenergic antagonist, propranolol. 6. The contractile response by the acetylcholine was increased by the pretreatment of cholinestrase inhibitor, physostigmine. This findings suggest that the powerful excitatory action by the perivascular nerve stimulation may be linked to muscarinic receptor by cholinergic nerve excitation in coronary artery of pig.
In this study, the effects of phenoxybenzamine and related drugs on the action of CCK-PZ and caerulein were examined in isolated gall bladder of guinea pig and higher esophagus strip of fowl. The strips were placed in a bath containing Locke-Ringer solution maintained at $38^{\circ}C$. Oxygen was continuously bubbled through the solution. The contractile response was measured isometrically by a force displacement transducer connected to polygraph. In isolated gall bladder preparation caerulein produced contractile response of CCK-PZ type, but the relative potency on a weight basis was 30 times stronger than CCK-PZ. The response of caerulein or CCK-PZ was not blocked by cholinergic blocking agent and both alpha and beta adrenergic blockades, however, the response of caerulein or CCK-PZ was exceptionally blocked by phenoxybenzamine. In isolated esophagus strip CCK-PZ with high concentration produced marked contraction which was not modified by atropine and other blocking agents, whereas the response was blocked by phenoxybenzamine. These results lead to the conclusion that phenoxybenzamine inherently inhibits the contractile response of CCK-PZ and caerulein on esophagus and other smooth muscle.
유뇨증의 치료제로서 널리 사용되고 있는 imipramine의 작용기전에 관한 학설이 여러가지가 있으나 그 중 콜린성수용체 봉쇄작용을 관찰하기 위한 방법으로 평활근 세포를 분리배양하여 단일세포에 대한 acetylcholine의 수축작용과 이에 대한 imipramine의 길항작용을 atropine의 그것과 비교해 보기로 하였다. 개의 방광을 적출하여 $0{\sim}4^{\circ}C$의 K-H 용액내에서 $2{\times}2mm$크기의 평활근 절편을 얻어 $36^{\circ}C$의 collagenase 용액에 넣고 95%/5% $O_2/CO_2$, 혼합산소 공급하에서 17~20분동안 배양하여 분리된 부유세포군을 5 ml test tubes에 나누어 담고 acetylcholine을 $10^{-14}M{\sim}10^{-9}M$의 농도로 첨가하였다. Acrolein 1%를 가하여 수축한 세포를 고정시킨 후, 위상차 현미경에 장착한 CCTV camera로 채취한 영상을 microscaler로 전송하고 monitor상에서 세포의 길이를 측정하였다. 분리된 세포들은 acetylcholine에 의해 5초 이내에 최대 수축을 보였으며 이후 120초까지 수축상태를 지속하였다. Atropine은 acetylcholine 유발 수축을 atropine $10^{-7}M$ 에서부터 농도의존적으로 억제하였으며, imipramine도 acetylcholine 유발수축을 atropine과 같은 경향으로 농도의존적으로 억제하였는데, imipramine $10^{-9}M$의 저농도에서도 유의한 억제를 보였다. 이상의 결과를 종합하면 본 실험에 사용된 조건하에서의 collagense를 이용한 세포 분리법은 단일세포를 대상으로 하는 실험을 위하여 가용한 방법이며, imipramine은 개의 방광평활근 단일세포에서 atropine보다 더 강력한 콜린성 수용체 봉쇄작용을 나타낸다고 생각되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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