We identified cdf based on screening of the Arabidopsis cDNA library for functional suppressors of the AtBI-1 (a gene described to suppress the cell death induced by Bax gene expression in yeast). The cdf was located on Chr. V and was composed of 5 exons and 4 introns. It encodes a protein of 258 amino acid residues with a molecular weight of 28.8 kDa. The protein has 3 transmembrane domains in the C-terminal region. The cdf has one homologue, named cdf2, which was found in Arabidopsis. Like cdf, cdf2 also induced growth defect in yeast. The effect of the cell growth defect factor was somewhat lower than Bax. cdf could arrest the growth of yeast. Its localization to the nucleus was essential for the suppression of yeast cell proliferation. Morphological abnormality of intracellular network, which is a hallmark of AtBI-1, was attenuated by expression of cdf.
Background: Germanium compounds are increased to use in nutrient foods and medicines in terms of antibiotics to microbes, anticancer, modulation of immune system and neutralizing heavy metal toxins. Geranti Bio-Ge Yeast, containing stable organic germanium and bound to the yeast protein was developed by Geranti Pharm. LTD. and the modulation effect in the immune system was examined in vivo and in vitro. Methods: The compound, Geranti Bio-Ge Yeast, was fed to female Balb/c mice (each group has 10 mice) for 4 weeks and the yeast powder and steamed red ginseng powder were used as control during the same feeding time points. During 4 weeks there was no symptom to be considered, and after 4 weeks feeding all mice were sacrificed to check the changes of related immune cells and subsidiary responses (i.e. cell counting, FACS, MTT, LDH, PFC assay). Results: In pre-post comparison, B cell population was increased in the group of Geranti Bio-Ge Yeast in a dose dependent manner (100 to 800 mg/kg). However, the population of T cell, dendritic cell and macrophage was not comparably changed in all doses. The ability of cytokine production and proliferation was almost same level as shown in control group. In contrast, PFC assay informed that the compound increase the antibody production ability when fed over 200 mg/kg implying that the increase of PFC number might be due to the increase of B cells. Conclusion: Over the entire study, we concluded that the compound, Geranti Bio-Ge Yeast has better potential in immune response in terms of B cell proliferation than that of positive control, red ginseng, and the compound can be one of the future candidates for a new supplementary source improving immune system activity.
Snail is implicated in tumour growth and metastasis and is up-regulated in various human tumours. Although the role of Snails in epithelial-mesenchymal transition, which is particularly important in cancer metastasis, is well known, how they regulate tumour growth is poorly described. In this study, the possible molecular mechanisms of Snail in tumour growth were explored. Baculoviral inhibitor of apoptosis protein (IAP) repeat-containing protein 3 (BIRC3), a co-activator of cell proliferation during tumourigenesis, was identified as a Snail-binding protein via a yeast two-hybrid system. Since BIRC3 is important for cell survival, the effect of BIRC3 binding partner Snail on cell survival was investigated in ovarian cancer cell lines. Results revealed that Bax expression was activated, while the expression levels of anti-apoptotic proteins were markedly decreased by small interfering RNA (siRNA) specific for Snail (siSnail). siSnail, the binding partner of siBIRC3, activated the tumour suppressor function of p53 by promoting p53 protein stability. Conversely, BIRC3 could interact with Snail, for this reason, the possibility of BIRC3 involvement in EMT was investigated. BIRC3 overexpression resulted in a decreased expression of the epithelial marker and an increased expression of the mesenchymal markers. siSnail or siBIRC3 reduced the mRNA levels of matrix metalloproteinase (MMP)-2 and MMP-9. These results provide evidence that Snail promotes cell proliferation by interacting with BIRC3 and that BIRC3 might be involved in EMT via binding to Snail in ovarian cancer cells. Therefore, our results suggested the novel relevance of BIRC3, the binding partner of Snail, in ovarian cancer development.
Choi, Soon-Yong;Park, Hee Yun;Paek, Aron;Kim, Gil Seob;Jeong, Seong Eun
Molecules and Cells
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제28권6호
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pp.575-581
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2009
Ornithine decarboxylase (ODC) is a rate-limiting enzyme in the biosynthesis of polyamines, which are essential for cell growth, differentiation, and proliferation. This report presents the characterization of an ODC-encoding cDNA (SlitODC) isolated from a moth species, the tobacco cutworm, Spodoptera litura (Lepidoptera); its expression in a polyamine-deficient strain of yeast, S. cerevisiae; and the recovery in polyamine levels and proliferation rate with the introduction of the insect enzyme. SlitODC encodes 448 amino acid residues, 4 amino acids longer than B. mori ODC that has 71% identity, and has a longer C-terminus, consistent with B. mori ODC, than the reported dipteran enzymes. The null mutant yeast strain in the ODC gene, SPE1, showed remarkably depleted polyamine levels; in putrescine, spermidine, and spermine, the levels were > 7, > 1, and > 4%, respectively, of the levels in the wild-type strain. This consequently caused a significant arrest in cell proliferation of > 4% of the wild-type strain in polyamine-free media. The transformed strain, with the substituted SlitODC for the deleted endogenous ODC, grew and proliferated rapidly at even a higher rate than the wild-type strain. Furthermore, its polyamine content was significantly higher than even that in the wild-type strain as well as the spe1-null mutant, particularly with a very continuously enhanced putrescine level, reflecting no inhibition mechanism operating in the putrescine synthesis step by any corresponding insect ODC antizymes to SlitODC in this yeast system.
Kim, K. H.;C. S. Han;K. I. Ko;E. K. Yang;Kim, C. H.;Park, S. N.
대한화장품학회:학술대회논문집
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대한화장품학회 2003년도 IFSCC Conference Proceeding Book I
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pp.700-718
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2003
Fructan, a polysaccharide existing in plants or produced by microorganisms, is a sugar polymer of fructose with $\beta$-2,6 linkages. In this study, we investigated some cosmeceutical properties of Fructan such as moisturizing effect, cell proliferation effect, anti-inflammation effect and cell cytotoxicity. Zymomonas mobilis, a microorganism producing Fructan, was cultured in a medium containing 10% sucrose and 2% yeast extract as main components for 24 hours at 37$^{\circ}C$ and pH 7. Fructan was obtained by precipitation from the cultured medium by adding alcohol (alcohol ratio of 1:3) after removing the enzyme by centrifuging. Fructan exhibited almost same moisturizing effect as hyaluronic acid and cell proliferation effect on human fibroblast and keratinocyte as well. Moreover, on cell proliferation test on bio-artificial skin constructed by 3-dimensional(3-D) culture after inducing primary skin inflammation with 0.5% sodium lauryl sulfate (SLS), the 3-D artificial skin treated with 0.01 mg/ml, 0.05mg/ml of Fructan exhibited higher cell proliferation than the 3-D artificial skin treated with SLS only. On anti-inflammation test on 3-D artificial skin evaluated by measuring secreted quantity of interleukin-1$\alpha$ (IL-1$\alpha$) which is a pre-inflammatory mediator induced by SLS, the quantity of IL-1$\alpha$on the 3-D artificial skin treated with 0.01 mg/ml, 0.05mg/ml of Fructan was less than the one on the 3-D artificial skin treated with SLS only. As a result of these studies, Fructan has anti-inflammation effect against inflammatory reaction by a skin irritant as well as cell proliferation effect in bio-artificial skin. Fructan was also evaluated as a safe material without any toxicity in safety tests using fibroblasts and animals.
The first vaccine against human papillomaviruses (HPV) formulated with HPV16 L1 virus-like particles (VLPs) produced in yeast was approved by the FDA in June 2006. Nevertheless, there have been few studies of the immunogenicity in mice of VLPs. In this study, we evaluated the cell-mediated immune response to VLPs produced in Saccharomyces cerevisiae. After immunization of mice with HPV16 L1 VLPs, we measured splenocytes proliferation and the levels of IFN$_{\gamma}$, IL2, IL4, and IL5. Splenocytes proliferation was significantly increased and a mixed Th1/Th2 response was indicated. IgG subtype immunoresponses were strongly induced and IgG1 titers were higher than those of IgG2a.
한국생물정보시스템생물학회 2001년도 제2회 생물정보 워크샵 (DNA Chip Bioinformatics)
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pp.45-60
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2001
. Mediator of transcriptional regulation is the evolutionary conserved coactivator complex that plays He central role in the integration and recruitment of diverse regulatory signals and transcription machinery to certain promoters. In yeast, each Mediator subunit is required for transcriptional regulation of a distinct group of genes. In order to decipher the mechanistic roles of Mediator proteins in regulating developmental specific gene expression, we isolated, and analyzed a multiprotein complex containing Drosophila Mediate. homologs (dMediato.). dMediato. interacts with several sequence-sperific transcription factors and basal transcription machinery, and is critical for activated transcription in response to diverse transcriptional activators. In order to elucidate the function of Mediator in metazoan development, we isolated mutants of a conserved Mediate. subunit, Drosophila Med6 (dMed6). dMed6 null homozygotes failed to pupate and died in the third larval instar. Larval mitotic cells and most imaginal discs showed severe defects in proliferation, but no apparent morphological defect was observed in other larval tissues. Clonal analysis of dMed6 mutant cells revealed that dMed6 is essential for cell viability and proliferation of most adult cell types. Drosophila cDNA microarray, quantitative RT-PCR, and in situ expression analyses of developmentally regulated genes in dMed6 mutants showed that transcriptional activation of a subset of genes involved in neuroblast proliferation in the larval brain were most affected. Our results suggest that dMed6 is required in most for transcriptional regulation of a subset of genes important for cell proliferation and metabolism.
The purpose of this study was evaluated physiological activity effect of organic germanium in culture broth of germanium-fortified Tricholoma matsutake mycelium and germanium-fortified yeast. Proliferation Tricholoma matsutake mycelium and yeast was inhibited by addition of germanium. Contents of organic germanium in Tricholoma matsutake mycelium and yeast was increased in dose-dependent manner. And low concentration(1,000 ppm) of germanium in mycelium was almost changed organic germanium. In the result of antioxidant activity as SOD-like activity, contents of total polyphenol compound and electron donating ability, activity of germanium-fortified Tricholoma matsutake mycelium was higher than that of germanium-fortified yeast. To evaluate of antitumor effects in vitro, we examined nitric oxide production of Raw 264,7 cell and cytotoxicity of HT1080 cell by MTT assay. Nitric oxide production of germanium-fortified Tricholoma matsutake mycelium was shown low level in low concentration(1,000 ppm) than other groups. The anticancer effect of germanium-fortified Tricholoma matsutake mycelium on HT 1080 cell was indicated a strong inhibitory effect in low concentration(1,000 ppm). These results suggest that organic germanium in culture broth of germanium-fortified Tricholoma matsutake mycelium has valuable physiological activities as antioxidant and anticancer effect, and it was higher than that of germanium-fortified yeast.
We screened the Arabidopsis cDNA library to identify functional suppressors of AtBI-1, a gene that suppresses cell death induced by Bax gene expression in yeast. Cdf 3 encodes a 118-amino-acid protein with a molecular mass of 25 kDa. This protein has two uncharacterized domains at amino acids residues 5-64 and 74-117. In the present study, CDF3 was found to induce growth defects in yeast and arrested yeast growth, although the cell-growth defect was somewhat less than that of Bax. Its localization in the inner mitochondria was essential for suppression of yeast-cell proliferation. The morphological abnormality of the intracellular network, which is a hallmark of AtBI-1, was attenuated by Cdf3 expression.
홍미삼엑기스의 일부 성분이 내삼투압성 효모인 C. parapsilosis의 생육에 미치는 영향을 조사하기 위하여 홍미삼엑기스로부터 유기용매로 이행되는 일부 성분군을 분리 추출하여 그 조성을 조사하고 각 성분군이 C. parapsilosis의 증식에 미치는 영향을 조사하였다. 균증식은 헥산 가용성 물질(Fr.A)에 의하여 현저한 억제작용을 받았고 Fr.A와 조사포닌이 동시에 혼재하면 다소 회복되기는 하였으나 PGS(대조구) 배지에서 보다는 낮았다. 에텔 가용성 물질(Fr.B) 및 에틸아세테이트 가용성 물질(Fr.C)은 현저한 균증식 촉진효과가 있었고 Fr.B 혹은 Fr.c와 조사포닌이 동시에 혼재하면 세포 증식속도가 더욱 촉진되어 Fr.B와 조사포닌 그리고 Fr.C와 조사포닌은 상승적 촉진작용을 하였으며 셀룰로오스 투석막 외액(Fr.E)도 생육을 촉진하였으며 조사포닌과 함께 상승적 촉진작용을 하였다. 조사포닌은 단독으로 존재할 때 균생육에 큰 영향을 미치지 않았으나 다른 성분과 함께 상승적 촉진작용을 하는 특성이 있어 단일 ginenoside 수준에서의 균생육에 미치는 영향이 검토되어야 할 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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