We have studied the effects of serum concentration and initial cell density on hybridoma cell growth and monoclonal antibody (MAb) production at various media supplemented with different types of serum. The types of serum were fetal bovine sera, newborn bovine calf sera, calf sera including supplemented calf sera, horse serum, and goat serum. The concentrations of each serum were 0.5, 1.25, 2.5, and 5% (v/v) and the inoculum densities were $5{\times}10^4, 1{\times}10^5, 2{\times}10^5,$ cells/ml. The hybridoma cell growth and anti-Hepatitis B surface antigen (anti-HBsAg) MAb production were found to be enhanced by increasing the serum concentration and by increasing inoculum density regardless of serum type. We found that test sera purchased from different companies show different effects on cell growth and MAb production, although they are the same type of serum.
Park, Chan Hum;Kim, Ji Hyun;Choi, Seung Hak;Shin, Yu Su;Lee, Sang Won;Cho, Eun Ju
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.25
no.5
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pp.315-321
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2017
Background: Glycyrrhiza uralensis Radix (GR) is a crude drugs used in Asian countries that has been reported to prevent the progression of neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease. The present study examined whether GR and its active compounds, glycyrrhizic acid (GA) and isoliquiritigenin (IL), exerted protective effects on $H_2O_2$-induced oxidative damage in C6 glial cells. Methods and Results: We exposed C6 glial cells to hydrogen peroxide ($H_2O_2$) for 24 h and investigated the cellular response to GR and its active compounds by evaluating cell viability, reactivie oxygen species (ROS) production, and apoptosis-related protein expression. GR successfully mitigated the reduced cell viability and ROS production induced by $H_2O_2$ in C6 glial cells, IL and GA significantly increased the cell viability and decreased ROS production. In addition, IL and GA down-regulated apoptotic Baxdependent caspase-3 activation, but each compound exerted different mechanisms, i.e., IL dose-dependently decreased ROS production and, GA up-regulated anti-apoptotic Bcl-2 expression. Conclusions: These results demonstrated that GR and its active components, IL and GA, exhibit potential for use as natural neurodegenerative agents for the modulation of apoptosis in C6 glial cells.
Strain improvement and morphology investigation in bioreactor cultures were undertaken in suspended cultures of Phellinus linteus mycelia for mass production of protein-bound polysaccharides(soluble ${\beta}$-D-glucan), a powerful immuno-stimulating agent. Phellineus sp. screened for this research was identified as Phellinus linteues through ITS rDNA sequencing method and blast search, demonstrating 99.7% similarity to other Phellinus linteus strains. Intensive strain improvement program was carried out by obtaining large amounts of protoplasts for the isolation of single cell colonies. Rapid and large screening of high-yielding producers was possible because large numbers of protoplasts ($1{\times}10^5{\sim}10^6\;protoplasts/ml$) formed using the banding filtration method with the cell wall-disrupting enzymes could be regenerated in relatively high regeneration frequency($10^{-2}{\sim}10^{-3}$) in the newly developed regeneration medium. It was demonstrated that the strains showing high performances in the protoplast regeneration and solid growth medium were able to produce 5.8~6.4%(w/w) of ${\beta}$-D-glucan and 13~15 g/L of biomass in stable manners in suspended shake-flask cultures of P. linteus mycelia. In addition, cell mass increase was observed to be the most important in order to enhance ${\beta}$-D-glucan productivity during the course of strain improvement program, since the amount of ${\beta}$-D-glucan extracted from the cell wall of P. linteus mycelia was almost constant on the unit biomass basis. Therefore we fully investigated the fungal cell morphology, generally known as one of the key factors affecting cell growth extent in the bioreactor cultures of mycelial fungal cells. It was found that, in order to obtain as high cell mass as possible in the final production bioreactor cultures, the producing cells should be proliferated in condensed filamentous forms in the growth cultures, and optimum amounts of these filamentous cells should be transferred as active inoculums to the production bioreactor. In this case, ideal morphologies consisting of compacted pellets less than 0.5mm in diameter were successfully induced in the production cultures, resulting in shorter period of lag phase, 1.5 fold higher specific cell growth rate and 3.3 fold increase in the final biomass production as compared to the parallel bioreactor cultures of different morphological forms. It was concluded that not only the high-yielding but also the good morphological characteristics led to the significantly higher biomass production and ${\beta}$-D-glucan productivity in the final production cultures.
To investigate the role of induction on CGTase production for alkalophilic Bacillus firm us var. alkalophilus H609, the constitutive mutants that form a halo around its colonies at non-inducible AG agar media containing amylose and glucose were selected. The selected constitutive mutants could produce CGTase in the range of 18.9 to 28.8 units/ml $\cdot A_{600}$ in the alkaline basal medium, and finally a constitutive mutant Bacillus firmus var. alkalophilus CM46 was selected. The constitutive nature of CM46 was also confirmed in protein level using SDS-PAGE. The effects of induction and catabolite repression for both parent strain Bacillus firmus var. alkalophilus H609 and constitutive mutant CM46 were also compared by adding soluble starch and glucose during cultivation. The selected mutant CM46 was a non-inducible but a catabolite regulated type mutant. Even though inductive regulation was released, the specific CGTase activity defined as CGTase activity per cell concentration was not increased compared with that of parent strain. The cell growth and CGTase production patterns of constitutive mutant Bacillus firmus var. alkalophilus CM46 were compared with the parent strain to identify CGTase production characteristics.
Kim Jong-Chae;Kang Seong-Woo;Lim Jung-Soo;Song Yoon-Seok;Kim Seung-Wook
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.7
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pp.1120-1124
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2006
Supplementation with rice oil and its major components (oleic acid and linoleic acid) was found to have a significant influence on cephalosporin C (CPC) production and cell growth by A. chrysogenum M35 in shake flask cultures. Five percent (v/v) rice oil had the most robust effect and 5% (v/v) oleic acid was the second most efficient on cell growth, whereas 3% (v/v) linoleic acid was found to be optimal for CPC production. Rice oil, oleic acid, and linoleic acid also significantly improved the rates of glucose consumption. When glucose was almost consumed, CPC production was initiated and, on the addition of rice oil, lipase activity increased steadily to 1.56 U/ml for 4 days. These results suggest that rice oil and fatty acids are used as carbon source to produce CPC by A. chrysogenum M35. Moreover, a mixture, composed of 40% (v/v) oleic acid and 60% (v/v) linoleic acid, had the strongest stimulatory effect on CPC production, due to a synergistic effect of the two fatty acids. Consequently, the maximum CPC titer (7.44 g/l) was improved about 4.5-fold.
The effects of Haematococcus pluvialis extracellular products on microbial growth and bacteriocin production were investigated to improve bacteriocin synthesis during the growth cycle of Lactobacilli. Lactobacillus pentosus KJ-108, L. plantarum KJ-10311, and L. sakei KJ-2008 were cultured in MRS and enriched medium (ERM) with or without supplement of the extracellular products obtained from a late exponential phase culture of Haematococcus pluvialis in modified Bold's basal medium (MBBM). In both MRS and ERM, the extracellular products strongly enhanced the growth as well as the bacteriocin production of all the lactic acid bacteria tested. The enhancing effect was observed in ERM with pH adjusted at 5 and 6. In addition, some difference in growth effects with the extracellular products of H. pluvialis was observed between pH 5 and 6 in ERM, but no effect was observed in the minimal medium. The final biomass and the final concentration of bacteriocin activity were associated with the cell growth that was promoted by the extracellular products of H. pluvialis, and the enhanced cell growth of the three lactic acid bacterial strains induced the increase of the specific bacteriocin production. Therefore, bacteriocin production and activity were influenced by the addition of the extracellular products of H. pluvialis in the culture medium.
The effect of 4 kinds of alcohols was investigated on the production of bacterial cellulose (BC) by Gluconacetobacter hansenii PJK. The addition of alcohols and acetic acid to medium caused the pellets of bacterial cellulose to aggregate into a lump, which could be easily separated from the culture medium. The growth rate of cells and the production yield of BC increased in the medium containing ethanol. Other alcohols in the medium decreased cell growth and the cellulose production rate, because of their toxic effects. The addition of ethanol depressed the conversion of a $\textrm{Cel}^{+}$ cell to a $\textrm{Cel}^{-}$ mutant in shaking culture. Cells subcultured three in a medium containing ethanol produced BC without any loss of BC production yield.
Hydrogen production by the reaction of aluminum alloys and NaOH solution was studied for an automotive proton exchange membrane fuel cell(PEMFC) application. In our experiment conditions($30{\sim}75^{\circ}C$, NaOH $0.5{\sim}5M$), passivation of aluminum was not occurred. Higher rate of hydrogen production was observed at the reaction with Al alloys that contain impurities. With an increase in reaction temperature, hydrogen production rate by an increase in NaOH concentration increased much. When hydrogen was fed into the anode without filtering, PEMFC cell performance decreased 35% by ionic contamination such as $Na^+$ on the membrane and electrode. Thus, filtering of produced hydrogen is necessary for PEMFC operation.
Seo, Hyeong-Pil;Son, Chang-U;Lee, Yu-Jeong;Kim, Seong-Gu;Kaplan, David L.;Lee, Jin-U
한국생물공학회:학술대회논문집
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2002.04a
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pp.173-176
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2002
Effect of carbon source and culture conditions involved in the concentration of dissolved oxygen on cell growth and the production of pullulan by A. pullulans HP2001 were investigated. Among those carbon sources, glucose was found to be the best carbon source for the production of pullulan by A. pullulans HP2001. Maximal production of pullulan by A. pullulans HP2001 was 26.6 g/ f when concentrations of glucose and yeast extract were 8% (w/v) and 0.25% (w/v), respectively. It was found that aeration rate, agitation speed and inner pressure of a bioreactor, which were some of physiological factors involved in the dissolved oxygen in the medium may affect cell growth and the production of pullulan by A. pullulans HP2001.
Effect of glucose addition to xylose medium on xylitol production was investigated by using Candida parapsilosis ATCC 21019 mutant. With increasing the ratio of glucose to xylose in total amount of 50 g/l as glucose and/or xylose, xylitol production was decreased but ethanol and glycerol production were increased. Ethanol and glycerol concentration were maxmum in 10 g/l of xylose and 40 g/l of glucose medium as 21.5 g/l and 3.6 g/l, respecti- vely. No xylitol was formed in glucose medium without xylose because xylitol could be not produced from glucose. With increasing the ratio of glucose to xylose, the activity of xylose reductase which converted xylose to xylitol were decreased. The activities of xylitol dehydrogeiiase which converted xylitol to xylulose and then cell materials were found to be constant regardless of the ratio of glucose to xylose. This results indicated that glucose addition to xylose medium on cell growth was not affected. In order to prevent the inhibitory effect of glucose on xylitol production, glucose in a fermentor was fed with low concentration and then ethanol and glycerol was critically decreased and the xylitol yield from xylose of the culture with glucose feeding was recovered the almost same as that with only 50 g/l of xylose. However, the xylitol yield from total sugars (xylose and glucose) was decreased and glucose was not contributed to xylitol production. Therefore, the fermentation at high concentration of xylose without glucose was carried out. A final xylitol concentration of 242 g/l which corresponding 80.7% of xylitol yield was obtained from 300 g/l of xylose for 273 hours.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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