Objectives : The water extract of Gwibitang (GBT) has been traditionally used for treatment of psychologic disease and brain damage in Oriental Medicine, This study was designed to investigate the effect of GBT on the glutamate-induced toxicity of rat C6 glial cells. Methods : The cultured cells were pretreated with GBT and exposed to glutamate, The cell damage was assessed by using MTT assay and Hoechst, IC-l staining, Results : GBT had protective effects in glutamate-induced cytotoxicity, which was revealed as apoptosis characterized by chromatic condensation and the loss of mitochondrial membrane potential in C6 glial cells. However, GBT and glutamate had no effect in the activation of caspase family cysteine proteases including caspase-3, -8 and -9 proteasesin C6 glial ce]]s, GBT significantly recovered the depletion of GSH and inhibited the generation of $H_2O_2$ by glutamate in C6 glial cells. In addition, both GBT and antioxidants such as GSH and NAC protected the glutamate-induced cytotoxicity in C6 glial cells, indicating that GBT possibly has antioxidative effect. Moreover, GBT also inhibited the glutamate-induced degradation of $IkB{\alpha}$ in C6 glial cells, This result suggest that GBT has some inhibitory effects on the transcriptional activation of $NF-_{k}B$. Conclusions : GBT has protective effects in glutamate-induced cytotoxicity via an antioxidative mechanism.
We have attempted to determine the Germanium ion (G $e^{4+}$) effect on the human body by observing the formation of artificial lipid membrane and photolysis in the mineral water containing G $e^{4+}$ ion. The artificial lipid membrane is prepared by using the phospholipid in the Germanium water and the formation efficiency of the liposomes is compared with those obtained in the plain mineral water without G $e^{4+}$ ion. This work shows that the liposomes are formed in the Germanium water better than in the non-Germanium water. The liposomes can be photolyzed by superoxide anion ( $O_{2-}$$^{.}$) produced in the presence of some peptide such as NAT (N-acethyl-L-tryptophan). However, this is inhibited by superoxide dismutase (SOD), and it was found that the activity of SOD on the inhibition of the liposomes oxidative damage is higher in the Germanium water than in the non-Germanium water. It is concluded that the G $e^{4+}$ ion in mineral water helps the formation of new cell as well as elevation of SOD activity for the lipid oxidation.n.
폐홉충(Paragonimus westermani) 초기 감염시의 숙주 면역 기전을 알아보기 위하여 폐흡충 피낭유충을 백서에 감염시켜 주별(주별)로 항혈청을 분리하고 등일 백서에서 복강 대식세포(homologous rat peritoneal macrophage)를 얻은 다음, 이들과 폐흡충 탈낭유충 및 숙주 조직 이행중인 유약충으로 effector system을 조작하여 폐흡충 유충에 대한 항체 의존성 대식세포 공격기전을 관찰하였다. 백서 복강 대식세포는 항혈청 출현 시에만 폐흡충 탈낭유충에 대한 세포부착 반응(cell adherence reaction)을 보였고 이 반응에는 보체가 관여하지 않았다. 폐흡충 감염 1주에서 8주까지의 백서 항혈청 중 2주째에 분리한 항쳔청 실험군에서 100%의 세포부착 반응을 나타내었고 사멸된 충체를 관찰할 수 있었으며, 세포부착 반응은 탈낭 유충기에서만 나타나는 반면 조직이행 유약충에서는 전혀 그 반응을 인정할 수 얼어 폐흡충 감염에 따른 항체의존성 숙주 세포 매개독성(antibodydependent cell·mediated cytotoxicity)은 발육단계 별 특이성을 보였다. 한편, 대식세포의 공격에 의하여 사멸된 폐흡충 탈낭유충의 형태학적 특징은 대식세포와 유충 사이에 형성되는 fuzzy material, tegumental syncytium 내의 미세구조의 변성 및 syncytium과 근육층을 연결하는 tubular tunnel의 형성 등이었다.
There are two distinct UV-responsive signaling pathways in UV-irradiated mammalian cells, i.e., the DNA damage-dependent and -independent pathways. The former occurs in nucleus and results in growth arrest and apoptosis via post-translational modification of p53. The latter is initiated by oxidative stress and/or by damages in cell membrane or cytoplasm, which activate signaling cascade through intracellular molecules including mitogen activated protein kinases (MAPK). In normal human fibroblastic cells, all of MAPK family members, extracellular signal-related kinases (ERK), c-Jun N-terminal kinases (JNK) and p38, were rapidly phosphorylated following UV-irradiation. ERK phosphorylation was suppressed by an inhibitor of receptor tyrosine kinases (RTK). As ERK usually responds to mitogenic stimuli from RTK ligands, UV-induced ERK phosphorylation may be linked to the proliferation of survived cells. In contrast, phosphorylation of JNK and p38, as well as apoptosis, were modulated by the level of UV-generated oxidative stress Therefore, JNK and p38 may take part in oxidative stress-mediated apoptosis. Phosphorylation of p53 at Ser and Thr residues are essential for stabilization and activation of p53. Among several sites reported, we confirmed phosphorylation at Ser-15 and Ser-392 after UV-irradiation. Both of these were inhibited by a phosphoinositide 3-kinase inhibitor, presumably due to the shutdown of signals from DNA damage to p53. Phosphorylation at Ser-392 was also sensitive to an antioxidant and a p38 inhibitor, suggesting that Ser-392 of p53 is one of the possible points where DNA damage-dependent and -independent apoptic signals merge. Thus, MAPK pathway links UV-induced intracellular signals to the nuclear responses and modifies DNA damage-dependent cellular outcome, resulting in the determination of cell death.
Kim, Ki Cheon;Piao, Mei Jing;Zheng, Jian;Yao, Cheng Wen;Cha, Ji Won;Kumara, Madduma Hewage Susara Ruwan;Han, Xia;Kang, Hee Kyoung;Lee, Nam Ho;Hyun, Jin Won
Biomolecules & Therapeutics
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제22권4호
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pp.301-307
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2014
Fucodiphlorethol G (6'-[2,4-dihydroxy-6-(2,4,6-trihydroxyphenoxy)phenoxy]biphenyl-2,2',4,4',6-pentol) is a compound purified from Ecklonia cava, a brown alga that is widely distributed offshore of Jeju Island. This study investigated the protective effects of fucodiphlorethol G against oxidative damage-mediated apoptosis induced by ultraviolet B (UVB) irradiation. Fucodiphlorethol G attenuated the generation of 2, 2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radicals and intracellular reactive oxygen species in response to UVB irradiation. Fucodiphlorethol G suppressed the inhibition of human keratinocyte growth by UVB irradiation. Additionally, the wavelength of light absorbed by fucodiphlorethol G was close to the UVB spectrum. Fucodiphlorethol G reduced UVB radiation-induced 8-isoprostane generation and DNA fragmentation in human keratinocytes. Moreover, fucodiphlorethol G reduced UVB radiation-induced loss of mitochondrial membrane potential, generation of apoptotic cells, and active caspase-9 expression. Taken together, fucodiphlorethol G protected human keratinocytes against UVB radiation-induced cell damage and apoptosis by absorbing UVB radiation and scavenging reactive oxygen species.
Septin4 belong to a family of polymerizing GTP-binding proteins that are required for many cellular functions, such as membrane compartmentalization, vesicular trafficking, mitosis, and cytoskeletal remodeling. Since, Septin4 is expressed specifically in the testis, we aimed to determine the association between Septin4 gene expression with sperm quality, DNA damage, and stress oxidative level in infertile patients. The present study included 60 semen samples that grouped into three groups: normozoospermia (n=20), asthenozoospermia (n=20), astheno-teratozoospermia (n=20). Initially, semen parameters were analyzed by using the World Health Organization protocol. The mRNA expression of Septin4 in sperm was examined using reverse transcription-polymerase chain reaction. Oxidative stress markers, i.e., total antioxidant capacity, superoxide dismutase, catalase, glutathione peroxidase, and malondialdehyde, were determined by ELISA kit. The current study showed a statistically significant highly positive correlation in Septin4 gene expression with sperm motility, normal morphology, viability, capacity, and sperm mitochondrial membrane potential (MMP). However, it showed significant negative correlation with sperm DNA fragmentation. Septin4 had a significant correlation with stress oxidative factor and antioxidant enzyme levels. In conclusion, Septin4 gene expression provides clinical useful information for the diagnosis of male infertility. It might be a marker for discrimination between fertile and infertile patients. The current study showed a statistically significant highly positive correlation in Septin4 gene expression with sperm motility, normal morphology, viability, capacity, and sperm MMP. However, it shows significant negative correlation with sperm DNA fragmentation. Septin4 had a significant correlation with stress oxidative factor and antioxidant enzyme levels.
It is important to determine the action spectrum of UV-B radiation contained in the sunlight to estimate the risk of skin cancer. We have investigated action spectra for induction of apoptosis and reproductive cell death in L5178Y cells using the Okazaki Large Spectrograph at NIBB. L5178Y cells were exposed to light at different wavelengths in UV-B or UV-A region. Frequencies of apoptosis induction and reproductive cell death were determined by counting cells with chromatin condensation, and by the colony formation assay, respectively. The measured sensitivity spectra for the two end-points were in very good agreement. Sensitivity decreased steeply with increase of wavelength in UV-B region and remains nearly constant in UV-A region. The action spectra were also slightly steeper than that for the minimum erythematic dose (MED), but very similar to the light absorption spectrum of DNA in UV-B region. On the other hand, the spectra for both endpoints were similar to MED spectrum but not DNA spectrum in the UV-A region. Also different time-course and morphological difference of apoptosis were found between UV-B (long time, fragmentation) and UV-A (short time, shrinkage) region. These results suggest that DNA damage induced by UV-B light triggers apoptosis and reproductive cell death, but other damaged targets (membrane, protein and so on) trigger these effects in UV-A region.
This study was carried out to investigate the localization of lipids and lipase activity with lipid staining and cytochemical technique in endosperm cells of Panax ginseng C.A. Meyer seed. In endosperm cells of indehiscent seed, protein bodies facing the umbiliform layer are different in electron density during the various degraded processes. Gradually, protein matrix near the cell wall was lysed and electron lucent inclusions appeared on umbiliform layer. The protein body with high electron density and the spherosome with low electron density were observed in endosperm cells. As a result of lipid staining, electron density of spherosome is more intense than those of the protein matrix within the protein body in endosperm cells of indehiscent seed. Free spherical spherosomes within the umbiliform layer have a high electron density. The spherical spherosomes were more electron densed and were uniform in comparison with the cytoplasmic proteinaceous granules in endosperm cells of seed with red seed coat. The major component of spherosome was determined to be lipid. Lipase activity occurs in the spherosome and near the endosperm cell wall facing the umbiliform layer. Cytochemical reaction products of lipase were observed in the spherosome membrane and in the inner regions of spherosome. After protein bodies were digested, lipase activities were observed in free spherosomes and near the cell wall of endosperm cells. Umbiliform layer composing of fibrillized wall and digested materials of the endosperm cell showed a little lipase reaction products.
In this investigation, electrochemical characteristics and damage behavior of 316L stainless steel polymer electrolyte membrane fuel cell(PEMFC) were analyzed by potentiodynamic and potentiostatic tests in cathode operating condition of PEMFC. As the result of potentiodynamic polarization test, range of passive region was larger than range of active region. In the result of potentiostatic test, damage depth and width, pit volume, and surface roughness were increased 1.57, 1.27, 2.48, and 1.34 times, respectively, at 1.2 V compared to 0.6 V at 24 hours. Also, as a result of linear regression analysis of damage depth and width graph, trend lines of damage depth and width according to applied potentials were 16.6 and 14.3 times larger, respectively. This demonstrated that applied potential had a greater effect on pitting damage depth of 316L stainless steel. The damage tendency values were 0.329 at 6 hours and 0.633 at 24 hours with applied potentials, representing rapid growth in depth direction according to the test times and applied potentials. Scanning electron microscopy images revealed that surface of specimen exhibited clear pitting damage with test times and applied potentials, which was thought to be because a stable oxide film was formed by Cr and Mo.
For decades, carbon fiber has expanded their application fields from reinforced composites to energy storage and transfer technologies such as electrodes for super-capacitors and lithium ion batteries and gas diffusion layers for proton exchange membrane fuel cell. Especially in fuel cell, water repellency of gas diffusion layer has become very important property for preventing flooding which is induced by condensed water could damage the fuel cell performance. In this work, we fabricated superhydrophobic network of carbon fiber with high aspect ratio hair-like nanostructure by preferential oxygen plasma etching. Superhydrophobic carbon fiber surfaces were achieved by hydrophobic material coating with a siloxane-based hydrocarbon film, which increased the water contact angle from $147^{\circ}$ to $163^{\circ}$ and decreased the contact angle hysteresis from $71^{\circ}$ to below $5^{\circ}$, sufficient to cause droplet roll-off from the surface in millimeter scale water droplet deposition test. Also, we have explored that the condensation behavior (nucleation and growth) of water droplet on the superhydrophobic carbon fiber were significantly retarded due to the high-aspect-ratio nanostructures under super-saturated vapor conditions. It is implied that superhydrophobic carbon fiber can provide a passage for vapor or gas flow in wet environments such as a gas diffusion layer requiring the effective water removal in the operation of proton exchange membrane fuel cell. Moreover, such nanostructuring of carbon-based materials can be extended to carbon fiber, carbon black or carbon films for applications as a cathode in lithium batteries or carbon fiber composites.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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