The present study was designed to investigate isoenzyme (ACPase, ALPase) pattern and its refulatory function between catabolically repressed and derepressed states in yeast, Saccharomyces uvarum. As the results, no other isoenzyme was detectable in acid phosphatase, but there were three isoenzyme types in aldaline phosphatase. Type "B" isoenzyme among alkaline phosphatases in catabolically repressed cell was derepressed, but in normally cultivated cell, type "C" isoenzyme was derepressed while type "B" activity was lowered. Type "B" isoenzyme could be postulated as repressible enzyme, type "A" as constityityve enzyme and type "C" as L-histidinol phosphatase, respectively, Also, it could be shown that type "B" ALPase, repressible enzyme, compensated for phosphate group supplier under catabolically repressed states. Protein profile in cytoplasmic soluble fraction of exponential phase cell was characterized by negative charged protein.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2004.10a
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pp.65-67
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2004
During initial interactions of bacteria with their host plants, most plants recognize the bacterial infections and repel the pathogen by plant defense mechanism. The most active plant defense mechanism is the hypersensitive response (HR) which is the localized induced cell death in the plant at the site of infection by a pathogen. A primary locus induced in gram-negative phytopathogenic bacteria during this initial interaction is the Hrp locus. The Hrp locus is composed of a cluster of genes that encodes the bacteral Type 111 machinery that is involved in the secretion and translocation of effector proteins to the plant cell. DNA sequence analysis of hrp gene in phytopathogenic bacteria has revealed a Hrp pathogenicity is]and (PAI) with a tripartite mosaic structure. For many gram-negative pathogenic bacteria, colonization of the host's tissue depends on the type III protein secretion system (TTSS) which secrets and translocates effector proteins into the host cell. Effectors can be divided into several groups including broad host range effectors, host specific effectors, disease specific effectors, and effectors inhibit host defenses. The role of effectors carrying LRR domain in plant resistance is very elusive since most known plant resistance gene carry LRR domain. Host specific effectors such as several avr gene products are involved in the determination of the host specificity. Almost all the phytopathogenic Xanthomonas spp. carry avrBs1, avrBs2, and avrBs3 homologs. Some strains of X. oryzae pv. oryzae carry more than 10 copies of avrBs3 homologs. However, the functions of all those avr genes in host specificity are not characterized well.;
To evaluate the sensitivity and specificity of transthoracic fine needle aspiration cytology(TFNAC) in the preoperative diagnosis of pulmonary nodules, a retrospective analysis was carried out on a consecutive series of 200 TFNACs. They included 186 primary malignant tumors, 66 squamous cell carcinomas, 65 adenocarcinomas, 36 small cell carcinomas, 7 large ceil carcinomas, 4 carcinomas, 8 others, 9 metastatic tumors, and 5 benign tumors. On cytohistologic correlation of malignant pulmonary tumors, the procedure had a sensitivity of 97.3% and a specificity of 100%. A 86.6% correct correlation between the cytologic and histologic diagnoses was achieved. Five out of the 7 undifferentiated large cell carcinomas, 10 out of the 65 adenocarcinomas, 2 out of the 36 small cell carcinomas, and 2 out of the 66 squamous cell carcinomas were turned out to be mistyped in cytologic diagnosis. We concluded that TFNAC is a highly sensitive and specific preoperative diagnostic procedure in the investigation of patients with discrete pulmonary nodules in whom the specific ceil type of the malignant neoplasm has important implications in treatment modality and prognosis.
Ionizing radiation is a well- known therapy factor for human carcinoma cells. Genotoxic stress mediates cell cycle control, transcription and cellular signaling. In this work, we have used a microarray hybridization approach to characterize the cell type-specific transcriptional response of human carcinoma MCF-7 and HeLa cell line to $\gamma-radiation$, such as 4Gy 4hr. We found that exposure to $\gamma-ray$ alters by at least a $log_2$ factor of 1.0 the expression of known genes. Of the 27 genes affected by irradiation, 11 are down- regulated in MCF-7 cells and 2 genes induced by radiation,15 are repressed in HeLa cells. Many genes were involved in known damage- response pathways for cell cycling, transcription factor and cellular signaling response. However, in MCF-7 cells, we observed gene expression pattern in chromatin, apoptosis, stress, differentiation, cytokine, metabolism, ribosome and calcium. In HeLa cells, it showed clearly the expression changes in adhesion and migration, lysosome, brain, genome instability and translation. These insights reveal new therapy directions for studying the human carcinoma cell response to radiation.
The baculovirus/insect cell expression system is of great value for the large-scale production of normal and mutant mammalian passive glucose-transport proteins heterologously for structural and functional studies. In most mammalian cells that express HepG2, this transporter isoform is predominantly located at the cell surface. However, it had been reported that heterologous expression of other membrane proteins using the baculovirus system induced highly vacuolated cytoplasmic membranes. Therefore, how a cell responds to the synthesis of large amounts of a glycoprotein could be an interesting area for investigation. In order to examine the subcellular location of the human HepG2 transport proteins when expressed in insect cells, immunofluorescence studies were carried out. Insect cells were infected with the recombinant baculovirus AcNPVHIS-GT or with wild-type virus at a MOI of 5, or were not exposed to viral infection. A high level of fluorescence displayed in cells infected with the recombinant virus indicated that transporters are expressed abundantly and present on the surface of infected Sf21 cells. The evidence for the specificity of the immunostaining was strengthened by the negative results shown in the negative controls. Distribution of the transporter protein expressed in insect cells was further revealed by making a series of optical sections through an AcNPVHIS-GT-infected cell using a confocal microscope, which permits optical sectioning of cell sample. These sections displayed intense cytoplasmic immunofluorecence surrounding the region occupied by the enlarged nucleus, indicating that the expressed protein was present not only at the cell surface but also throughout the cytoplasmic membranous structures.
Fine Needle Aspiration Biopsy Cytology (FNABC), which is known as the most accurate and cost-effective method for diagnosis of the thyroid nodule, may still result in indeterminate cases that are cellular paucity and show minor nuclear atypia. However, most cases are associated with suspicion of papillary thyroid carcinoma (PTC). A B-type Raf kinase (BRAF) mutation was found in about half of PTCs which is currently helping us to differentiate malignancies from benign lesions. Cases studied included 46 histological, confirmed PTC cases. FNABC 102 cell paucity and 74 atypia benign cases were previously diagnosed as suspicious of PTC using cytologic examination. These cases were analyzed for BRAF mutation by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) with a new restriction enzyme. In this study, the sensitivity and specificity were calculated and, BRAF mutation was detected by means of a histological method in 23 of 46 cases of PTC and no mutation was found in 22 cases. However, one case was not detected. In using FNABC, BRAF mutation was detected in 6 of 102 cases in cell paucity and in 11 of 74 cases in the atypia. Two cases were not detected in the atypia. The sensitivity and specificity of PCR-RFLP in FNABC were 60% and 97.4% respectively. Assessment of Formalin Fixed Paraffin Embedding (FFPE) block demonstrated similarly a 51.1% positive and 48.9% negative in PTC. Evaluation of BRAF mutation revealed high specificity and low sensitivity in using FNABC method. This study suggests that BRAF mutation analysis should be useful for the clinical diagnosis of PTC in FNABC with cytological findings suspicious for PTC.
Two Epstein-Barr virus (EBV) types, type 1 and type 2, maintain the same allelic specificity at four genomic loci encoding the EBNA2, -3A, -3B, and -3C proteins. We have previously described 16 EBV-transformed B-lymphoblastoid cell lines derived from Korean cancer patients, and the EBNA2 types of the EBV isolates therein. In this study, the allelic types of the EBNA2, -3A, -3B, and -3C genes of these EBV isolates were determined. We report the identification of two distinct types of naturally occurring intertypic recombinants, one with genotype EBNA2 type1/EBN3A, -3B, -3C type 2 and the other with genotype EBNA2, -3A type 1/EBNA3B, -3C type 2. The existence of these intertypic recombinants indicates that various intertypic EBV strains may be circulating in the human population, in addition to typical EBV-1 and EBV-2 strains.
A type of symbiosis was previously described from nature in which the gametophytes of Laminariales were endophytic in filamentous red algae. Here we reconstruct this symbiosis for the first time in laboratory culture using zoospores of the kelp, Undaria pinnatifida, and the red alga, Aglaothamnion oosumiense. Zoospores of U. pinnatifida readily attached to A. oosumiense. In 48 h these spores germinated and the initial germ tube penetrated into the host cell wall leaving only an empty zoospore wall outside the host. Within ten days, four to five-celled endophytic gametophytes were present. Zoospores of Laminaria religiosa which were also inoculated into cultures of A. oosumiense rarely attached to the red alga and never became endophytic. Within ten days the free-living gametophytes of L. religiosa on cover slips became fertile and produced young sporophytes. These observations demonstrate the ability of U. pinnatifida to become endophytic, and show differences in host specificity among kelp species.
Proceedings of the Korean Society of Life Science Conference
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2002.12a
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pp.13-19
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2002
To elucidate the regulatory mechanism for expression of sialyl-glycoconjugates and their biological functions, ninetheen sialyltransferase cDNAs including eleven by our group or co-works have been cloned and characterized so far. The cloned sialyltransferases are classified into four families according to the carbohydrate linkages they synthesize: ${\alpha}2,3-sialyltransferase$ (ST3Gal I-VI), ${\alpha}$ 2,6-sialyltransferase (ST6Gal I), GalNAc ${\alpha}$ 2,6-sialyltransferase (ST6GalNAc I-VI), and ${\alpha}2,8-sialyltransferase$ (ST8Sia I-VI). Each of the sialyltransferase genes is differentially expressed in a tissue-, cell type-, and stage-specific manner. These enzymes differ in their substrate specificity and various biochemical parameters. However, enzymatic analysis conducted in vitro with recombinant enzyme revealed that one linkage can be synthesized by multiple enzymes. We present here an overview of structure and function of sialyltransferases performed by our group and co-works. Genomic structures and transcriptional regulation of two kinds of human sialyltransferase gene are also presented.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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