• 미생물학회지
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• 제45권3호
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• pp.257-262
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• 2009

Bacillus licheniformis WL-12의 carboxymethyl cellulase (cellulase) 유전자를 함유한 대장균 균체 파쇄상등액으로부터 DEAE-Sepharose와 Q-Sepharose 컬럼 크로마토그래피를 통해 cellulase를 정제하였다. 정제된 효소의 비활성은 163 U/mg이었으며, SDS-PAGE에 의해 측정된 분자량은 약 49.5 kDa으로 나타났다. pH 5.5와 $55^{\circ}C$에서 최대 반응활성을 보였으며, SDS (5mM)에 의해서는 cellulase의 활성이 완전히 저해되었고 $Cu^{2+}$5mM)에 의해서는 약간 증진되었다. 정제된 cellulase는 CMC, konjac, barley $\beta$-glucan과 lichenan을 가수분해하였으나 xylan, locust bean gum 및 p-nitrophenyl-$\beta$-glucopyranoside를 분해하지 못하였다. Cellooligosaccharides를 정제된 WL-12 cellulase로 분해하였을 때 cellobiose와 cellotriose가 주된 최종 반응산물로 관찰되었으며 cellobiose보다는 중합도가 큰 cellotriose, cellotetrasoe와 cellopentaose는 분해하였으나 cellobiose는 분해하지 못하는 것으로 확인되었다.

• 한국균학회지
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• 제1권1호
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• pp.23-28
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• 1973

The soil of Kwangneung area(Kyeunggi-Do) was inoculated directly into wheat-bran-media and after $3{\sim}4$ days of incubation, a Penicillium species whose cellulase activity was 1011u/g was isolated. With the treatment of mutagenic agents an improved strain(cellulase activity: 1303u/g) was obtained. This strain was screened again by mono-spore isolation method. Finally a strain C8-14 (cellulase activity: 2351u/g) which had lesser spores than the wild strain was obtained.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제8권3호
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• pp.208-213
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• 1998

The effect of the addition of wheat bran to the growth medium on the production of cellulolytic enzymes of Trichoderma reesei Rut C30 was studied in batch culture using shake flasks. The activity of cellulase was enhanced by the addition of wheat bran to the cellulase production medium. $KH_2PO_4$-$K_2HPO_4$ buffer was used for pH control during cellulase production. As a result, high cellulase activities were obtained in shake flask culture; a CMC (carboxymethyl cellulose) activity of 125.78 U/ml was obtained from 2% Avicel- and 3% wheat bran-containing medium and an FP (filter paper) activity of 12.85U/ml was obtained from 1% Avicel- and 5% wheat bran-containing medium after 6 days of cultivation.

• Applied Biological Chemistry
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• 제24권4호
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• pp.260-266
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• 1981

Pleurotus ostreatus 301과 Lentinus edodes 3-1을 볏짚배지(培地)에 배양(培養)하여 배양중(培養中)에 생성(生成)된 cellulase와 xylanase의 성질(性質)을 검토(檢討)한 결과(結果) P. ostreatus 301의 cellulase 활성(活性)은 기질농도(基質濃度) 0.6%, L. edodes 3-1은 0.8%, xylanase는 양균주(兩菌株)에서 1%까지는 비례적(比例的)으로 증가(增加)하였다. 반응시간(反應時間)에 따른 환원당(還元糖)의 생성(生成)은 양균주(兩菌株)에서 cellulase는 60분(分), xylanase는 30분(分)까지 비례적(比例的)으로 증가(增加)하였다. 최적(最適) pH는cellulase에서 P. ostreatus 301은 pH 4.0, L. edodes 3-1은 pH 4.5이었으며 xylanase는 양균주(兩菌株)가 pH 5.0이었다. pH 안정범위(安定範圍)는 P. ostreatus 301의 cellulase에서 pH $4.0{\sim}6.0$, L. edoder 3-1은 pH $3.0{\sim}5.0$이었고 xylanase는 P. osteatus 301에서 pH $4.5{\sim}6.0$, L. edodes 3-1에서는 pH $3.5{\sim}6.0$이었다. 최적온도(最適溫度)는 P. ostreatus 301의 cellulase에서 $40^{\circ}C$, L. edodes 3-1의 xylanase는 $45^{\circ}C$이었고, L. edodes 3-1의 cellulas와 P. ostreatus 301의 xylanase는 $50^{\circ}C$ 이었으며 열안정성(熱安定性)은 최적온도(最適溫度) 이하이었고, $70^{\circ}C$, 10분(分)으로 대부분 실활(失活)되었다. 염류(鹽類)의 영향(影響)은 L. edodes 3-1의 cellulase는 $Co^{++},\; Mg^{++}$에 의해서 효소력(酵素力)이 증가(增加)되었으며,$Mg^{++},\;Cu^{++}$에 의해서는 양균주(兩菌株)에서 심한 조해(阻害)를 를 보였고 xylanase는 $Ca^{++},\;Co^{++},\;Mg^{++}\;Cd^{++}$ 등은 약간 증가(增加)를 보였고, $Hg^{++}$은 조해(阻害)가 심했다.

• Journal of Animal Science and Technology
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• 제52권1호
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• pp.65-70
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• 2010

사료곡물을 효율적으로 이용하기 위해, 산성 cellulase를 분비하는 ATC6 균주를 선발하였다. 선발된 ATC6 균주의 형태, 당 이용성 및 16S rDNA 서열분석 등을 통해 동정한 결과 Bacillus amyloliquefaciens에 속하는 것으로 나타났으므로, B. amyloliquefaciens ATC6로 명명하였다. B. amyloliquefaciens ATC6가 분비하는 cellulase 효소의 활성은 대수생장기 중반부터 급격히 증가하였고, 균의 생장이 정체기에 이르면 효소의 활성도 더 이상 증가하지 않는 것으로 나타났다. 효소의 최적 pH를 조사한 결과, pH 4.5에서 최대의 효소 활성을 나타내었으며, pH 4.0에서도 최고 활성의 80% 이상을 유지하였다. 또한 pH 4.0~pH 8.0까지 상대적으로 넓은 범위에서 최대 활성의 60% 이상을 유지하였다. Cellulase 활성의 최적 온도는 $55^{\circ}C$ 이었으며, $75^{\circ}C$의 고온에서도 최대 활성의 50% 정도의 활성을 나타내었다. 효소의 열 안정성을 조사한 결과, $45^{\circ}C$ 및 $55^{\circ}C$에서는 2시간 후에도 효소의 활성이 안정하게 유지되었으나, $65^{\circ}C$에서는 시간의 경과와 함께 효소 활성이 급격히 감소하는 것으로 나타났다.

• 한국산림과학회지
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• 제39권1호
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• pp.57-63
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• 1978

Trichoderma viride SANK호(號) cellulase에 의(依)한 목재(木材) 가수분해(加水分解)에 관(關)한 연구(硏究)로서 재료(材料)는 산오리나무재(材)를 사용(使用)하였다. 그리고 당생성(糖生成)을 위한 cellulase의 최적(最適) 반응조건(反應條件)을 조사(調査)하였다. Trichoderma viride 조효소액(粗酵素液)은 진탕배양법(振盪培養法)에 의(依)하여 생산(生產)하였고, 이것을 염석효소액(鹽析酵素液)을 조제(調製)하여 사용(使用)하였다. 기질(基質)은 산오리나무재(材) 톱밥을 과초산법(過醋酸法)에 의(依)하여 탈(脫)리그닌 한것을 사용(使用)하였다. 환원당(還元糖) 정량(定量)은 DNS법(法)에 의(依)하였다. 결과(結果)는 다음과 같다. 1. 최적(最適) pH는 5.0이며, pH 안정성(安定性)의 범위(範圍)는 4.0~6.0으로 나타났다. 2. 반응온도(反應溫度)는 $40^{\circ}C$가 최적(最適)이였으며, 온도(溫度)의 안정성(安定性)은 $40^{\circ}C{\sim}50^{\circ}C$ 범위(範圍)로 나타났다. 3. 효소농도(酵素濃度)는 높을수록 환원당(還元糖) 생성율(生成率)은 증가(增加)되었다. 4. 기질농도(基質濃度)는 높을수록 단위(單位) 기질(基質)에 대(對)한 환원당(還元糖) 생성율(生成率)은 감소(減少)되었다. 5. 당류중(糖類中) pructose가 가장 강(强)한 조해제(阻害劑)로 나타났으며, glucose의 조해작용(阻害作用)은 약(弱)하게 나타났다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제19권3호
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• pp.130-138
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• 1976

농산페기물을 이용(利用)한 발효사료(醱酵飼料) 생산(生産)에 관한 기초적인 연구로서 25점(點)의 시료(試料)에서 cellulase 생산성(生産性)이 우수한 두개의 균주를 선정(選定)하여 동정(同定)하였다. 선정(選定)된 두 균주에 대하여 cellulase의 생산 최적조건을 검토하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Cellulase 생산성(生産性)이 우수한 균주(菌株)로 Aspergillus niger-SM6와 Trichoderma viride-SM10 두 균주를 선정(選定)하였다. 2. 두 균주 모두 배양시(培養時) pH $5.0{\sim}6.0$에서 배양(培養)5일째에 최고(最高)의 효소생산성(酵素生産性)을 나타내었다. 3. Aspergillus niger-SM6은 배양시(培養時) 첨가한 CMC가 18%, $(NH_4)_2SO_4$가 33%, CSL이 21%, 감귤피가 21%의 효소생산(酵素生産) 증가를 나타내었다. 또한 전처리한 왕겨를 첨가하여 배양하였을 때 $21{\sim}28%$ 효소생성이 증가하였으며 효소생산에 있어서 50%까지 밀기울과 대체가능하였다. 4. Trichoderma viride-SM10은 배양시 첨가한 CMC가 14%, $NH_4NO_3$가 40%, Vit-free casamino acid가 27%, 감귤피가 18%의 효소생산 증가를 나타내었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제4권3호
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• pp.105-110
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• 1976

곰팡이를 이용하여 섬유소분해효소를 생산할 목적으로 전국각처에서 수집한 102종의 시료로부터 총 221주의 곰팡이를 분리하였다. 이들 분리균주의 섬유소분해능을 여과 지붕괴법 ？ 액화법 및 cup method로서 1차 36균주를 선별하였고 1차 선별된 균주를 탄소원을 변경하여 배양한뒤 활성을 추정하여 2차로 15균주를 선별하였다. 15균주를 개선된 배지에서 배양한뒤 $C_1$, $C_{x}$ 및 filter paper-activity을 측정하여 최종적으로 $C_1$및 $C_{x}$ -Cellulase의 활성이 강한 균주인 Aspergillus sp. strain No. AS-9, Penicillium sp. strain No. KI-1-2 Trichoderma sp. strain No. KI-7-2, KI-7-5, 및 KI-4-IB을 선별하였다. 이상 최종적으로 선별된 균주중의 strain No. KI-4-1-1B 조효소액으로 ammonia 처리볏짚을 당화시킬 때 24시간 작용으로 26%가 당화되었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제8권6호
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• pp.575-580
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• 1998

Cellulase production by batch culture using the Trichoderma reesei Rut C30 strain with various concentrations of Solka Floc with 1 % wheat bran was studied in a 2.5 I fermenter. The cellulase activity increased with Solka Floc concentration up to 5%. When 5% Solka Floc and 1% wheat bran were contained in the medium, carboxymethyl cellulose (CMC) and filter paper (FP) activities were 232.4 U/$m\ell$ and 21.25 U/$m\ell$, respectively. The productivity was 143.6 FPU $1^{-l}h^{-1}$ and the yield was 425 FPU/g. The colonial morphology of T. reesei Rut C30 grown on Avicel agar plates and the changes in mycelial morphology of T. reesei Rut C30 with culture time are also presented.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제31권1호
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• pp.42-45
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• 2003

토양에서 분리한 균주 Trichoderma sp. SO-571의 cellulase를 생산하기 위해 3.0% cellulose, 4.0% 탈지대두, 3.0% 밀기울, 0.5% ($NH_4$)$_2$$SO_4$, 0.2% urea, 1.0% CSL, 0.5%$ KH_2$$PO_4$, 0.2% Tween 80을 사용하여 생산한 결과, 균체량은 배양 62 시간에 가장 높은 양을 보였으며, cellulase 활성은 배양시간이 증가할수록 증가하는 경향을 보였다. Ultrafiltration을 이용하여 cellulase를 정제한 결과, 47.8%의 수율과 4.6배의 정제도를 보였다. Cellulase를 섬유가공 처리에 사용하기 위한 최적 반응 pH및 온도는 pH 5, $60^{\circ}C$에서 최대의 활성을 보였다 섬유가공 처리에 대한 cellulase효과를 측정하고자 청천과 텐셀을 대상으로 감량율을 측정한 결과, 청천에 대한 감량율은 분리균주가 생산한 cellulase는 2.9%, Celluclast 1.5 L은 2.2%의 감량율을 보였다. 텐셀 처리시 분리균주의 cellulase는 0.62%, Celluclast 1.5 L은 0.45% 감량율을 보였다. 또한 반응시간에 따른 천청에 탈색정도를 측정하고자 세탁 가공처리한 물의 청색정도를 660nm에서 측정한 결과, 세탁시간이 증가할수록 흡광도가 증가하였다.