Chitosan oligosaccharides (COSs) were prepared and fractionated into three groups of COS [a high molecular weight COS (HMWCOS), medium molecular weight COS (LMWCOS), and low molecular weight COS (LMWCOS)] according to their molecular weight, using an ultrafiltration membrane enzymatic bioreactor designed earlier [8]. Antitumor activity of these COSs was then examined against Sarcoma 180 solid (S180) or Uterine cervix carcinoma No. 14 (Ul4) tumor cell-bearing mice. Among these COSs, MMWCOS with molecular weight range from 1.5 to 5.5 kDa effectively inhibited the growth of both tumor cells in the mice. In addition, the administration of MMWCOS resulted in increased thymus weight among lymphoid organs. The mice treated with MMWCOS showed improved survival rate and larger number of survivors after 40 days of feeding. The most effective of MMWCOS far antitumor activity in the S180- or U14-bearing mice was 20 mg/kg/day or more.
양식넙치의 세균성 질병의 원인균주인 Vibrio sp., Edwardsiella tarda 및 Streptococcus sp.를 제주산 양식 넙치로부터 직접 분리하였으며, 이들 세균에 대하여 키토산 및 분자량 크기에 따라 분획된 3종류의 키토산올리고당(HMW-COS, MMW-COS, LMW-COS)의 항균활성을 검토하였다. 키토산과 HMW-COS는 모든 세균에 대한 항균활성이 우수하였으며, 특히 Vibrio sp.과 Sfreptococcus sp.에 대해서 높은 항균활성을 나타내었다. 이들에 대한 결과는 키토산의 항균활성은 분자량에 따라 크게 의존한다는 사실을 보여주었다 E.tarda에 대한 키토산 및 HMW-COS의 항균활성은 처리시간을 증가시킴으로써 항균활성이 증가함을 보였으며, 이들의 항균기 작을 조사하기 위 한 SEM의 관찰에서, 세균들은 키토산에 의해 응집되어 서로 엉켜있는 형태를 보여주고 있었다. 이러한 현상은 키토산 및 HMW-COS가 세균의 증식을 명확하게 억제하고 있음을 보여주는 증거라 할 수 있다. 이것은 지금까지 여러 보고에서 밝혀진 키토산의 항균활성 메카니즘과 일치하는 것이라 판단된다.
The purpose of this study was to evaluate effect of chitosan-oligosaccharides (CHIOL) on hydrophobicity of pathogenic E coli including a field isolate from suckling piglet with diarrhea, E coli-O157 : H7, and E coli-O149 : K88ac. E coli field isolate appeared adhesion of 100% to n-hexadecane between 0.00125% and 0.05% CHIOL. E coli-O157 : H7 occurred adhesion of 69% and 64% under the level of 0.00125% and 0.025% CHIOL, respectively. E coli-O149 : K88ac showed adhesion of 100% in higher than 0.025% CHIOL. For cationic action, the adhesion of E coli isolate and E coli-O149 : K88ac to n-hexadecane were inhibited at level of higher than 10mM $Ca^{2+}$ but did not induce any difference among the concentrations used(p < 0.01). However, the adhesion of E coli-O157 : H7 to n-hexadecane was inhibited at level of higher than 50mM $Ca^{2+}$. In a field trial, control piglets showed average mortality of up to 58% during 3 days after the onset of diarrhea. In contrast, the prevalence of E coli-induced diarrhea in CHIOL-treated groups without mortality was dropped down to average 34% on the 1st day after the treatment of CHIOL, and average 2% on the 4th day. After then, piglets with diarrhea was not present. In conclusion, the low concentrations of CHIOL were most likely to associate with the enhancement of hydrophobicity to pathogenic E coli. Calcium inhibited the hydrophobicity of E coli by CHIOL. These results suggested that CHIOL could be played an efficient and reliable role in treating enteric colibacillosis of piglets.
Chitosan is a natural biopolymer of N-acetylglucosamine (-1,4 linked 2-acetamido-D-glucose), which is obtained after alkaline deacetylation of the chitin derived from the cell walls of lower plants and in the skeletal tissues of lower animals including arthropods and mollusks. In the recent studies, chitin and chitosan have attracted interest for converting them to oligosaccharides because the oligosaccharides are not only water-soluble but also possess versatile functional properties such as antimicobial activity (Jeon and Kim, 2000; Jeon et al., 2001). (omitted)
Chinin is the second most plentiful natural polymer. Currently, chitin and chitosan are manufactured commercially in large scale from crab and shrimp shell as fish processing waste. They is being used in many commercial application because of their various functional properties. Chitosan, in particular, is being evaluated as biomedical materials in a number of food and pharmaceutical industries. Despite their potential abilities, the perfect safety had been demonstrated until now. However, the long-term feeding with chitin was not any negative effect the body weights and serum enzymatic activities in mice. And, in rats supplied with $5\%$ of chitosan diet for 450 days, there was no changes of Ca concentration in blood, bone and other organs except for in muscle. Consequently, there was no direct toxicity of chitin and chitosan against some animals such as rat and mouse by recently reports.
다양한 분자량을 가진 저분자량 수용성 키토산을 얻기 위해 젖산염이 결합되어 있는 키토산 올리고당을 한외여과막 장치를 이용하여 분리하였고, 새로운 염 제거법으로 유리 아민기를 가진 LMWSC를 제조하였다. 젖산염이 제거된 LMWSC의 특성과 탈아세틸화도가 적외선 분광기(Infrared spectroscopy, IR) 및 핵자기공명장치($^1H-Nuclear$ Magnetic Resonance, $^1H-NMR$)에 의해 확인되었다. 분자량을 나타내는 다분산지수(PDI)는 $1.278{\sim}1.499$로 비교적 좁은 분자량분포를 나타내었다. 유전자 전달체로서의 가능성을 확인하기 위하여, 성공적으로 분자량에 따라 분리된 키토산 올리고당과 염이 제거된 LMWSC의 유전자 전이효율이 293T cell을 이용하여 확인하였다. 또한 유전자 전이효율을 향상시키기 위해 제조된 LMWSC 유도체가 Balb/C mice를 이용하여 평가되었다.
Chitosan is derived from chitin by deacetylation in the presence of alkali, which is a copolymer consisting of $\beta$-(1longrightarrow4)-2-acetamido-D-glucose and $\beta$-(1longrightarrow4)-2-amino-D-glucose units with the latter usually exceeding 80% (Arvanitoyannis et al., 1998). Chitosan has been developed as new physiological material since it possesses antibacterial activity, hypocholesterolemic activity and antihypertensive action. However, even though chitosan has very strong functional properties in many areas, its high molecular weight and high viscosity may restrict the use in vivo. In addition, there is little doubt that such properties will influence absorption in the human intestine. Recently, studies on chitosan have attracted interest for converted chitosan to oligosaccharide, because the oligosaccharide possesses not only water-soluble property but also versatile functional properties such as antitumor activity, immune-enhancing effects, enhancement of protective effects against infection with some pathogens in mice, antifungal activity, calcium absorption accelerating effect (Jeon et al., 1999) and antimicrobial activity. There is, however, little information on the toxicity of chitosan oligosaccharide. (omitted)
본 연구는 고콜레스테롤을 급여한 흰쥐 에 키토산 올리고당의 첨가 수준을 달리한 식이가 흰쥐의 지방대사에 미치는 영향을 알아보고자 수행하였다. 체중이 174.7$\pm$6.3 g인 Sprague-Dawley종 수컷 흰쥐에게 고콜레스테롤혈증을 유발시키기 위하여 콜레스테롤을 식 이 무게의 0.5%를 급여하고 키토산 올리고당을 식이 무게의 1.0%와 2.0%로 하여 총 3군으로 나누어 4주간 사육하였다. 식이섭취량과 체중증가량은 식이에 의한 영향이 없었다. 혈청 중 총 콜레스테롤, 중성지방은 대조군에 비해 2.0% 키 토산 올리고당을 첨가한 군에서 유의적으로 그 농도가 크게 감소하였으며 HDL-콜레스테롤/총콜레스테롤 비는 키토산 올리고당 첨가에 의해 높아지는 경향을 보였다. 간 조직 중 TBARS 함량은 키토산 올리고당을 첨가하였을 경우 유의적으로 낮게 나타났으며 SOD와 catalase의 활성은 키토산 올리고당을 첨가한 군이 대조군에 비해 유의적으로 낮았다. 이상의 결과를 볼 때 키토산 올리고당은 체내 지방대사에 있어 총콜레스테롤과 LDL-콜레스테롤, 중성지방 및 TBARS 함량을 낮추고 HDL-콜레스테롤/총 콜레스테롤 비는 높이는 효과를 나타냈으며, 또한 생체내 고콜레스테롤에 의한 산화적 스트레스로부터 간을 보호하는 것을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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