The aim of this study was to investigate the mechanisms underlying apoptosis induced by a broussochalcone B (BCB) from Broussonetia papyrifera in HepG2 cells. The results showed that BCB treatment for 24 hr significantly inhibited cell viability in a dose-dependent manner, and induced apoptosis in HepG2 cells. More so, BCB treatment triggered the cleavage of caspase-8, -9, -3, poly (ADP-ribose) polymerase (PARP), increase of Bax level, and decrease of Bcl-2 expression. A general caspase inhibitor (z-VAD-fmk) blocked BCB-induced cell death. Furthermore, BCB treatment caused reactive oxygen species (ROS) production in a dose-dependent manner. In addition, an antioxidant N-acetylcysteine (NAC) blocked BCB-induced ROS production and cell death. Therefore, these results indicate that BCB-induced apoptosis is mediated by a caspase dependent pathway and ROS production in HepG2 cells.
Hur Byung-Ki;Cho Dae-Won;Kim Ho-Jung;Park Chun-Ik;Suh Hyung-Joon
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.7
no.1
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pp.10-15
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2002
Environmental and medium factors were investigated as basic data for optimizing DHA production when using Thraustochytrium aureum. To study the effect of environmental conditions, the rotation speed and culture temperature were changed. Plus the trend of the growth characteristics, lipid content in the biomass, and DHA content in lipids were evaluated according to various initial glucose concentrations. The biomass, lipid, and DHA analyses showed that the physiological characteristics of T. aureum were closely related with the environmental and medium conditions, as in the case of other marine microorganisms. For example, a low rotation speed of 50 rpm lowered the cell growth rate as well as the DHA content in the lipids. A low temperature had a negative effect on the cell growth, yet a positive effect on the lipid content in the biomass. Different initial glucose concentrations had no effect on the lipid content in the biomass or DHA content in the lipids, yet did affect the cell growth. Accordingly, these results show that environmental and medium factors must be synthetically considered in order to optimize DHA production when using T. aureum.
Purpose: Interleukin-8 (IL-8) is an important mediator of immune and inflammatory reactions and is produced by a variety of different cell types. This study was undertaken to investigate the effects of lipopolysaccharides (LPSs) from Prevotella intermedia and Prevotella nigrescens, the major causes of inflammatory periodontal disease, on the production of IL-8 and the expression of IL-8 mRNA in differentiated THP-1 cells, a human monocytic cell line. Methods: LPSs from P. intermedia ATCC 25611 and P. nigrescens ATCC 33563 were prepared by the standard hot phenol-water method. THP-1 cells were incubated in the medium supplemented with phorbol myristate acetate to induce differentiation into macrophage-like cells. Results: We found that LPS preparations from P. intermedia and P. nigrescens can induce IL-8 mRNA expression and stimulate the release of IL-8 in differentiated THP-1 cells without additional stimuli. Conclusions: There are no previous reports of the ability of P. intermedia and P. nigrescens LPS to stimulate the release of IL-8, and the present study clearly shows, for the first time, that LPSs from P. intermedia and P. nigrescens fully induced IL-8 mRNA expression and IL-8 production in differentiated human monocytic cell line THP-1. The ability of P. intermedia and P. nigrescens LPS to promote the production of IL-8 may be important in the pathogenesis of inflammatory periodontal disease.
Na Jeong-Geol;Kim Hyun-Han;Chang Yong-Keun;Lee Sang-Jong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.9
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pp.1331-1337
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2006
A mathematical model has been proposed for the batch culture of Agaricus blazei with mixed carbon sources of glucose and dextrin. In the proposed model, the metabolism of A. blazei was divided into three parts: cell growth, exopolysaccharides (EPS) production, and another EPS production pathway activated by dextrin hydrolysis. Each pathway was described mathematically and incorporated into the mechanistic model structure. Batch cultures were carried out with six different carbon source compositions. Although parameters were estimated by using the experimental data from the two extreme cases such as glucose only and dextrin only, the model represented well the profiles of glucose, cell mass, and EPS concentrations for all the six different carbon source mixtures, showing a good interpolation capability. Of note, the lag in EPS production could be quite precisely predicted by assuming that the glucose-to-cell mass ratio was the governing factor for EPS production.
$1.85\times 10^{-10}$ (mmole/cell/h) of specific glucose consumption rate was obtained under fed-batch cultivation of recombinant mamalian ce11s with maintaining $4.7\times 10^{-7}(\mu g/ceil/h)$ of average specific erythropoeitin production rate. Higher maximum cell density was also achieved than for both cases of batch and perfusion cultivations. It proves that glutamolysis dominates metaboiic pathways at latter period of cultivation where quasi steady state was maintained. Substrate limitation of glucose concentration was estimated as 13 (mmole/l) under fed-batch conditions. while specific product production rate was decreased according to cultivation time, erythropoeitin production was increased as glucose concentration in the media increased up to 13.2 (mole/l).
To date, various strategies have been studied to increase specific productivity in Chinese hamster ovary (CHO) cell cultures. Also, albumin-fusion platform is being applied to other important bioactive peptides with short half-lives. Here, we investigated the effects of silkworm gland hydrolysate (SGH) on the production of albumin-erythropoietin (Alb-EPO) in transgenic CHO cells. The viable cell density of CHO cells was increased by 13% in the medium containing 1 mg/mL SGH higher than in the control medium without SGH. In addition, the production of Alb-EPO was also 1.26- fold enhanced by reducing the early apoptosis of CHO cells. In conclusion, SGH could be used as a useful supplement for the enhancement of recombinant protein production.
Journal of Institute of Control, Robotics and Systems
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v.22
no.12
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pp.1027-1033
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2016
There is an increasing need for manufacturing systems to produce batches in small quantities. Such manufacturing systems are significantly difficult to develop with conventional automation equipment. Recently, several research groups have applied industrial dual-arm robots to cell production lines. A synchronization method for robots is necessary for the cell production process when robots work in a shared workspace. Conventional automation factories do not need this method because the main control system operates all of the machines or robots. However, our intended application for the developed robot is in small manufacturing environments that cannot install an expensive main control system. We propose an inexpensive and high-performance method with a simple digital in/out channel using a real-time communication protocol. The developed method was validated in a pilot production line for cellular phone packing.
Characteristics of electricity production from major fermentation products (acetate, propionate and butyrate) were evaluated in a microbial fuel cell (MFC). For each substrate, batch and continuous experiments were performed. The batch test result indicated that coulombic efficiency depended on the resistance connected in MFC circuit. With acetate, coulombic efficiency were 87% at $20{\Omega}$, but decreaced to 45% at$220{\Omega}$. In continuous tests, maximum power densities obtained was 220 Q with acetate. The maximum power densities of butyrate, acetate and propionate were 6.8, 6.1, and $5.2mW/m^2$, respectively. Propionate and butyrate were converted into acetate producing high currents. $H_2$ produced during butyrate and propionate probably used to produce electricity. In conclusion, butyrate conversion into acetate was faster than that of propionate with higher electricity production. If the production of propionate is inhibited during fermentation, anaerobically fermented liguor may be effectively applied for MFC.
Our previous report showed that the extract from cuttlebone (CB) had wound healing effect in burned lesion of rat and the extract was identified as chitin by HPLS analysis. We herein investigated the morphology in CB extract using scanning electron microscope (SEM). Chitin was used as a control. There is no difference in morphology between CB extract and chitin. We also assessed the role of CB extract on the production of inflammatory mediators using murine macrophages and the migration of inflammatory cells. The extract induced the production of nitric oxide (NO) in macrophages. While the extract of CB itself stimulated macrophages to increase the expression of pro-inflammatory cytokines such as tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, interleukin (IL)-$1{\beta}$, and IL-6, CB extract suppressed the production of those cytokines by LPS. CB extract also induced the production of mouse IL-8 which is related to the cell migration, and treatment with CB enhanced fibroblast migration and invasion. Therefore, our results suggest that CB activates inflammatory cells to enhance the cell migration.
Dapsone, an antibiotic, has been used to cure leprosy. It has been reported that dapsone has anti-inflammatory activity in hosts; however, the anti-inflammatory mechanism of dapsone has not been fully elucidated. The present study investigated the anti-inflammatory effects of dapsone on bone marrow cells (BMs), especially upon exposure to lipopolysaccharide (LPS). We treated BMs with LPS and dapsone, and the treated cells underwent cellular activity assay, flow cytometry analysis, cytokine production assessment, and reactive oxygen species assay. LPS distinctly activated BMs with several characteristics including high cellular activity, granulocyte changes, and tumor necrosis factor alpha ($TNF-{\alpha}$) production increases. Interestingly, dapsone modulated the inflammatory cells, including granulocytes in LPS-treated BMs, by inducing cell death. While the percentage of Gr-1 positive cells was 57% in control cells, LPS increased that to 75%, and LPS plus dapsone decreased it to 64%. Furthermore, dapsone decreased the mitochondrial membrane potential of LPS-treated BMs. At a low concentration ($25{\mu}g/mL$), dapsone significantly decreased the production of $TNF-{\alpha}$ in LPS-treated BMs by 54%. This study confirmed that dapsone has anti-inflammatory effects on LPS-mediated inflammation via modulation of the number and function of inflammatory cells, providing new and useful information for clinicians and researchers.
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