In fermentation studies it revealed that Streptomyces sp. SMF 3001 started to synthesize extracellular alkaline protease from early exponential phase of cell growth. The biosynthesis of the alkaline protease was greatly induced by skim milk as a sola nitrogen source and further stimulation was observed under inorganic sulphur limited culture. However, it was found that the biosynthesis was apparently repressed by $NH_4^+$ and free amino acids, specially by cysteine. It was considered that the strain SMF 301 of Streptomyces sp. would produce the alkaline protease for the uptake of sulphur compounds from protein contained in the culture broth.
Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) are ubiquitous in the environment. They are highly toxigenic and carcinogenic. Probiotic bacteria isolated from fermented foods were tested to check their ability to degrade and/or detoxify PAHs. Five probiotic bacteria with distinct morphologies were isolated from a mixture of 26 fermented foods co-cultured with benzo(a)pyrene (BaP) containing Bushnell Haas minimal broth. Among them, B. velezensis (PMC10) significantly reduced the abundance of BaP in the broth. PMC10 completely degraded BaP presented at a lower concentration in broth culture. B. velezensis also showed a clear zone of degradation on a BaP-coated Bushnell Haas agar plate. Gene expression profiling showed significant increases of PAH ring-hydroxylating dioxygenases and 4-hydroxybenzoate 3-monooxygenase genes in B. velezensis in response to BaP treatment. In addtion, both live and heat-killed B. velezensis removed BaP and naphthalene (Nap) from phosphate buffer solution. Live B. velezensis did not show any cytotoxicity to macrophage or human dermal fibroblast cells. Live-cell and cell-free supernatant of B. velezensis showed potential anti-inflammatory effects. Cell-free supernatant and extract of B. velezensis also showed free radical scavenging effects. These results highlight the prospective ability of B. velezensis to biodegrade and remove toxic PAHs from the human body and suggest that the biodegradation of BaP might be regulated by ring-hydroxylating dioxygenase-initiated metabolic pathway.
Pseudomonas fluorescens에 의해 세포외에 생산된 furfural의 furoic acid로의 생물학적 전환을 촉진시키는 ninhydrin 반응에 양성인 대사물 (Ninhydrin positive Substance=NPS)을 ion exchange chromatography와 gel permeation chromatography 그리고 cellulose columm chromatography에 의하여 분리, 정제하였다. IR spectrophotometry와 $^H$-NMR spectrometry 그리고 $^{13}C-NMR$ spectrometry에 의해 이 NPS는 -$^H$ and $-NH_2$와 그리고 $-CH_2-OH$group을 갖는 유기물질로 추정된다.
Xenorhabdus nematophilus sp., an insect-pathogenic bacterium, was newly isolated from Korean entomopathogenic nematode of Steinernema carpocapsae, which can be used as a useful bioinsecticide. Primary and secondary form variants of Xenorhabdus nematophilus were observed when cultured in vitro. Primary form variants adsorbed bromothymol blue, while secondary form did not. However, many other characters of two variants were very similar. The variants were all rod-shaped and cell size was highly variable ranging from 0.5 by 2.0 ${\mu}$m to 1.0 by 5.0 ${\mu}$m. Both produced highly toxic substances and killed the insect larva within 20∼38 hr, indicating that insect pathogenicity of Xenorhabdus is not directly associated with its phase variation. In addition, cell-free culture supernatant of Xenorhabdus was sufficient to kill the insect larva by injecting it ito insect hemolymph; however, cell-harboring culture broth was more effective for killing the insect. The use of Xenorhabdus nematophilus may provide a potential alternative to Bacillus thuringiensis (Bt) toxins.
Phenylglycine was obtained as the sole metabolite when .alpha.-aminophenylacetonitrile was ted to the culture broth of Aspergillus furmigatus furmigatus. The isolated phenylglycine showed L-configuration with 80% optical purity. Examination of the hydrolysis of the substrate to phenylglycine with cell free extracts, and the supernatant fraction and the particulate fraction both of which were obtained after ultracentrifugation of the cell free extract at 100,000g, indicated that the nitrile group hydrolyzing enzymes, nitrilase existed not only in cytoplasm, but in microsome fractions.
We have developed an efficient immobilized cell separator for continuous operation of immobilized fungal cell cultures, and applied this separator to actual fermentation process for the production of cyclosporin A (CyA), a powerful immunosuppressant. In the experiments employing highly viscous polymer (carboxymethyl cellulose) solution, the decantor showed good separating performances at high solution viscosites and fast dilution rates. Air duct and cylindrical separator installed inside the decantor turned out to play key roles for the efficient separation of the immobilized cells. By installing the decantor in an immobilized perfusion reactor system (IPRS), continuous immobilized culture was stably carried out even at high dilution rate for a long period, leading to high productivities of free cells and CyA. Almost no immobilized biomass existed in effuluent stream of the IPRS, demonstrating the effectiveness of the decan- tor system for a long-term continuous fermentation. It was noteworthy that we could obtain these results despite of the unfavorable fermentation conditions, i.e., reduced density of the biosupports caused by overgrowth of cells inside the bead particles and existence of high density of suspended fungal cells (10g/l) in the fermentation broth.
Alteromonas sp. SR-14의 배양여액을 사용하여 C. calcitrans의 증식에 미치는 영향과 조류 증식저해 물질의 특성을 살펴보았다. Alteromonas sp. SR-14의 peptone broth 배양여액은 C. calcitrans에 대하여 증식 저해 활성을 나타내었으며, 이 균에 의한 조류 증식 저해 물질은 온도 $15~20^{\circ}C$, pH 7.0~9.0, 염분 농도 $23~30{\textperthousand}$의배양 조건에서 강한 활성으로 생성되었으며, 이러한 조건(온도 $20^{\circ}C$, pH 8.0, 염분 농도 $30\textperthousand$)에서는 정지기부터 활성이 증가하였다. Alteromonas sp. SR-14가 peptone broth에서 생산하는 조류 증식 저해 물질의 분자량은 약 3KDa~12KDa의 복합 물질이었는데, $100^{\circ}C$에서 10분간 열처리하였을 때 3~10KDa 이하의 물질은 내열성이 있었으나 10KDa 이상의 물질은 불활성 되었다.
Lactococcus lactis ssp. lactis ML8(L.lactis ML8)의 nisin 생산과 저항 특성을 구명하기 위하여 배지의 종류 및 pH가 nisin의 역가에 미치는 영향, 균체의 생육에 따른 nisin의 생산특성, nisin이 균체생육에 미치는 영향 및 $Ca^[2+}$ 이온의 존재가 균주의 nisin 저항성에 미치는 영향을 조사하였다. Nisin의 역가를 Micrococcus flacus에 대하여 항생효과를 나타내는 성질을 이용하여 agar diffusion법으로 측정하였을 때, M.flavus 생육에 대한 저해직경은 nisin 농도 (0.5`20 unit/ml)의 log치에 비례하였다.
Xenorhabdus nematophila (Xn)와 Photorhabdus tempeerata subsp. temperata (Ptt)의 곤충병원세균을 배추좀나방(Plutella xylostella)의 혈강에 주입할 경우 높은 병원력을 보였다. 본 연구는 이들 세균 배양액의 섭식 처리에 따른 배추좀나방에 대한 병원성 유기를 조사하였다. 세균 배양액만을 이용하여 배추좀나방 3령충에 섭식 처리한 결과 뚜렷한 병원성을 유발하지 못하였으나, Bacillus thurigiensis(Bt) 와 혼합 처리하였을 때 높은 Bt 병원성 제고 효과를 나타냈다. 물질 추적을 위해서 이 세균 배양액을 유기 용매를 이용하여 헥산, 에틸아세테이트 및 수용액 추출 분획구로 분리하였다. 대부분이 Bt 상승효과는 에틸아세테이트 추출 분획구에서 나타났다. Thin layer chromatography 분석 결과는 에틸아세테이트 분획구가 대사물질을 포함하고 있으며, 이들이 헥산 또는 수용액 추출 분획구에 포함된 물질과는 상이하다는 것을 나타냈다. 이러한 결과는 이들 곤충병원세균이 Bt 병원성을 제고시키는 물질을 생산하고 배양액으로 분비한다고 제시하고 있다.
숙성된 백김치로부터 얻은 Lactobacillus brevis BK11의 증식과 항균물질 생산에 대한 배양용 배지 종류, 공기 조성, 초기 pH, 배양온도 및 시간과 프리바이오틱스의 영향을 조사하였다. L. brevis BK11의 증식과 항균물질 활성은 BHI와 M17 배지 보다는 MRS 배지 상에서 더 높게 나타났으며, 배지의 초기 pH 6.0에서 생산량이 최대에 이르렀다. 혐기적 조건보다는 호기적 및 미호기적 조건에서 배양했을 때와 $25^{\circ}C$ 보다는 $30^{\circ}C$와 $37^{\circ}C$ 온도에서 배양했을 때 균 성장과 항균물질 생산에 유리하였다. BK11 균주는 배양 24시간 만에 정지기에 도달하였고, 36시간 후부터는 생균수가 감소되었고, 배양상등액과 박테리오신 용액의 항균 활성은 $37^{\circ}C$, 24-30시간 배양했을 때 가장 높았다. 세포수와 유산 및 박테리오신 생산은 프락토올리고당 1-2% 첨가한 경우에 가장 높았으나, 이뉼린과 라피노오스는 균 증식에 별다른 도움을 주지 못했다. 결과적으로 L. brevis BK11의 항균물질 생산은 세포수와 관계 있었으며, 이러한 최적 조건 하에서 배양한 경우 Helicobacter pylori ATCC 43504의 성장을 효과적으로 저해할 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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