Park, Seok-Jae;Byeon, Hak-Gyu;Han, Dae-Seok;Hong, Eok-Gi
한국생물공학회:학술대회논문집
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2000.11a
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pp.287-290
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2000
To examine effects of agitation and aeration as well as adding of glucose and yeast extract on cell growth and polysaccharide production by Paecilomyces japonica, batch culture was carried out at 5L jar fermenter at $27^{\circ}C$ with the initial pH 7 for 7 days cultivation(innoculum size 2%, working volume 3L). Media compositions(g/L) were 30 glucose, 20 yeast extract, 0.5 $KH_2PO_4$, $0.1\;CuCl_2\;{\cdot}\;2H_2O$. Optimum culture conditions of agitation and aeration in batch culture were 400 rpm and 1.0 vvm, resulting in 23.1 g/L biomass and 2.5 g/L polysaccharide. Additional feeding of glucose and yeast extract with a pulse mode conferred an advantage on cell growth and polysaccharide production with showing the results of 29.2 g/L and 3.3 g/L, respectively.
Insect cells were grown and infected with baculovirus for the production of recombinant protein. Later infection gave the lower expression of recombinant protein. This indicates that the expression rate is lower at higher cell concentration. This phenomena provides a well-posed optimization problem with respect to the infection time. The optimal infection time was experimentally shown to exist for the maximum productivity of recombinant protein. Also, the expression increased with the addition of 5% silkworm hemolymph. This is considered to be due to the increase of intracellular viruses and the longevity of viable cells after the infection. The production of ${\beta}$-galaclosidase increased about ten-fold with the addition of yeastolate and silkworm hemolymph for high cell density and high expression, respectively.
The Gellan-type polysaccharide produced by Pseudomonas elodea(ATCC 31461) is one of the new heteropolysaccharides, having useful properties as gelling, suspending, stabilizing, emulsifying and binding agents in aqueous systems. Medium compositions for growth stage and production stage are improved. The problems of low cell concentration and poor productivity in highly viscous fermentation were attributed to inadequate mixing accompanied by insufficient oxygen transfer. During continuous culture, cell growth and polysaccharide production were greatly affected by the apparent viscosity, and they showed oscillation behavior, i.e. as the product concentration increases, cell concentration decreases. With improved culture conditions, the productivity of continuous culture increased up to 0.6g/$\ell$/hr(6-fold that of batch culture ) at dilution rate, D=$0.14hr^{-1}$.
Purple non-sulfur bacteria, Rhodobacter sphaeroides KD131 grew to reach the maximum cell concentration in 45 hrs of incubation in the synthetic media containing (NH4)2SO4, L-aspartic acid and succinic acid as the carbon and nitrogen sources, respectively, at 30oC under 8 klux irradiance using halogen lamp. The strain produced hydrogen from the middle of the logarithmic growth phase and continued until the cell growth leveled out. The strain grew and produced hydrogen under the irradiance of 3-30 klux, but cell growth was inhibited over 100 klux. In addition, anaerobic/light culture condition was better than the aerobic/dark on the hydrogen production. Among various photo-bioreactors examined, the flat-vertical reactor manufactured using clear acrylic plastic material showed the best hydrogen production rate at the given culture condition.
The present study compares development of rabbit embryos generated using different oocyte activation protocols and reconstructed with embryonic or cumulus cells as nuclear donor. In vivo matured oocytes were collected from New Zealand White rabbits at 16 h after ovulation treatment and were activated at18 h of post-ovulation treatment. The following schemes of oocytes activation were tested: 1) single electric pulse (EP, 3.2 kV/cm, 3${\times}$20 $\mu$s, 0.3 M mannitol)+5 min culture in the presence of 5 mM Ionomycin, 2) single electric pulse (EP, 3.2 kV/cm, (${\times}$20 $\mu$s, 0.3 M mannitol)+1 h culture in the presence of 2 mM 6-DMAP, and 3) three electric pulses 30 min apart. Cleavage rate, percentage of expanded and hatched blastocysts as well as total cell number of blastomeres of parthenogenetic embryos were significantly higher using either EP+6-DMAP or 3${\times}$EP schemes, comparing with EP+Ionomycin. Development rate up to hatched blastocyst stage of cloned rabbit embryos using the EP+6-DMAP for activation of nuclei were 19% for embryonic cell nuclei and 36% for cumulus cell nuclei. The best activation protocol optimalized in this study was the combined treatment "P+6-DMAP" which may be potentially used for nuclear transfer protocol.
The extracts from Agastache rugosa O. Kuntze, their chloroform and hexane fractions, and estragole identified from hexane fraction were tested to investigate the effects on the growth and metabolic activities of several true fungi. The fungi used were: Aspergillus oryzae KFCC 890, Aspergillus niger KCCM 11240, Saccharomyces cerevisiae IAM 4597, Saccharomyces ellipsoideus PNU 2215. The growth of S. Cerevisiae by treatment of water extract(1%), hexane fraction (0.05%), and estragole (0.05%) were inhibited 93%, 50%, and 33% respectively, and S. ellipsoideus was also inhibited markedly with delaying the alg phase maximum 12 hrs. The growth of A. oryzae was inhibited by treatment of extracts and fractions. The echanol production by S. cerevisiae was increased more than two times in the highest value around 42 hrs incubation by water extract, but chloroform fraction inhibited its production. The glucoamylase actibities by A. niger were strongly inhibited by hexane and chloroform fractions (0.05%). The invertase activity by S. cerevisiae using estragole (0.05%) reached to 57.5% of control group. S. cerevisiae treated with the estragole was damaged the cell wall and cell membrane, leaked the protoplasm, and observed broken pieces of cell.
Capsaicin synthesis by suspension cultured cells of Jalapeno pepper (Capcicum annuum L.) was assessed in vitro under various conditions including temperature (23 and $30^{\circ}C$), light intensity (with light and without light), and shaking speed (110 and 200 rpm). Capsaicin production increased, while the cell biomass growth decreased possibly due to the production of a secondary metabolite. Capsaicin synthesis was primarily affected by light condition. Cells cultivated at 110 rpm and $23^{\circ}C$ under light condition yielded the highest fresh weight, while those cultivated under the same condition, but without light resulted in the lowest cell mass. Capsaicin content in cells of 18-day-old pepper grown at 110 rpm and $23^{\circ}C$ under light was 0.125% of the cell mass. However, without light treatment, the capsaicin content in cells at the same shaking speed and temperature increased up to 169%, indicating no light is favored in the capsaicin synthesis by Jalapeno pepper. Increasing the shaking speed from 110 to 200 rpm without light enhanced the capsaicin synthesis. Results of this study demonstrate that light condition is the limiting factor in the synthesis of capsaicin in tissue-cultured Jalapeno pepper cells.
Kim, Sung-Wan;Yun, Eun-Young;Kim, Seong-Ryul;Park, Seung-Won;Kang, Seok-Woo;Lee, Kwang-Gill;Kwon, O-Yu;Goo, Tae-Won
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.21
no.2
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pp.151-155
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2010
Protein disulfide isomerase (PDI) catalyzes the oxidation of disulfides and the isomerizatiob of incorrect disulfides in new polypeptides during folding in the oxidizing environment of the endoplasmic reticulum (ER). To increase recombinant protein hSCF (human stem cell factor) production, we have developed expression system using the Bombyx mori PDI (bPDI) as a fusion partner. bPDI gene fusion was found to improve the production of recombinant hSCFs. Thus, we conclude that bPDI gene fusion will be very useful for the large-scale production of biologically active recombinant proteins.
We investigated the immune enhancement effects of JaSaengHwan (JSH). The forced swimming test (FST) has been used as a screening model for new immune enhancement agents. We found that JSH (0.1 mg/ml) significantly reduced the immobility time in the FST compared to the control. Also, we investigated the effect of JSH on the proliferation of T cell and production of cytokines in human T-cell line, MOLT-4 cells and mouse peritoneal macrophages. JSH (1 mg/ml) significantly increased the cell proliferation by $46.78{\pm}6.41%$ (p<0.05) and also significantly increased the interleukin (IL)-2, IL-4 and interferon $(IFN)-{\gamma}$ production compared with media control (about 2-fold for IL-2, 3-fold for IL-4 and 1.5-fold for $IFN-{\gamma}$, p<0.05) at 24 h. In addition, JSH increased the production of IL-12 on the mouse peritoneal macrophages (by 3.6-fold for IL-12, p<0.05). In conclusion, these data indicate that JSH may have an immune-enhancement effect.
Nitric oxide(NO) is a labile, uncharged, reactive radical that functions as a sensitive mediator of intercellular communication in diverse tissues. It has been reported that NO is produced by osteoblast and these results may suggest that NO is integrally involved in the regulation of osteoclast formation and osteoclast resorption activity by osteoblastic cells. We examined the effect of cytokines on NO release by mouse bone marrow cell. We also examined the effects of cytokines and sodium nitroprusside(SNP) on the formation of osteoclast-like cell from mouse bone marrow cells in culture. Cytokines stimulated NO production of mouse bone marrow cells, and N-nitro-L-arginine methyl ester, a specific inhibitor of NO synthase, suppressed the cytokine-induced NO production. SNP showed dual action in the generation of osteoclasts. The addition of $30{\mu}M$ SNP inhibited the formation of tartrate resistant acid phosphatase(TRAP)(+) multinucleated cell, whereas lower concentration($3{\mu}M$) of SNP enhanced it. Although the precise action of NO remains to be elucidated in detail, the action of NO in osteoclast generation in our studies seems to be associated, at least in part, with bone metabolism and bone pathophysiology.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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